Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза

Ход работы: В пробирку наливают 10 капель раствора сахарозы и 10 капель 10% раствора серной кислоты. Нагревают в течение 10 минут в кипящей водяной бане. Образуется гидролизат сахарозы.

Реактивы:

гидролизат	гидролизат
+ 1 капля реактива Фелинга I	+ 1 каплю HCI конц.
+ 2 капли реактива Фелинга II	+2 капли реактива Селиванова
Кипятить 5 минут	Кипятить 5 минут

Результат: __________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Реакция Фелинга с крахмалом

Принцип метода: В молекулах полисахаридов практически нет свободных полуацетальных гидроксилов, поэтому они не могут восстанавливать Cu⁺² до Cu⁺¹

Реактивы:

Ход работы: В пробирку внести 2 капли раствора крахмала, добавить 1 каплю реактива Фелинга I и 2 капли реактива Фелинга II. Нагреть на кипящей бане 5 минут

Результат: __________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Реакция крахмала с йодом.

Принцип метода: Амилоза крахмала образует комплекс с йодом, окрашенный в синий цвет. При нагревании комплекс разрушается, после охлаждения снова образуется.

Реактивы:

Ход работы: В пробирку вносят 1 мл дистиллированной воды и 1 каплю крахмала. После перемешивания добавляют 1 каплю Люголя (содержит йод). Отмечают результат. Нагревают на кипящей водяной бане, а затем охлаждают. Наблюдают за изменением окраски.

Результат: __________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани

Принцип метода: Фосфотриозы в отличие от других фосфорилированных метаболитов превращения глюкозы легко подвергаются гидролизу с отщеплением неорганического фосфата в щелочной среде при комнатной температуре.

Реактивы:

1. ТХУ 2,5% раствор;

2. NaОН, 2 моль/л;

3. НСI, 2 моль/л;

4. аскорбиновая кислота, 1% раствор (свежеприготовленный);

5. молибденово-кислый аммоний, 1% раствор в 0,025 моль/л растворе H₂SO₄.

Ход работы:

1. 0,5 г измельченной мышцы экстрагируют 5 мл холодной ТХУ на льду в течение 10 мин, интенсивно перемешивая. Добавляют 5 мл воды и фильтруют через бумажный фильтр.

2. В опытную пробирку помещают 1 мл без белкового фильтрата и добавляют 1 мл раствора NaОН, перемешивают и спустя 20 мин щелочь нейтрализуют добавлением 1 мл раствора НСI.

3. В контрольную пробирку помещают 1 мл раствора NaОН 1 мл раствора НСI и после перемешивания вносят 1 мл исследуемого без белкового фильтрата мышцы.

4. В опытную и контрольную пробирки приливают по 0,5 мл раствора молибденово-кислого аммония и по 0,5 мл раствора аскорбиновой кислоты. Общий объем смеси в обеих пробирках доводят до 10 мл дистиллированной водой. Пробы оставляют при комнатной температуре на 10 мин, после чего их фотометрируют при А=670 нм в кюветах толщиной 10 мм. Опытную пробу колориметрируют против контрольной. По калибровочной кривой оценивают содержание фосфора в пробе.

Результат: __________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________