- •Федеральное агентство по образованию российской федерации
- •I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
- •II.Тема: строение и свойства белков
- •Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
- •Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на пептидные связи
- •Нингидриновая реакция на -аминокислоты
- •Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Реакция Миллона на тирозин
- •Реакция Фоля на цистеин
- •Лабораторная работа № 3 устройство и Принцип работы фотоэлектРоколориметра (фэк).
- •Устройство колориметра фотоэлектроколориметра ( фэк-2 )
- •Общий вид прибора
- •Измерение оптической плотности на кфк-2
- •Количественное определение белка Биуретовый метод
- •Лабораторная работа № 4 Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при кипячении
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Растворимость белков
- •Очистка белков методом диализа
- •Лабораторная работа № 5 Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель – хроматографии
- •III.Тема: ферменты
- •Лабораторная работа № 6
- •Свойства ферментов
- •Влияние температуры на активность ферментов
- •Влияние рН среды на активность ферментов
- •Специфичность действия амилазы и сахаразы
- •Лабораторная работа № 6 Регуляция активности ферментов Изучение аллостерических свойств а-амилазы
- •Лабораторная работа № 7 Количественное определение активности фермента Действие амилазы на крахмал
- •IV.Тема нуклеиновые кислоты Лабораторная работа № 8 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов.
- •V.Тема: биологическое окисление Лабораторная работа № 9 Обнаружение над в дрожжах
- •Лабораторная работа № 10 Обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа № 11 Сопоставление овп рибофлавина.
- •VI.Тема: углеводы
- •Лабораторная работа № 13
- •Качественные реакции на углеводы
- •Реакция Фелинга на моносахариды
- •Реакция Селиванова на фруктозу
- •Реакция Фелинга на дисахариды
- •Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза
- •Реакция Фелинга с крахмалом
- •Реакция крахмала с йодом.
- •Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани
- •Лабораторная работа № 15 Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида
- •Обнаружение молочной кислоты
- •Лабораторная работа № 16 Проба Бенедикта на глюкозу
- •Ход работы
- •VII.Гормоны.
- •Лабораторная работа № 17
- •Качественные реакции на гормоны
- •Реакция на адреналин с хлорным железом
- •Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
- •Лабораторная работа № 18 Флюоресценция продуктов окисления адреналина
- •Диазореакция на адреналин
- •VIII.Витамины
- •Лабораторная работа № 20
- •Качественные реакции на витамины.
- •Реакция восстановления витамина в2.
- •Феррихлоридная проба на витамин в6.
- •На витамин с.
- •На витамин а
- •На витамин d
- •На викасол
- •На витамин е
- •IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
- •Эмульгирование жира
- •Качественные реакции на холестерин
- •Качественная реакция на кетоновые тела
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •X.Тема нуклеиновые кислоты Определение мочевой кислоты в моче
- •Теоретические основы пцр
- •XI.Тема синтез белка Количественное определение днк колориметрическим методом
- •Количественное определение рнк колориметрическим методом
- •Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот
- •Определение активности рибонуклеазы
- •Определение активности дезоксирибонуклеазы
- •XII.Тема биохимия Бензидиновая проба на кровь
- •Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана)
- •Визуальное определение агрегации тромбоцитов
- •Время свертывания по ли-уайту
- •Выделение холестерина из мозговой ткани
- •Выделение фосфатидов из мозговой ткани
- •Оценка транспортной функции сывороточного альбумина
- •Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином
- •Нитропруссидная реакция на пенициллин
- •Мальтольная реакция на стрептомицин
- •Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
- •Качественные реакции на тетрациклин
- •Качественные реакции на кортизол
- •Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
Федеральное агентство по образованию российской федерации
КАРАЧАЕВО-ЧЕРКЕССКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ
ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ
Кафедра химии и биологии
ПРАКТИКУМ ПО БИОХИМИИ
для студентов II курса
лечебного факультета
Черкесск
2007
ВВЕДЕНИЕ
В данном практикуме изложены методики учебных лабораторных работ и некоторых современных биохимических методов исследования, выполняемых студентами на занятиях по биохимии. Проведение лабораторных работ позволит осмыслить теоретический материал, рассмотреть особенности строения и свойства вещества.
Методические указания могут быть использованы студентами лечебного факультета для самостоятельной, учебно- и научно-исследовательской работы.
I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
Работать разрешается только в халате с длинными рукавами.
Длинные волосы должны быть аккуратно убраны.
Выполнять лабораторную работу разрешается только на химическом столе. На химический стол нельзя класть одежду, учебники и другие ценные вещи.
Работа с биологическим материалом должна выполняться в медицинских перчатках.
Работать с агрессивными жидкостями (концентрированные кислоты, щелочи и др.) допускается только строго отвеченном для этого месте (вытяжной шкаф).
Использовать реагенты, маркировка которых указана на этикетке.
Отмеривать такие жидкости необходимо с большой осторожностью следующими способами:
а) с помощью мерного цилиндра;
б) с помощью пипетки с грушей;
в) с помощью стеклянной пипетки. Опустить пипетку в жидкость, после заполнения пипетки жидкостью плотно закрыть верхний конец указательным пальцем, перенести пипетку с жидкостью в пробирку. Осторожно приоткрыть конец пипетки и отмерить жидкость.
Внимание! Запрещается при отмеривании агрессивных жидкостей заполнять ими пипетку путем засасывания ртом. Так можно вызвать повреждение зубной эмали, ожог слизистой оболочки ротовой полости и пищевода.
Если на кожу, слизистые оболочки или в глаза попала агрессивная жидкость, немедленно смыть ее большим количеством воды и обратиться и лаборантскую службу кафедры.
Не нагревать посуду из простого химического стекла на открытом пламени.
Следить за тем, чтобы вода и другие жидкости не попадали в электрические приборы.
В лабораторные центрифуги помещать парное (четное) количество тщательно уравновешенных пробирок. Роторная камера может быть открыта только после полной остановки ротора.
Работу на измерительной аппаратуре следует проводить в присутствии преподавателя или ответственного лаборанта кафедры.
Необходимо аккуратно обращаться с лабораторной посудой, чтобы в случае ее повреждения не получить травму.
После завершения работы убрать рабочее место, отключить электричество, а также убедиться, что краны холодной и горячей воды закрыты.
