- •4. Организация лабораторных исследований
- •4.1.2. Лаборатории особо опасных инфекций центров гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора и ведомств:
- •4.1.3. Лаборатории противочумных учреждений:
- •5.1. Отбор и доставка материала на исследование
- •5.1.1. Способы отбора проб от больных холерой, вибриононосителей и контактных с ними лиц секционного материала
- •5.1.2. Отбор проб из объектов окружающей среды
- •5.2. Порядок исследования
- •5.2.1. Исследование проб от больных и вибриононосителей секционного материала (рис. 1)
- •V этап (через 24 - 36 ч от начала исследования)
- •VI этап (через 36 - 48 ч от начала исследования)
- •5.2.2. Исследование объектов окружающей среды
- •5.2.3. Порядок исследования в условиях односменной работы лаборатории
- •5.3. Идентификация культур холерных вибрионов
- •V. Cholerae V. Cholerae │(по отечественной │
- •5.4. Учет анализов, оформление направлений
- •6.2. Биохимические свойства
- •6.5. Тесты межвидовой дифференциации
- •6.6.2. Определение эпидзначимости холерных вибрионов эльтор
- •V. Cholerae eltor по чувствительности к бактериофагам
- •6.6.4. Определение генов холерного токсина (ctx ав) и токсинкорегулируемых пилей (tcp а)
- •6.7. Оценка антибиотикочувствительности
- •6.7.1. Методы серийных разведений
- •6.7.1.1. Методы серийных разведений в агаре
- •7.2. Реактивы
- •7.4. Порядок контроля качества питательных сред
- •8. Методы серологической диагностики
- •8.1. Определение агглютининов в сыворотке крови
- •8.2. Определение вибриоцидных антител
- •8.3. Определение токсиннейтрализующих
5.1. Отбор и доставка материала на исследование
Материалом для бактериологического анализа могут служить испражнения, рвотные массы, желчь, трупный материал (отрезки тонкого кишечника и желчный пузырь); предметы, загрязненные испражнениями (постельное и нательное белье и др.); вода, ил, гидробионты, сточные воды, содержимое выгребных туалетов; смывы с объектов окружающей среды, пищевые продукты, мухи и др.
Материал от больного забирает медицинский персонал лечебного учреждения немедленно после выявления больного и до начала лечения антибиотиками. Руководитель является ответственным за правильность отбора, хранения и своевременность доставки проб в лабораторию.
Необходимо учитывать высокую чувствительность холерных
вибрионов к дезинфицирующим средствам и кислотам, возможность
антагонистического действия сопутствующей микрофлоры и
предполагаемую концентрацию возбудителя в исследуемом материале.
Если в материале от больных алгидной формой холеры концентрация
6 9
возбудителя достигает 10 - 10 м.к./мл, то в испражнениях больных
легкой формой и леченных антибиотиками, реконвалесцентов и
носителей количество холерных вибрионов обычно не превышает
2 4
10 - 10 м.к./г.
Для отбора проб используют чистую стерильную посуду, не содержащую следов дезинфицирующих растворов. Стерилизацию посуды и других средств забора материала проводят автоклавированием, сухим жаром или кипячением в 2%-м растворе пищевой соды.
Материал для исследования должен быть доставлен не позже чем через 2 ч после его взятия. В случае удлинения сроков доставки используют транспортные среды. Наиболее удобной и достаточно эффективной является 1%-я пептонная вода (рН 8,4 +/- 0,1).
В пептонную воду в качестве ингибитора сопутствующей флоры может быть добавлен теллурит калия из расчета 1:100000 - 1:200000 или моющее средство "Прогресс" в концентрации 0,1 - 0,2%. В отдельных случаях для транспортирования материала могут быть использованы солевые консерванты (см. раздел 7).X
На флаконах (пробирках) с пептонной водой, передаваемых в стационары для отбора проб, должна быть этикетка или надпись с указанием названия среды и даты ее приготовления.
Среды во флаконах или пробирках, закрытых ватно-марлевыми пробками, рекомендуется хранить не более 2-х суток при температуре не выше (10,0 +/- 0,2) °С при условии сохранения их стерильности. Целесообразно обеспечение стационаров и групп забора проб средами в закатанных флаконах.
При наличии у больного диареи материал забирают до начала этиотропной терапии в количестве 10 - 20 мл, у больных легкими формами - 1 - 2 г испражнений. От больных тяжелой формой материал направляют в лабораторию нативным и в 1%-й пептонной воде. В транспортную среду вносят 1 - 2 мл или 1 - 2 г материала на 5 - 6 мл среды.
При вынужденном удлинении сроков доставки материала в лабораторию (длительное плавание, круиз и т.п.) можно использовать полоски фильтровальной (промокательной) бумаги. Жидкими испражнениями пропитывают полоску обычной плотной промокательной бумаги или другого гигроскопичного материала и герметично упаковывают в пластиковый пакет для предохранения от высыхания при транспортировании в лабораторию. На таких полосках холерные вибрионы выживают до четырех - пяти или более недель, пока сохраняется влага.
При обследовании на вибриононосительство материал забирает медицинский персонал лечебно-профилактических учреждений, в очаге создают специальные группы по отбору проб, работающие под руководством эпидемиологов.
Материал в количестве 1 - 2 г может быть доставлен на исследование нативным, в 1%-й пептонной воде или другой транспортной среде.
