8.4.2. Лабораторная диагностика.

Диагностику "прочих" возбудителей гнойных бактериальных менингитов выполняют по общей схемы исследования материала при бактериальных менингитах. В связи с тем, что инфицирование мягких оболочек и вещества мозга преимущественно происходит гематогенным путем, особенно важное значение приобретает посев крови на гемокультуру.

При обнаружении в мазке нативного ликвора или крови дрожжеподобных грибов, кокков или палочек, имеющих своеобразную морфологию, отличающую их от основных возбудителей гнойных бактериальных менингитов, дополнительно к посеву на чашки с "шоколадным" агаром необходимо произвести высев материала на соответствующие питательные среды (дрожжеподобные грибы - среда Сабуро, кокки - кровяной агар, желточно-солевой агар с маннитолом, палочки - кровяной агар, среда Эндо).

В случае выявления роста "прочих" возбудителей гнойных бактериальных менингитов на "шоколадном" агаре проводят предварительную идентификацию изолята с помощью простых тестов (таблица 10) с дальнейшем определением вида возбудителя.

Таблица 10

ПРОСТЫЕ ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ПРИЗНАКИ "ПРОЧИХ" ВОЗБУДИТЕЛЕЙ

ГНОЙНЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ МЕНИНГИТОВ

Возбудитель	Рост на "шоколадном" агаре	Бактерио- скопия	Окси- даза	Ката- лаза
Семейство Enterobacteriaceae	Круглые, выпуклые, иногда слизистые коло- нии. Гнилостный запах	Грам- палочки	-	+
Род Pseudomonas	Крупные слизистые коло- нии, специфический запах мыла, зеленоватый пигмент	Грам - палочки	+	+
Род Acinetobacter	Небольшие непрозрачные колонии серого цвета без гемолизирующих свойств	Грам - палочки, цепочки	-	+
Род Listeriae	Слизистые тонкие коло- нии, иногда в виде налета. Специфический запах творога или молочной сыворотки	Грам + палочки	-	+
Род Streptococcus	Мелкие колонии без тенденции к слиянию. Альфа-, бета-, гамма- гемолиз вокруг колоний	Грам + кокки, цепочки	Х	-
Род Enterococcus	Мелкие непрозрачные сероватые колонии. Альфа-, бета-гемолиз вокруг колоний	Грам + кокки, цепочки	Х	-
Род Staphylococcus	Гладкие выпуклые непрозрачные колонии белого или золотистого цвета	Грам + кокки, гроздья	-	+
Дрожжеподобные грибы	Крупные кремовые колонии с бахромой по периферии. Напоминают "капли майонеза"	Грибы	Х	Х

"-" - тест отрицательный.

"+" - тест положительный.

"Х" - тест не определяется.

Особенностью течения "прочих" менингитов часто является неэффективность антибактериальной терапии, связанная с резистентностью возбудителей к широкому спектру антибиотиков. Правильный и быстрый подбор препарата может сыграть решающее значение при лечении больного.

Чувствительность к антибактериальным препаратам определяют в соответствии с методическими указаниями по контролю МУК 4.2.1890-04 "Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам" диско-диффузионным методом и методом серийных разведений, в первую очередь к бета-лактамным антибиотикам (пенициллину, аминопенициллинам, цефалоспоринам, карбапенемам), хлорамфениколу, рифампицину, фторхинолонам, с учетом биологических особенностей возбудителя.

9. Питательные среды и реактивы

9.1. Питательные среды.

Сывороточный агар.

Основой служит 1,2 - 1,5% агар (рН 7,4), приготовленный на бульоне из рыбного гидролизата, из бульона на переваре Хотгингера (аминный азот 150 - 180 мг/мл) или на сухом питательном агаре специального назначения.

К 80,0 мл расплавленного и остуженного до 50 °С агара добавляют 20,0 мл инактивированной при 56 °С в течение 30 мин. сыворотки, консервированной хлороформом или без консерванта. После перемешивания среду разливают в чашки.

Сывороточная среда с линкомицином.

К 80,0 мл расплавленного и остуженного агара добавляют 20,0 мл сыворотки и 0,5 мл раствора линкомицина в концентрации 1000 мкг/мл. Конечная концентрация антибиотика в среде - 5 мкг/мл.

Плотные среды с углеводами.

Готовят на той же питательной основе, что и сывороточные среды.

К 75,0 мл агаровой основы добавляют 0,9 г одного из углеводов (глюкоза, мальтоза, сахароза, лактоза, фруктоза) и 3,9 мл раствора индикатора фенолового красного. Стерилизация текучим паром 3 дня по 30 мин. или при 0,5 атм. в течение 30 мин.

Индикатор феноловый красный получают, смешивая 0,4 г порошка фенолрот с 16,0 мл 0,1 N раствора NaOH. Затем раствор доводят до объема 200 мл дистиллированной водой, разливают во флаконы и стерилизуют при 1 атм. в течение 20 мин.

Желчно-сывороточный агар.