- •4.2. Клиническое значение
- •4.3. Факторы патогенности и вирулентность
- •4.4. Генетический контроль устойчивости к метициллину
- •4.5. Особенности эпидемиологии mrsa
- •5. Лабораторные методы идентификации и типирования mrsa
- •5.1. Фенотипические методы
- •5.2.3. Вспомогательные методики
- •5.2.4. Идентификация гена mecA
- •6. Организация эпидемиологического надзора
6. Организация эпидемиологического надзора
за внутрибольничными инфекциями, вызванными MRSA
Эпидемиологический надзор за MRSA является составной частью эпидемиологического надзора за ВБИ и включает следующие составные элементы:
- выявление, учет и регистрацию всех случаев ВБИ, вызванных MRSA и подтвержденных результатами микробиологических исследований;
- выявление пациентов, колонизованных MRSA (по эпидемическим показаниям);
- определение спектра устойчивости изолятов MRSA к антибиотикам, антисептикам, дезинфектантам и чувствительности к бактериофагам;
- контроль за состоянием здоровья медицинского персонала (носительством эпидемически значимых штаммов, заболеваемостью);
- санитарно-бактериологические исследования объектов окружающей среды на наличие MRSA;
- проведение молекулярно-генетического мониторинга, целью которого является получение данных о структуре госпитальных изолятов, выявлении среди них эпидемически значимых, а также расшифровка механизмов их циркуляции и распространения в стационаре;
- слежение за соблюдением санитарно-гигиенического и противоэпидемического режима;
- эпидемиологический анализ заболеваемости и смертности от ВБИ, позволяющий сделать заключение об источниках, путях и факторах передачи, а также условиях, способствующих инфицированию.
Центральным звеном эпидемиологического анализа должен являться молекулярно-генетический мониторинг. Основанный на его данных эпидемиологический анализ не только позволит правильно оценивать, но и прогнозировать эпидемические ситуации, посредством заблаговременных противоэпидемических мероприятий предотвращать вспышки ВБИ, вызванные MRSA.
Организационно-методическое руководство работой по профилактике и борьбе с ВБИ, вызванными MRSA, осуществляют структурные подразделения органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор в республиках, краях, областях, округах и г. г. Москве и Санкт-Петербурге.
Федеральные органы исполнительной власти, включая органы управления здравоохранением, участвуют в осуществлении комплекса мероприятий по профилактике ВБИ, в т.ч. обусловленных MRSA.
Библиографические данные
1. Концепция профилактики внутрибольничных инфекций. Утверждена Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г. Онищенко 6.12.1999. Авторы: Покровский В.И., Монисов А.А., Шандала М.Г., Семина Н.А., Ковалева Е.П., Пантелеева Л.Г., Акимкин В.Г., Савицкая К.К., Абрамова И.М., Шаханина И.Л., Трофимова О.Д., Перепанова Т.С., Лазикова Г.Ф., Фролочкина Т.И., Соколова Н.Ф., Федорова Л.С. Эпидемиология и инфекционные болезни, 2000, N 5, 4 - 14.
2. Бут О.М., Шеремет О.В., Ясенкова О.Е. и др. Микробный пейзаж отделяемого ран в стационарах хирургического профиля. В сб. "Роль клинической микробиологии в профилактике внутрибольничных инфекций. Тезисы докладов Российской научно-практической конференции с международным участием". Москва, 2004 г.: 22.
3. Гаян Л.В. Распространенность полирезистентных штаммов микроорганизмов в городском стационаре ургентного профиля. В сб. "Роль клинической микробиологии в профилактике внутрибольничных инфекций. Тезисы докладов Российской научно-практической конференции с международным участием". Москва, 2004 г.: 31 - 32.
4. Герамсичик Л.Ф., Кузнецова А.Ю., Середа Т.А. Микробный пейзаж и формирование антибиотикорезистентности возбудителей ГСИ в ожоговом отделении МУЗМСЧ "Северсталь". В сб. "Роль клинической микробиологии в профилактике внутрибольничных инфекций. Тезисы докладов Российской научно-практической конференции с международным участием". Москва, 2004 г.: 32 - 33.
5. Дмитренко О.А., Прохоров В.Я., Суборова Т.И., Волков И.И, Шагинян И.А., Гинцбург А.Л. Метициллинрезистентные Staphylococcus aureus - возбудители внутрибольничных инфекций в стационарах России. Роль факторов патогенности. В сб. Узловые вопросы борьбы с инфекцией. Материалы конференции. СПб ВМедА., 2004: 76 - 77.
6. Дмитренко О.А., Шагинян И.А., Прохоров В.Я. и др. Молекулярно-генетическое типирование метициллинрезистентных штаммов Staphylococcus aureus, выделенных в разных регионах Российской Федерации на основании изучения размеров продукта амплификации и последующего рестрикционного анализа коагулазного гена. ЖМЭИ, 2005, 4, 46 - 52.
7. Евстропов А.Д., Ильина В.Н, Шмырин А.А. и др. Этиология бактериемии у обожженных. Материалы VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. Москва, РОСИНЭКС, 2002 г., т. 4: 147 - 148.
8. Зуева В.С, Дмитренко О.А., Акатов А.К. и др. Метициллинрезистентные стафилококки. ЖМЭИ, 1988, 4, 100 - 108.
9. Никитенко Т.А., Кондратенко Н.Н. Ведущие микроорганизмы - возбудители внутрибольничных инфекций в стационарах различного профиля в современных условиях. В сб. "Роль клинической микробиологии в профилактике внутрибольничных инфекций. Тезисы докладов Российской научно-практической конференции с международным участием". Москва, 2004 г.: 68 - 69.
10. Определитель бактерий Берджи. Т. 2. Пер. с англ./Под ред. Дж. Хоума, Н. Крига, П. Снита и др. М.: Мир, 1997.
11. Пылаева С.И., Гординская Н.А., Кувакина Н.А. и др. Эпидемиологическая ситуация в травматологической клинике, связанная с циркуляцией метициллинрезистентных стафилококков. Материалы VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. Москва, РОСИНЭКС, 2002 г., т. 4: 163 - 164.
12. Черепанова Т.А., Шаликова Г.Г. Чувствительность к антибиотикам S. aureus. Материалы VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. Москва, РОСИНЭКС, 2002 г., т. 4: 128.
13. Страчунский Л.С., Дехнич А.В., Белькова Ю.А. Сравнительная активность антибактериальных препаратов, входящих в лекарственные формы для местного применения, в отношении Staphylococus aureus: результаты российского мультицентрового исследования. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2002, т. 4: 157 - 162.
14. Шагинян И.А., Дмитренко О.А. Молекулярная эпидемиология инфекций, вызываемых метициллинустойчивыми стафилококками. ЖМЕИ, 2003, 3, 99 - 109.
15. Ayliffe G.A. The progressive intercontinental spread of methicillin-resistant Staphylococcus aureus.// Clin. Infect. Dis. - 1997, 25: 574 - 579.
16. Baird-Parker A.C. 1974. Genus Staphylococcus. In Buchanan
and Gibbons (ed.), Bergey's manual of determinative bacteriology,
th
8 ed., The Williams and Wilkins Co., Baltimore, pp. 483 - 489.
17. Beck W.D., Berger-Bachi B. and Kayser F.H. Additional DNA in methicillin-resistant Staphylococcus aureus and molecular cloning of mec - specific DNA.// J. Bacteriol. 1986, 165: 373 - 378.
18. Berger-Bachi В., Strassle A., Gustаfson J.E. and Kayser F.H. Mapping and characterization of multiple chromosomal factors involved in methicillin resistance in Staphylococcus aureus.// Antimicrob. Agents Chemother. 1992, 36: 1367 - 1373.
19. Boyce J.M. Epidemiology and prevention of nosocomial infection, p. 309 - 329. In K.B. Crossley and G.L. Archer (ed.) The staphylococci in human disease. Churchill Livingstone, New York, N.Y. 1997.
20. Centers for disease control and prevention NNIS system. 2001. National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System report, data summary from January 1992 - June 2001.// Am. J. Infect. Control - 2001, issued August, 2: 404 - 421.
21. Combined Working party of the British Society of Antimicrobial Chemotherapy, the Hospital Infection Society and the Infection Control Nurses Association. Revised guidelines for the control of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections in hospitals.// J. Hosp. Infect. - 1998, 39: 253 - 290.
22. Copsgrove S.E., Sakoulas G., Perecevich E.N. et al. Comparison of mortality associated with methicillin-resistant and methicillin susceptible Staphylococcus aureus bacteremia; a meta-analysis.//Clin. Infect Dis. - 2003, 36: 53 - 59.
23. Corne Ph., Marchandin H., Jonquet O. et al. Molecular evidence that nasal carriage of Staphylococcus aureus plays a role in respiratory tract infections of critically ill patients.// J. Clinical Microbiol. - 2005, 43, 7: 3491 - 3493.
24. Dinges M.M., Orwin P.M. and Schlievert P.M. Exotoxins of Staphylococcus aureus.// Clin. Microbiol. Rev. - 2000, 13, 1: 16 - 34.
25. Czachor J.S., Herchline Т.Е. Bacterimic nonmenstrual staphylococcal toxic shock syndrome associated with enterotoxins A and C.// Clin. Infect. Dis. - 2001, 32: e53 - 56.
26. Edmond M.B., Wallace S.E., Moclish D.K. et al. Nosocomial bloodstream infections in United States hospitals: A three-year analysis.// Clin. Infect. Dis. - 1999, 29: 239 - 244.
27. Engelmann J.J., Carmeli Ye., Cosgrove S.E., Fowler V.G., Bronstein M.Z., Trivette Sh.L., Brigs J.P., Sexton D.J., Kaye K.S. Adverse clinical and economic outcomes attributable to methicillin resistance among patients with Staphylococcus aureus surgical site infection.// Clin. Infect. Dis. 2003, 36: 592 - 597.
28. Enright M.C, Robinson D.A., Randle G. et al. The evolutionary history of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA).// PNAS - 2002, 99, 11: 7687 - 7692.
29. Fridkin S.K., Hageman J., Mcdougal L.K. et al. Epidemiological and microbiological characterization of infections caused by Staphylococcus aureus with reduced susceptibility to vancomycin, United States, 1997 - 2001. Clin. Infect. Dis. 2003, 36: 429 - 439.
30. Giacometti A., Cirioni O., Schimizzi A.M. et al. Epidemiology and microbiology of surgical wound infections.// J. Clin. Microbiol. - 2000, 38, 2: 918 - 922.
31. Griffiths C., Lamagni T.L., Crowcroft N.S., Duckworth G. et al. Trends in MRSA in England and Wales: analysis of morbidity and mortality data for 1993 - 2002.// Health Stat Q. - 2004, Spring, (21): 15 - 22.
32. Hartman B.I., Tomasz A.// Low-affinity penicillin-binding protein associated with beta-lactam resistance in Staphylococcus aureus.// J. Bacteriol. - 1984, 158: 513 - 516.
33. Hiramatsu K. Molecular evolution of MRSA.//Microbiol. Immunol. - 1995, 39, 8: 531 - 543.
34. Holden M.T.G., Feil E.J., Lindsay J.A. et al. Complete genomes of two clinical Staphylococcus aureus strains: Evidence for the rapid evolution of virulence and drug resistance.// PNAS - 2004, 1001, 26: 9786 - 9791.
35. Hookey J.V., Richardson J.F. and Cookson B.D. Molecular typing of Staphylococcus aureus on PCR restriction fragment length polimorphism and DNA sequence analysis of the coagulase gene.// J. Clin. Microbiol. - 1998, 36, 4: 1083 - 1089.
36. Huang S.S. and Platt R. Risk of methicillin-resistant Staphylococus aureus infection after previous infection or colonization.// Clin. Infect. Dis. 2003: 36, 281 - 285.
37. Jevons M.P. "Celbenin"-resistant staphylococci. Br. Med. J. 1961, 1: 124 - 125.
38. Ito Т., Katayama Y., Asada K. et al. Structural comparison of three types of staphylococcal cassette chromosome mec integrated in the chromosome in methicillin-resistant Staphylococcus aureus.// Antimicrob. Agents Chemother. - 2001, 45, 5: 1323 - 1336.
39. Katayama Y., Ito Т., and Hiramatsu K. A new class of genetic element, staphylococcus cassette chromosome mec, encodes methicillin resistance in Staphylococcus aureus.// Antimicrob. Agents Chemother. - 2000, 44: 1549 - 1555.
40. Kaye K.S., Engelmann J.J., Mozaffari E. and Carmeli Ye. Reference group choice and antibiotic resistance outcomes.// Emerg. Infect. Dis. - 2004, 10, 6: 1125 - 1128.
41. Keiko O., Iwakawa K., Turnidge J.D. et al. Dissemination of new methicillin-resistant Staphylococcus aureus clones in the community.// J. Clin. Microbiol. - 2002, 40, 11: 4289 - 4294.
42. Kerr S., Kerr G.E., Makintosh C.A. and Marples R.R. A survey of methicillin-resistant Staphylococcus aureus affecting patients in England and Wales.// J. Hosp. Infect. - 1990, 16: 35 - 4.
43. Kluytmans J., van Belcum A., Verbruch H. Nasal carriage of Staphylococcus aureus: epidemiology, underlying mechanism and associated risks.// Clin. Micro Rev. 1997, 10, 3: 505 - 520.
44. Kuroda M., Ohta Т., Uchiama I. et al. Whole genome sequencing of methicillin-resistant Staphylococcus aureus.// The Lancet - 2001, 357, 21: 1225 - 1240.
45. Lechmann H.S., Heaton Т., Mallon D., Holt P.G. Staphylococcal enterotoxin-B-mediated stimulation of interleukin-13 production as a potential aetiologic factor in eczema in infants.// Int. Arch. Aller Immunol. - 2004, 135, 4: 306 - 312.
46. Liassine N., Auckenthaler R., Descombes M.-C. et al. Community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolated in Switzerland contains the Panton-Valentine leukocidin or exfoliative toxin genes.// J. Clin. Microb. 2004, 42, 825 - 828.
47. Lowy F.D. Antimicrobial resistance: the example of Staphylococcus aureus. J. Clin. Invest. 2003, 111, 9, 1265 - 1273.
48. Marples R.R. and E.M. Cooke. Workshop on methicillin-resistant Staphylococcus aureus.// J. Hospital. Infect. - 1985, 6: 342 - 348.
49. Mehrotra M., Wang G. and Johnson W.M. Multiplex PCR for detection of genes for Staphylococcus aureus enterotoxins, exfoliative toxins, toxic shock syndrome toxin 1, and methicillin resistance.// J. Clin. Microbiol. - 2000, 38, 3: 1032 - 1035.
50. Mongkolrasttanothai K, Boyle S., Kahana M.D. and Daum R.S. Severe Staphylococcus aureus infections caused by clonally related community-acquired methicillin-susceptible and methicillin-resistant isolates.// Clin. Infect. Dis. - 2003, 37: 1050 - 1058.
51. Novick R.P. Mobile genetic elements and bacterial toxinoses: the superantigen-encoding pathogenicity islands of Staphylococcus aureus.// Plasmid - 2003, 49, 2: 93 - 105.
52. Oliveira D., Santos-Sanches I., Mato S. et al. Virtually all methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections on the Cargest Portuguese teaching hospital are caused two internationally spread multiresistant strains: the "Iberian" and the Brazilian clones of MRSA.// Clin. Microbiol. Infect - 1998, 4: 373 - 384.
53. Oliveira D.C., Tomasz A. and de Lencastre H. Secrets of success of human pathogen: molecular evolution of pandemic clones of methicillin-resistant Staphylococcus aureus.// The Lancet Infect. Dis. - 2002, 2: 180 - 189.
54. Romero-Vivas J., Rubio M., Fernandez C., Picazo J.J. Mortality associated with nosocomial bacteraemia due to methicillin-resistant Staphylococcus aureus.// Clin. Infect. Dis. 1995, 21: 1417-1423.
55. Ross F.J., Studevant D.E., Mackie St.M. et al. Evolutionary genomics of Staphylococcus aureus: Insights into the origin of methicillin-resistant strains and toxic shock syndrome epidemic.// PNAS - 2001, 9815: 8821 - 8826.
56. Rubin R.J., Harrington C.A., Poon A. et al. The economic impact of Staphylococcus aureus infections in New York City hospitals.// Emerg. Infect. Dis. - 1999, 5: 9 - 17.
57. Rybak M.J., Pharm D. K.L. Community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus: a review.// Pharmacotherrapy - 2005, 25, 1: 74 - 85.
58. Schlivert P.M. Staphylococcal enterotoxin В and toxic-shock syndrome toxin-1 are significantly associated with non-menstrual TSS.// Lancet - 1986, 1: 1149 - 1150.
59. Smith T.L., Pearson M.L., Wilcox K.R. et al. Emergence of vancomycin resistance in Staphylococcus aureus. Glycopeptide - intermediate Staphylococcus aureus working group. N. England J. Med. 1999, 18, 340, 7: 493 - 501.
60. de Sousa M.A., de Lancastre H. Evolution of sporadic isolates of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in hospitals and their similarities to isolates of community-acquired MRSA.// J. Clin. Microbiol. 2003, 41, 8: 3806 - 3815.
61. Tomasz A., Nachman S. and Leaf H. Stable classes of phenotypic expression in methicillin-resistant clinical isolates of staphylococci.// Antimicrob. Agents Chemother. 1991, 35: 124 - 129.
62. Voss A., Milatovich D., Wallrauch-Schwarz C. et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in Europe.// Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. - 1994, 13, 1: 50 - 55.
63. Wagner P.L. and Waldor M.K. Bacteriophage control of bacterial virulence.// Infect. Immun. - 2002, 70, 8: 3985 - 3993.
64. Wilcox M.H., Walker C., Winstanley N.G., Limb D.I. True identity of control Staphylococcus aureus strains and their performance in the tube coagulase test.// J. Med. Microbiol. - 1996, 44, 6: 496 - 499.
Приложение
Таблица 1
СПИСОК КОНТРОЛЬНЫХ ШТАММОВ ДЛЯ АМПЛИФИКАЦИИ
Номер штамма |
Ген coa |
Тип CCR |
Класс mec |
Тип SCCmec |
Гены PTSAgs |
S.aureus Е84/5528/1 |
+ |
3 |
A |
III |
sea |
S.aureus Е03/М307 |
+ |
1 |
A |
I |
- |
S.aureus E12/M258 |
+ |
2 |
В |
IV |
- |
S.aureus NCTC 8507 |
+ |
- |
- |
- |
sea, seb |
S.aureus NCTC 10972 |
+ |
- |
- |
- |
seb |
S.aureus NCTC 8331 |
+ |
- |
- |
- |
sec |
S.aureus NCTC 9315 |
+ |
- |
- |
- |
tst-H |
S.epidermidis 14990 |
+ |
- |
- |
- |
- |
Таблица 2
РАСЧЕТ РЕАКЦИОННОЙ СМЕСИ ДЛЯ ПЦР-АМПЛИФИКАЦИИ
В ОБЪЕМЕ 25 МКЛ
┌─────┬──────┬──────┬────────┬─────┬───────────────┬───────┬─────┐
│Число│ Н О │Б х 10│ MgCl │dNTP │ Праймеры │Фермент│ ДНК │
│проб │ 2 │(мкл) │ 2 │(мкл)│ │ (мкл) │(мкл)│
│ │(мкл) │ │(25 mM) │ │ │ │ │
│ │ │ │ (мкл) │ │ │ │ │
├─────┼──────┼──────┼────────┼─────┼───────┬───────┼───────┼─────┤
│ │ │ │ │ │R (мкл)│F (мкл)│ │ │
├─────┼──────┼──────┼────────┼─────┼───────┼───────┼───────┼─────┤
│1 │14,5 │2,5 │2,5 │2,5 │1 │1 │0,4 │1 │
├─────┼──────┼──────┼────────┼─────┼───────┼───────┼───────┼─────┤
│5 │72,5 │12,5 │12,5 │12,5 │5 │5 │2 │ │
├─────┼──────┼──────┼────────┼─────┼───────┼───────┼───────┼─────┤
│10 │145 │25 │25 │25 │10 │10 │4 │ │
├─────┼──────┼──────┼────────┼─────┼───────┼───────┼───────┼─────┤
│15 │217,5 │37,5 │37,5 │37,5 │15 │15 │6 │ │
├─────┼──────┼──────┼────────┼─────┼───────┼───────┼───────┼─────┤
│20 │290 │50 │50 │50 │20 │20 │8 │ │
└─────┴──────┴──────┴────────┴─────┴───────┴───────┴───────┴─────┘
Приготовленная смесь разливается по пробиркам по 24 мкл. Затем в каждую вносится тестируемая ДНК в количестве 1 мкл.
