«Бруцеллез дигностикасындағы жайылмалы агглютинация реакциясы (Райт реакциясы)»

Шаг 1

Штативке бір қатарға 5 стерилді серологиялық пробиркаларды еңгізу және бөлек 2 пробирка реакцияны бақылау үшін. Пробиркаларды 1-5 дейін нөмрлеу, бақылау №1 – СБ (сары суды бақылау), бақылау №2 – АБ (антигенді бақылау)

Шаг 2

Бақылау №1(СБ-дан) басқа барлық пробиркаларға 0,5 мл стерилді физиологиялық ертінді еңгізу.

Шаг 3

Науқас адамның сарысуынан жұмыс ертіндісі -1:25 дайындалады: пробиркаға 24 мл физиологиялық ертінді еңгізеді және 1 мл науқастың сарысуы қосылады. .

Шаг 4

1-ші пробирканың ішіндегі 0,5 мл физ.ертіндіге 0,5 мл сары судың жұмыс ертіндісі (1:25) еңгізеді, түтікпен араластырады. Пробиркаға 1:50 сұйылту ертіндісі деп жазады.

Шаг 5

Жана түтікпен 1-ші пробиркадан 0,5 мл ертіндіні 2-ші пробиркаға көшіреді, түтікпен араластырады. Пробиркаға 1:100 сұйылту деп жазады

Шаг 6

Жана түтікпен 2-ші пробиркадан 0,5 мл ертіндіні 3-ші пробиркаға көшіреді, түтікпен араластырады. Пробиркаға 1:200 сұйылту деп жазады.

Шаг 7

Жана түтікпен 3-ші пробиркадан 0,5 мл ертіндіні 4-ші пробиркаға көшіреді, түтікпен араластырады. Пробиркаға 1:400 сұйылту деп жазады.

Шаг 8

Жана түтікпен 4-ші пробиркадан 0,5 мл ертіндіні 5-ші пробиркаға көшіреді, түтікпен араластырады. 5-ші пробиркадан тағыда 0,5 мл сүйылту алып дезинфекциялық ертіндіге төгіп тастайды. Пробиркаға 1:800 сұйылту деп жазады.

Шаг 9

Бруцеллезді диагностикалық ампуланы ашып №1-ші бақылаудан (СБ) басқа барлық пробиркаларға 3 тамшыдан диагностикалық антиген еңгізеді.

Шаг 10

Штативтегі пробиркаларды селкілу

Шаг 11

Термостатта 37°С температурасында 2 сағат инкубациялау

Шаг 12

Агглютинация реакцияның нәтижесін бағалау: егер реакция оң болса пробирканың түбінде тұнба пайда болады, егер пробиркада ертінді мөлдір болса - реакция теріс. Антидене титрі – пробиркалардың қатарында ең соңғы оң нәтиже беретін сүйылту

Шаг 1

Реакция ингредиенттерін дайындау: антиген 1 – бейспецификалық антиген (бұқа жұрегі бұлшықеттерінің липидтері), антиген 2 және антиген 3 – трепонеманың спецификалық антигендері, инактивацияланған зерттеу сарысуы, натрий хлоридтің изотониялық ертіндісі, комплемент (жұмыс дозасы), гемолитикалық жүйе және 4 стерилді пробирканы номерлеу (1-і, 2-і, 3-і, 4-і (бақылау)).

Шаг 2

Барлық пробиркаларға 0,1 мл зерттелетін сарысу еңгізіледі.

Шаг 3

Натрий хлоридтің 0,9% ертіндісін 0,4 мл-ден 1-і, 2-і және 3-і пробиркаға және 0,9 мл-ң 4-і пробиркаға құю.

Шаг 4

1-і пробиркаға 0,5 мл бейспецификалық антиген 1 енгізу

Шаг 5

2-і пробиркаға 0,5 мл спецификалық антиген 2 енгізу

Шаг 6

3-і пробиркаға 0,5 мл спецификалық антиген 3 енгізу

Шаг 7

Барлық пробиркаларға 0,5 мл комплементті қосу, араластыру.

Шаг 8

Термостатта 37⁰С температурада 45 минут инкубациялау.

Шаг 9

Барлық пробиркаларға 1,0 мл гемолитикалық жүйе қосу. Пробиркаларды шайқайды, термостатта 37⁰С 40-60 минут инкубациялайды

Шаг 10

Қорытындысы. Бірінші үш пробиркада «оң нәтижелі реакция» +++ - гемолиз болмайды (пробиркадағы сұйықтық мөлдір, эритроциттер тұбінде шөгіп қалды. «теріс нәтижелі реакция» «-» - барлық пробиркада гемолиз (эритроциттердің ыдырауы, лизисі, сұйықтық қызарған)).