5) Механизм инфицирования

Выделяют следующие стадии заражения:

• Прикрепление

• Проникновение капсида в зараженную клетку

• Выход вирусной ДНК из капсида

• Синтез вирусной ДНК, сборка и выход вируса из зараженной клетки

• Выход вируса из клетки

5.1) Прикрепление

Герпесвирусы прикрепляются к специфическим рецепторам на клеточной поверхности, которые еще не идентифицированы. Все представления о специфичности клеток в этом отношении основываются на исследованиях, подобных тому, что лишь часть клеток человека (например, только В-лимфоциты) содержат рецепторы для EBV. Попытки найти клетки животных, не содержащие рецепторов для HSV, успеха не дали; тем не ме­нее кроме человека «естественному» заражению этим вирусом подвержены только шимпанзе. Ничего не известно и об антирецепторах— тех компонентах поверхности вирусной частицы, которые связываются с рецепторами.

5.2) Проникновение капсида в зараженную клетку

Прикрепление вируса активирует белок, находящийся на поверхности вируса и вызывающий слияние оболочки вируса с плазматической мембраной. Предполагают, что происходит именно слияние оболочки с плазматиче­ской мембраной, а не фагоцитоз. Это согласуется с обнаружением на клеточной поверхности Fc-рецепторов оболочки вириона, в том числе и в тех случаях, когда проникновение вируса не приводит к экспрессии вирусных генов.

Присутствие в оболочке вируса активируемого компонента, вызывающего ее слияние с клеточной мембраной, подтверждается также тем, что температурочувствительный мутант HSV-1 по гликопротеину В адсорбирует­ся на клеточной поверхности, не проникая внутрь клетки. Если после такой адсорбции химически индуцировать слияние оболоч­ки вируса с плазматической мембраной, происходит заражение и вирус дает потомство. Утрата чувствительности к нейтрали­зации, обусловленная проникновением адсорбированного вируса в клетку, происходит очень быстро.

5.3) Выход вирусной днк из капсида

После проникновения в клетку капсид транспортируется к порам в ядерной мембране, а затем под контролем вирусных факто­ров вирусная ДНК выходит в нуклеоплазму. Капсиды температурочувствительного мутанта HSV-1 (HFEM) tsB7 скапливаются у ядерных пор, и выход вирусной ДНК наблюдается только после понижения температуры до пермиссивного уровня. На ранних стадиях заражения вирусом дикого типа у ядерных пор легко обнаруживаются пустые капсиды. Следуя аналогии с заражени­ем аденовирусом, можно предположить, что транспорт капсидов герпесвирусов к ядерным порам осуществляется при участии цитоскелета. Родительская вирусная ДНК накапливается в ядре.

5.4) Синтез вирусной днк, сборка и выход вируса из зараженной клетки

5.4.1) Репликация вирусной днк

Отличительной особенностью герпесвирусов, которой нет ни у каких других ядерных ДНК-содержащих вирусов, является необычно большое число кодируемых ими ферментов, вовлеченных в синтез молекулы ДНК. Хотя последовательность событий при репликации вирусной ДНК в общих чертах известна, многие детали этого процесса еще предстоит изучить. В клетках, зараженных HSV, синтез вирусной ДНК обнаруживается примерно через 3 ч после заражения и продолжается по меньшей мере 9—12 ч.

В клетках, зараженных HSV-1, репликации подвергается лишь небольшая часть всей ДНК родительского вируса.

HSV-1 и, вероятно, HSV-2 содержат три начальные точки репликации ДНК. Две из них попадают в инвертированную C-последовательность S-компонента, тогда как третья находится в середине L-компонента вблизи генов, кодирующих главный ДНК-связывающий белок и ДНК-полимеразу.

Секвенирование начала репликации свидетельствует о том, что все функции нача­ла репликации сосредоточены в отрезке ДНК длиной 90 bр, в состав которого входит почти идеально палиндромная АТ-богатая последовательность длиной 45 bр. Поскольку участки начала репликации в составе S-компонента содержатся внутри повторов, можно ожидать, что они идентичны.

Относительно нуклеотидной последовательности начала репликации в составе L-компонента известно очень немного, однако никакой гомологии фрагментов, содержащих начальные точки репликации в S- и L-компонентах, не обнаружено. Практически ничего не известно о том, как функционируют эти участки. Особенно важно установить, функционируют ли какие-то из них или все они непосредственно в процессе репликации вирусной ДНК и насколько они эквивалентны или подчинены друг другу. В некоторых случаях петли в реплицирующейся ДНК HSV не совпадают с расположением начальных точек репликации. Начальные точки репликации в составе S-компонента располагаются выше сайтов инициации транскрипции альфа-генов и в то же время отличаются от главных последовательностей, регулирующих экспрессию этих генов.