14. Будова згортувача сироватки. Правила роботи з апаратурою. Техніка механічної стерилізації. Мембранні фільтри, фільтри Зейтца.

Згортував сироватки являє собою плоский металевий ящик з подвійними стінками , покритий зовні теплоізоляційним матеріалом. У простір між стінками через спеціальний отвір , що знаходиться у верхній частині зовнішньої стінки , наливають воду. Отвір закривають пробкою , в яку вставлений термометр. Закривають апарат двома кришками : скляного та металевого . Через скляну кришку можна спостерігати за процесом згортання. Пробірки із середовищами укладають на дно згортувача в похилому положенні. Нагрівання здійснюється за допомогою газу або електрики. Середовища стерилізують одноразово при температурі 90 ° С протягом 1 год або дрібно - 3 дні поспіль при 80 ° С протягом 1 ч.

Механічна стерилізація полягає у відділенні мікробів від рідини за допомогою стерильних мікропористих фільтрів. Проводиться в асептичних умовах. В якості мікропористого фільтруючого матеріалу використовують каолін , фарфор , паперово- азбестову масу. Мікроби затримуються при фільтрації не тільки внаслідок того , що вони мають велику величину в порівнянні з найдрібнішими порами фільтра. У порах фільтра затримуються і мікроби , що мають відносно меншу величину. В даний час загальноприйнятим є пояснення механізму фільтрації головним чином адсорбцією мікробів , яка відбувається в порах фільтруючих матеріалів , які в більшості випадків заряджені негативно . Фільтри з мікропористих матеріалів виготовляють різної конструкції і форми. Фільтри з порцеляни або каоліну мають вигляд порожнистих циліндрів, один кінець у них закритий, а в іншому є отвір . Виготовляють їх з діаметром пор від 1 до 3 мк . З таких фільтрів найбільш часто застосовують « Бактеріальний фільтр Гіки ». Рідину, призначену для фільтрації, рівномірно наливають всередину фільтра і вона , просочуючись крізь його стінки , витікає в стерильний посудину , або , навпаки , фільтр поміщають у посудину з фільтрованою рідиною. У цьому випадку рідина надходить крізь стінки всередину фільтра і звідти втекти через наявне у фільтрі отвір в стерильний посудину . Фільтрація проводиться при розрідженні , створюваному в аптечних умовах за допомогою водоструминного насоса. Мембранний фільтр дозволяє видаляти колоїдні частки, дріжджові клітини і бактерії, що містяться в рідині. Ця операція повинна проводитися безпосередньо перед розливом , щоб запобігти повторне забруднення. Мембранна фільтрація незамінна для позбавлення води від мікробів. Принцип методу мембранної фільтрації концентрування присутніх у аналізованої пробі мікроорганізмів на поверхні мембранного фільтру з розміром пір 0,45-0,65 мкм шляхом пропускання проби через фільтр. Після фільтрації проби, фільтр із затриманими мікроорганізмами поміщають на поживне середовище і інкубують у відповідних умовах.

Фільтри Зейтца являють собою азбестові пластинки різної величини. При монтуванні приладу для стерилізації пластинку поміщають на сітку між металевими дисками ( з отвором в середині ) , які щільно притискають один до одного гвинтами. Змонтований фільтр вставляють через пробку в колбу з бічною відводкою ( колба Бунзена ) і гумовою трубкою , обгортають папером і стерилізують в автоклаві при 120 ° С протягом 20-30 хв. Для фільтрування матеріалу створюють розрідження в колбі Бунзена , під'єднуючи до неї гумову трубку з розріджується масляним ручним насосом Комовского або електровакуумним насосом.

15. Миття лабораторного посуду (нового і того, що використовувався).

Весь лабораторний посуд , що є після проведення дослідження ( чашки , колби , пробірки з середовищами ), поміщається в спеціальні бікси або відра з кришками і знезаражується автоклавуванням при 126 °С протягом 60 хв або 132 °С протягом 20 хв . Категорично забороняється звільняти використаний посуд від вмісту ( поживних середовищ , розчинів з посівами ) до знезараження. У виняткових випадках допускається знезараження кип'ятінням в 2 %-ном розчині харчової соди або 0,5 %-ном розчині нейтрального миючого засобу протягом 60 хв з моменту закипання. Кип'ятіння має відбуватися в закритій ємності з повним зануренням у розчин.

Відпрацьовані піпетки знезаражують у високому посудині з повним зануренням у дез. розчин. Тривалість знезараження залежить від застосовуваного дез. розчину. Допускаються також до використання нові дезінфекційні засоби , які отримали дозвіл на застосування . У цих випадках слід керуватися рекомендаціями виробника. Для миття посуду необхідно застосовувати нейтральні миючі засоби, також використовують нейтральні синтетичні миючі засоби , що не містять біодобавок.

Миття посуду виконують наступними способами:

- Механічна обробка за допомогою щіток , йоржів , пропарювання ;

- Миття за допомогою води , миючих засобів , органічних розчинників (спирт , гексан тощо);

- Миття окислювачами - кислоти , розчини солей (сірчана кислота , азотна кислота , біхромат калію та ін.)

Миття посуду для відбору проб виконується одним з цих способів (або декількома відразу ) залежно від типу і ступеня забруднення.

При митті посуду необхідно керуватися наступними правилами:

- Посуд , в якій були доставлені проби , необхідно мити відразу , по закінченні аналізу проб , залишати посуд брудної неприпустимо ;

- Посуд , в яку будуть відбирати проби для аналізу на АПАВ , фосфати , кремній і бор , не допускається мити із застосуванням детергентів ( миючих засобів);

- Посуд , в яку будуть відбирати проби для аналізів на метали і сульфати а також для аналізів , виконуваних флуориметричним методом не допускається мити хромовою сумішшю.