План роботи

1.Визначення загального вигляду дріжджових кліток і обсіменіння сторонніми мікроорганізмами.

2.Визначення % брунькованих кліток

3.Визначення % мертвих кліток

4.Визначення кількості кліток, що містять глікоген

5.Провести підрахунок кліток в камері Горяєва

Хід роботи

Завдання 1. Визначення % брунькованих кліток.

Пробу дріжджів 1г із центральної частини бруска внести в колбу зі 100 см³ стерильної водопровідної води і ретельно розмішати.

З вихідного розведення 10¹ зробити ряд послідовних розведень 10² – 10⁶, для чого перенести 1 см суспензії в пробірку з 9 см стерильної води. За допомогою препарату «роздавлена крапля» визначити загальний вигляд дріжджів і наявність сторонньої мікрофлори.

В цьому ж препараті підрахувати загальну кількість кліток, кількість брунькованих кліток, кількість кліток, що містять сторонні мікроорганізми. Препарат замалювати. Дані визначення занести в таблицю і зробити розрахунок.

Поля зору	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	всього
Загальна кількість дріжджових кліток
Кількість брунькованих кліток

%брунькованих кліток = к-сть брунькованих клітин/заг.к-сть дріжджових клітин * 100

Наявність брунькованих клітин дозволяє робити висновок про фізіологічну активність культури.

Завдання 2. Визначення % мертвих клітин.

Метод визначення мертвих клітин заснований на різниці проникнення барвника крізь оболонки живих і мертвих клітин.

Помістити краплю суспензії на предметне скло, додати до неї маленьку краплю розчину метиленової синьки і накрити покривним склом.

Через 1-2 хв. Мікроскопувати препарат зі збільшенням в 400-600 разів і підрахувати кількість забарвлених клітин в 10 полях зору. Забарвлені клітини є мертвими. Результати досліду записати, препарат замалювати.

Поля зору	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	всього
Загальна кількість дріжджових кліток
Кількість мертвих кліток

%мертвих клітин = к-сть мертвих клітин/заг.к-сть дріжджових клітин *100

Зробіть висновок про якість дріжджів.

Завдання 3. Визначити, кількість кліток, що містять глікоген.

Скляною паличкою нанесіть на предметне скло краплю суспензії дріжджів і змішайте з краплею розчину Люголя. Клітки, що містять глікоген забарвлюються в буро-червоний колір. Підрахуйте в 10 полях зору. Дані підрахунку занесіть в таблицю і підрахуйте % кліток з глікогеном.

Поля зору	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	всього
Загальна кількість дріжджових кліток
Кількість кліток з глікогеном

%клітин, що місять глікоген = к-сть клітин з глікогеном/заг.к-сть дріжджових кліток *100

Завдання 4.Підрахунок кліток в камері Горяєва.

На сітку камери Горяєва нанести скляною паличкою краплю суспензії. Накрити покривним склом, притерти його обережно пальцем до бокових пластинок. Рідина під покривним склом повинна розтектись по всій стінці. Слідкувати, щоб не було пузирів повітря. Камеру помістити на предметний столик мікроскопу і найти сітку, користуючись об’єктивом 8. Не переміщуючи її, зніміть об’єктив і роздивитись із збільшенням в 400-600 разів.

Підрахуйте кількість дріжджових кліток у п’яти великих квадратах, а якщо це не можливо, то підрахуйте клітки в 10 малих квадратах. Найти середнє число кліток для одного великого(малого)

Квадрату, і проведіть розрахунок у робочому зошиті. Зробіть висновок про якість досліднього зразку дріжджів.

Питання для самопідготування:

1.Як зробити розведення суспензії 1/100?

2.З якою метою проводять підрахунок мертвих клітин?

3.На що вказує мала кількість клітин, що містять глікоген?

4.Який % брунькованих клітин повинні містити доброякісні пресовані дріжджі?

5.Що визначають за допомогою камери Горяєва?

6.Що собою представляють пресовані дріжджі?