- •Кафедра микробиологии, вирусологии им. Ш.И. Сарбасовой
- •Станция 1 «приготовление нефиксированного мазка»
- •Станция 5 «окраска мазка по ожешко»
- •Станция 6 «окраска по методу Циля Нильсена»
- •Станция 7 «микроскопическое исследование»
- •Станция 11 «выделение чистой культуры аэробов (1 - 2 день исследования)»
- •Станция 12 «выделение чистой культуры аэробов (3 - 4 день исследования)»
- •Станция 22 «постановка аллергической пробы в диагностике туберкулеза»
- •Станция 27 «посев крови на стерильность»
Кафедра микробиологии, вирусологии им. Ш.И. Сарбасовой
Перечень практических навыков по микробиологии (станции) для проведения второго этапа итогового контроля в виде ОСПЭ
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Станция 1 «приготовление нефиксированного мазка»
Шаг 1 Взять обезжиренное предметное стекло. Ограничить зону мазка, нарисовав стеклографом кружок |
Шаг 2 Стерильной пастеровской пипеткой нанести 1 каплю стерильного физиологического раствора на предметное стекло |
Шаг 3 Простерилизовать бактериальную петлю в пламени горелки |
Шаг 4 Остуженной стерильной бактериальной петлей произвести отбор исследуемой колонии |
Шаг 5 Внести отобранную колонию в физ.раствор, хорошо перемешать |
Шаг 6 Простерилизовать бактериальную петлю в пламени горелки и поставить в штатив |
Шаг 7 Подсушить препарат в потоке теплого воздуха над пламенем горелки. |
Шаг 8 Нанести на мазок 1 каплю иммерсионного масла. |
Станция 2 «ПРИГОТОВЛЕНИЕ ФИКСИРОВАННОГО МАЗКА»
Шаг 1 На поверхности обезжиренного стекла карандашом нарисовать кружочек |
Шаг 2 В кружок пипеткой внести 1 каплю физиологического раствора |
Шаг 3 Бактериологическую петлю простерилизовать над пламенем горелки, остудить, взять с поверхности агара культуру, внести в каплю физиологического раствора, размешать круговыми движениями. |
Шаг 4 Бактериологическую петлю простерилизовать, поставить в штатив. |
Шаг 5 Пинцетом взять предметное стекло и просушить в теплой струе воздуха высоко над пламенем горелки. |
Шаг 6 Препарат зафиксировать, опуская в пламя горелки на 1 сек. 3 раза |
Шаг 7 Нанести на мазок 1 каплю иммерсионного масла, микроскопировать |
Станция 3 «Окраска по Граму»
Шаг 1 На мазок, фиксированный над пламенем горелки, кладут фильтровальную бумагу, пропитанную генцианвиолетом и наносят несколько капель воды. Прокрашивание 1-2 минуты. |
Шаг 2 Снимают бумагу, сливают остаток красителя и, не промывая препарат водой, наливают раствор Люголя на 1-2 мин до почернения препарата. |
Шаг 3 Раствор Люголя сливают. Для обесцвечивания на мазок капают несколько капель этилового спирта, 30 секунд -1 мин. |
Шаг 4 Препарат тщательно промывают водопроводной водой. |
Шаг 5 Препарат докрашивают водно-спиртовым раствором фуксина в течение 2 минут. |
Шаг 6 Препарат тщательно промывают водопроводной водой, промокая фильтровальной бумагой. |
Шаг 7 Микроскопия. На высушенный окрашенный мазок-препарат наносят каплю иммерсионного масла и смотрят под увеличением объектива 90-100. |
Шаг 8 Результаты окраски. Грамположительные бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные бактерии - в ярко-малиновый цвет. |
Станция 4 «Окраска капсул по Бурри-Гинс»
Шаг 1 На обезжиренное предметное стекло наносят каплю туши |
Шаг 2 Простерилизовать бактериальную петлю |
Шаг 3 Стерильной бактериальной петлей произвести отбор исследуемой колонии |
Шаг 4 Внести отобранную колонию в каплю туши, гомогенизировать |
Шаг 5 Препарат высушивают на воздухе и фиксируют метиловым спиртом или смесью Никифорова. |
Шаг 6 Промывают водой |
Шаг 7 Окрашивают карболовым фуксином Циля, 3-5 мин |
Шаг 8 Промывают водой, высушивают при комнатной температуре |
Шаг 9 Микроскопия с иммерсионной системой |
Шаг 10 Результаты окраски. Фон препарата темный, микробные тела окрашиваются в красный цвет, а окруженная ее капсула не окрашиваются тушью, остаются бесцветными |
