Лекция №1 Тема: Определение кетоновых тел в моче. Клинико-диагностическое значение определения.

Домашнее задание: В.С. Камышников; Методы клинических лабораторных исследований, стр. 40.

Моча – это биологическая жидкость, в составе которой из организма выводятся конечные продукты обмена веществ.

Кетонурия (ацетонурия) – это проявление в моче кетоновых тел. В состав кетоновых тел входит: β-оксимасляная кислота, ацетоуксусная кислота и ацетон – продукты неполного окисления аминокислот и жирных кислот.

У здорового человека углеводы, жиры, часть белков окисляются до углекислого газа и воды, освобождая при этом значительное количество энергии. При некоторых патологических состояниях, в частности при сахарном диабете, снижается выработка инсулина. В печени сокращаются запасы гликогена. Многие ткани организма находятся в состоянии энергетического голода. В этих условиях активизируются процессы окисления белков и жиров в печени, но недостаток гликогена ведет к неполному их окислению и накоплению в крови недоокисленных продуктов жирового и белкового обмена – кетоновых тел. Вследствие накопления в крови кетоновых тел (кетонемии) наступает сдвиг pH крови в кислую сторону (это состояние называется ацидозом). Моча такого больного имеет резко кислую реакцию и пахнет ацетоном.

Голодание, употребление преимущественно белковой и жирной пищи, исключение из питания углеводов приводит к усилению образования кетоновых тел и выделению их с мочой.

В раннем детском возрасте кетонурия встречается чаще, чем у взрослых и не имеет большого клинического значения. Это явление представляет интерес для педиатра при «ацетонемической рвоте», связанной с погрешностью в диете.

Для определения кетоновых тел в моче используют:

1. реакцию Легаля;

2. реакцию Ланге;

3. пробу Лестраде.

Принцип определения.

Кетоновые тела в щелочной среде образуют соединения с нитропруссидом натрия, имеющее красную или фиолетовую окраску. При этом надо учитывать, что некоторые нормальные составные части мочи, в частности креатинин, также реагируют с нитропруссидом натрия. Чтобы отличить окраску, зависящую от кетоновых тел, от окраски, которую дает креатинин, используют химически чистую ледяную уксусную кислоту. Кислота разрушает окраску обусловленную креатинином, но сохраняет и даже усиливает окраску, зависящую от кетоновых тел.

Кетоновые тела определяют по назначению врача у больных сахарным диабетом, при тиреотоксикозе, при субарахноидальных кровоизлияниях, при ацетонемической рвоте у детей, при токсической диспепсии, дизентерии, при длительном голодании. При наличии запаха ацетона в моче, при глюкозурии лаборант обязан определить кетоновые тела и без назначения врача.

Тема: Определение желчных пигментов в моче. Клинико-диагностическое значение определения. Образование желчных пигментов в организме.

Источником образования пигментов в организме слу­жит гемоглобин. Это сложный белок, состоящий из пигментной (окрашенной) части — гема и белковой - глобина. Основу пигментной части составляет порфириновое кольцо, образованное четырьмя замещенными пирролами с атомом железа в центре. Гемоглобин содержится в эритроцитах, которые в среднем через 120 дней разрушаются. При этом освобождается гемоглобин.

В клетках ретикулоэндотелиальной системы происходит его постепенный распад при участии ферментов:

1) разрывается связь в порфириновом кольце, гемогло­бин окисляется и образуется пигмент вердоглобин;

2) освобождается железо и белок — глобин, цепь пиррольных колец распрямляется и образуется пигмент зеле­ного цвета — биливердин;

3) образовавшийся биливердин ферментативным путем восстанавливается в пигмент оранжевого цвета— билирубин.

Из клеток ретикулоэндотелиальной системы билиру­бин поступает в кровь. Он плохо растворим в воде и легко адсорбируется на белках плазмы крови, следовательно, не может пройти через почечный фильтр и попасть в мочу. Этот пигмент носит названия: нерастворимого (в воде), непрямого (не дает прямой реакции—розового окрашивания—с диазореактивами из-за связи с белками), свободного, неконъюгированного.

Током крови свободный билирубин доставляется в печень, где соединяется с двумя молекулами глюкуроновой кислоты. Образуется ком­плекс— билирубин-диглюкуронид, хорошо растворимый в воде, дающий прямую реакцию с диазореактивами. Из печеночных клеток растворимый, прямой, связанный (с глюкуроновой кислотой), конъюгированный билирубин поступает в желчные капилляры. Так как концентрация билирубина в клетке меньше, чем в желчном капилляре, то для осуществления его переноса через клеточную мембрану затрачивается энергия. Такой перенос вещества в сторону большей концентрации называется переносом против градиента концентрации.

В составе желчи по общему желчному протоку билирубин поступает в двенадцатиперстную кишку, где под действием ферментов и восстанавливающих микроорганизмов превращается в мезобилиноген. Неболь­шая часть мезобилиногена (уробилиногеновых тел) всасы­вается через стенку кишечника в кровь и по воротной вене доставляется в печень, где расщепляется до дипирролов (соединений, содержащих два пиррольных кольца), кото­рые задерживаются печенью и не поступают в общий кровоток.

Большая часть мезобилиногена в кишечнике при уча­стии микроорганизмов восстанавливается в стеркобилиноген. В нижних отделах толстой кишки часть стеркобилиногена всасывается через стенку кишечника в кровь и через систему геморроидальных вен попадает в большой круг кровообращения и затем выводится с мочой (в клинической практике носит название уробилина). Другая часть стеркобилиногена выделяется с калом, сообщая ему цвет и являясь его нормальным пигментом.