- •Компоненты бактериофага, их локализация и функции.Основные морфологические группы бактериофагов.
- •Свойства бактериофагов. Этапы и исход взаимодействия вирулентного и умеренного бактериофага с чувствительной бактериальной клеткой.
- •Лизогенизация, профаг, лизогенная (фаговая) конверсия и ее примеры.
- •Феномен роста бактериофагов в жидкой и на плотной средах.
- •Качественные пробы для выявления бактериофага.
- •Способы титрования бактериофага в жидкой и на плотной питательных средам. Получение больших количеств фага, фаголизат бактериальной культуры, методы его очистки.
- •Использование бактериофагов в медицине.
- •Наследственность бактерий. Материальная основа наследственности бактерий. Понятие о генотипе и фенотипе бактерий.
- •Особенности нуклеоида бактерий. Структура генома.
- •Генотип и фенотип бактерий. Строение генома
- •Виды изменчивости бактерий и факторы, их вызывающие.
- •Модификационная изменчивость, ее механизм и значение.
- •Мутационный процесс: мутации, мутанты, мутагены. Классификация мутаций.
- •Диссоциация бактерий на s и r формы, их различия.
- •Выявление ауксотрофных и антибиотикорезистентных мутантов.
Лизогенизация, профаг, лизогенная (фаговая) конверсия и ее примеры.
В некоторых случаях вирулентных свойств фага оказывается недостаточно для разрушения бактерии. Подобные вирусы — умеренные фаги — претерпевают любопытные превращения, известные как редукция фага. При этом процессе ДНК вируса не вызывает образования вирусспецифических белков и нуклеиновых кислот, но включается в бактериальную хромосому. С практической точки зрения бактерия приобретает новый набор генов (встроенного вируса), а также становится «иммунной» к повторному заражению (интерференция вирусов). Подобный феномен известен как лизогения, а популяции бактерий — как лизогенные культуры. ДНК умеренного вируса реплицирует синхронно с размножением лизогенной бактерии, н иногда (примерно в одной из 102-105 подобных бактерий) фаг начинает спонтанно размножаться, а клетка подвергается лизису. Некоторые умеренные фаги (например, участвующие в про цессах трансдукции бактерий) не способны образовывать дочерние популяции, то есть являются дефектными вирусами. Дефектные фаги используют как векторы в генной инженерии. Вирусная ДНК может длительно сохраняться в бактериальном потомстве. Такие латентные бактериофаги известны как провирусы, или профаги.
Ассоциация фаговой ДНК с геномом бактерии способна качественно изменять свойства бак термиальной клетки. Например, известны различные бактерии, вирулентные свойства которых (обычно в виде экзотоксинов или адгезинов) кодируются лизогенными фагами. Иными словами лизогенная бактерия будет вирулентной, тогда как её нелизогенный двойник останется безвред ным. У других бактерий присутствие профага вызывает изменение морфологии или антигенных свойств. Такое изменение генетических свойств, вызванное вирусной ДНК, обозначают терми нами «инфекционная наследственность» или «лизогенная (фаговая) конверсия». При лизогении происходит изменение наследственных свойств не только бактериальной клетки, н и фага; размножаясь в клетке, он способен захватывать некоторые гены бактерии и, инфицируя другую клетку, передаёт приобретённые гены новому хозяину. Подобная передача (трансдукция) во многом аналогична генетической рекомбинации у высших растений и животных.
Феномен роста бактериофагов в жидкой и на плотной средах.
Качественные пробы для выявления бактериофага.
Метод Отто
Для выявления наличия бактериофагов в исследуемых образцах применяли метод поверхностного посева (ГОСТ 26670-85) на чашки Петри, который заключается в следующем: на чашки Петри с подсушенной средой наносили 0,1 см3 индикаторной тест-культуры в фазе логарифмического роста, растирали на поверхности шпателем Дригальского и оставляли на 1015 мин для впитывания влаги в агар. Затем на чашку наносили каплю образца, закрывали крышкой и оставляли на 10-15 мин при комнатной температуре. После чего чашки переворачивали и термостатировали в течение 16-18 ч при температуре (28±1)°С при выявлении бактериофагов лактококков и при (37±1)°С при выявлении бактериофагов, лизирующих термофильные молочнокислые стрептококки и термофильные палочки. Если после указанного времени термостатирования наблюдали зону угнетения роста в месте нанесения исследуемого образца, то устанавливали перевиваемость литического агента.
