- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •Раздел II Исследования крови на общий анализ
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •Раздел IV Патологические изменения состава крови
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах. Пояснительная записка
- •Уважаемые студенты!
- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •II.Класс частично детерминированных полипотентных клеток предшественников
- •1.2 Клеточный состав крови и диагностическое значение
- •Раздел II
- •2.1 Основные правила инфекционной безопасности при взятии крови на общий анализ.
- •1 Этап дезинфекции
- •2.2 Понятие о клиническом анализе
- •Технология забора капиллярной крови на общий анализ
- •Взятие крови для гематологических исследований может осуществляться 3 способами:
- •2.3 Определение гемоглобина
- •2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГем
- •2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре mf-1020
- •2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
- •2.4 . Подсчет эритроцитов
- •2.4.1 Методика подсчета эритроцитов в камере Горяева
- •2.5 Подсчет лейкоцитов
- •2.5.1 Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева
- •2.6 Скорость оседания эритроцитов
- •2.6.1 Метод Панченкова
- •2.7.Индексы красной крови
- •2.7.1 Подсчет индексов красной крови
- •2.8 Приготовление мазков крови
- •2.8.1 Методика приготовления мазков крови
- •Комбинированная окраска Мая—Грюнвальда—Романовского—Гимзе по Паппенгему.
- •2.9.Лейкоцитарная формула
- •2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы
- •Изменения содержания отдельных элементов белой крови
- •Изменения в клеточном составе «белой» крови могут быть классифицированы на 5 основных типов.
- •Лейкоцитарная формула здорового человека
- •Морфологические структурные изменения лейкоцитов при патологии
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •3.1 Тромбоциты
- •3.1.1 Методика окраски мазков крови на тромбоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •3.1.2 Методика определения длительности кровотечения (уколочная проба по Дуке)
- •3.1.3 Методика определения времени свертывания капиллярной крови (метод Сухарева)
- •3.2 Ретикулоциты
- •3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •Объем эритроцитов
- •3.3.1 Унифицированный метод с помощью микроцентрифуги.
- •3..3..2 Унифицированный микрометод (модификации. Тодорова).
- •3.4 Осмотическая резистентность
- •3.4.1 Унифицированный метод определения осмотической резистентности эритроцитов в модификации Идельсона
- •Раздел I V Патологические изменения состава крови
- •4.1 Анемии
- •4. 1.1 Анемии вследствие кровопотерь
- •4.1.2 Железодефицитные анемии
- •1. 3 В12 (фолиево) - дефицитные анемии
- •4.1.4 Апластические анемии
- •4.1.5 Гемолитические анемии
- •4.2 Лейкозы
- •4.2.1 Лейкозы острые
- •4.2.2 Лейкозы хронические
- •4.3 Геморрагические диатезы
- •4.3.1 Тромбоцитопении и тромбоцитопатии
- •4.3.2 Геморрагические диатезы, связанные с нарушениями в системе свертывания крови
- •4.3.3Геморрагические диатезы, связанные с изменением сосудистой стенки
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах
- •3.Федеральный закон Российской Федерации от 21 ноября 2011 г. N 323-фз "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации"
II.Класс частично детерминированных полипотентных клеток предшественников
Представлен ограниченно полипотентными клетками, т. е. клетками, которые способны дать начало либо лимфопоэзу (образованию клеток лимфоидного ряда), либо миелопоэзу (образованию клеток миелоидного ряда). В отличие от стволовых клеток они способны лишь к частичному само поддержанию.
Класс III. Класс унипотентных клеток - предшественников
В процессе дальнейшей дифференцировки образуются клетки, называемые унипотентными предшественниками. Они дают начало одному строго определенному ряду клеток: лимфоцитам, моноцитам и гранулоцитам (лейкоцитам, имеющим в цитоплазме зернистость), эритроцитам и тромбоцитам.
В костном мозге обнаруживается две категории клеток-предшественников лимфоцитов, из которых образуются. В - и Т-лимфоциты. В-лимфоциты созревают в костном мозге, а затем заносятся кровотоком в лимфоидные органы. Из предшественников В-лимфоцитов образуются плазмоциты. Часть лимфоцитов в эмбриональном периоде поступает через кровь в вилочковую железу (thymus) и обозначается как Т-лимфоциты. В дальнейшем они дифференцируются в лимфоциты.
Клетки этого класса также не способны к длительному само поддержанию, но способные к размножению и дифференцировке.
Все клетки трех классов морфологически не дифференцируемые клетки
Класс IV.Морфологически распознаваемых пролиферирующих клеток
Представлен .молодыми, способными к делению клетками, образующими отдельные ряды миело и лимфопоэза. Все элементы этого ряда имеют окончание «бласт»: плазмобласт, лимфобласт, монобласт, миелобласт, эритробласт, мегакариобласт. Из клеток этого класса в процессе деления образуются клетки следующего класса.
Класс V.Класс созревающих клеток
Представлен созревающими клетками, названия которых имеют общее окончание «цит». Все элементы этого класса расположены в схеме по вертикали и определенной последовательности, обусловленной стадией их развития.
Названия клеток первой стадии начинаются приставкой «про» (перед): проплазмоцит, пролимфоцит, промоноцит, промиелоцит, пронормоцит, промегакариоцит. Элементы гранулоцитарного ряда проходят еще две стадии в процессе развития: миелоцит и метамиелоцит («мета» означает после). Метамиелоцит, находящийся на схеме ниже миелоцита, представляет переход от миелоцита к зрелым гранулоцитам. К клеткам этого класса относят также и палочкоядерные гранулоциты. Пронормоциты в процессе эритропоэза проходят стадии нормоцитов, которые, в зависимости от степени насыщения гемоглобином цитоплазмы, имеют добавочные определения: нормоцит базофильный, нормоцит полихроматофильный и нормоцит оксифильный. Из них образуются ретикулоциты — незрелые эритроциты с остатками ядерной субстанции.
Класс VI. Класс зрелых клеток
Представлен зрелыми клетками, неспособными к дальнейшей дифференцировке с ограниченным жизненным циклом. К ним относятся: плазмоцит, лимфоцит, моноцит, сегментоядерные гранулоциты (эозинофил, базофил, нейтрофил), эритроцит, тромбоцит.
Зрелые клетки поступают из костного мозга в периферическую кровь.
Показателем , характеризующим состояние костномозгового кроветворения , является миелограмма – количественное соотношение клеток разной степени зрелости всех ростков кроветворения
Морфология клеток гранулоцитарного ростка
К этим клеткам относят миелобласт (4-й класс), промиелоцит, миелоцит, метамиелоцит и палочкоядерный гранулоцит (5-й класс), сегментоядерный гранулоцит {6-й класс).
Миелобласт имеет диаметр 15—20 мкм. Ядро округлой формы, занимает большую часть клетки, окрашено в красно-фиолетовый цвет, имеет нежно-сетчатую структуру хроматина, содержит от 2 до 5 ядрышек сине-голубого цвета. Ядро окружено узким пояском ярко-синей (базофильной) цитоплазмы, в которой содержится в небольшом количестве красная (азурофильная) зернистость.
В норме в костном мозге миелобластов содержится 0,2—1,7 %. При острых лейкозах и тяжелых обострениях хронических миелозов встречаются патологические миелобласты в виде микрогенераций с утраченной нежно-сетчатой структурой ядра и выраженным его полиморфизмом.
Промиелоцит — крупная клетка диаметром 25 мкм. Ядро овальной формы, занимает большую часть клетки, окрашено в светло-фиолетовый цвет, имеет тонкую сетчатую структуру, в которой различимы ядрышки. Цитоплазма широкая, голубого цвета, содержит обильную красную, фиолетовую или коричневую зернистость. По особенностям зернистости можно определить видовую направленность промиелоцита: нейтрофильную, эозинофильную или базофильную.
В норме в пунктате костного мозга количество промиелоцитов колеблется в пределах 1—4,1 %.
Миелоцит является более зрелой клеткой гранулоцитарного ряда диаметром 12—16 мкм. Ядро овальной формы, расположено эксцентрично, светло-фиолетового цвета. Его структура более грубая, чем у промиелоцита, ядрышки не выявляются. Цитоплазма окружает ядро широким поясом, окрашена в светло-голубой цвет, содержит зернистость.
В зависимости от характера зернистости различают миелоциты нейтрофильные, эозинофильные и базофильные. Нейтрофильная зернистость мелкая, сине-фиолетового цвета, эозинофильная — крупная, желтовато-красного цвета, барофильная — темно-синего цвета.
При патологических процессах, особенно при лейкозах, в миелоцитах отмечается несоответствие в развитии ядра и цитоплазмы, а также зернистости клеток. В норме в костном мозге количество нейтрофильных миелоцитов колеблется от 5,4 до 14,5 %, эозинофильных — от 0,4 до 3 % и базофильных — от 0,1 до 0,5 %.
Метамиелоцит — клетка диаметром 12—13 мкм с бобовидным эксцентрично расположенным ядром бледно-фиолетового цвета, структура его компактна. Ядро окружено по периферии широкой цитоплазмой розового цвета, содержащей нейтрофильную, эозинофильную или базофильную зернистость. В норме в костном мозге содержится: нейтрофильных метамиелоцитов — от 6,5 до 15 %, эозинофильных — от 0,2 до 2 %, базофильных — от 0 до 0,1 %.
Палочкоядерный гранулоцит имеет диаметр 10—12 мкм. Ядро изогнуто в виде палочки или подковы, фиолетового цвета, с грубой структурой. Цитоплазма имеет розовую окраску, занимает большую часть клетки, содержит фиолетовую зернистость. У эозинофильного палочкоядерного гранулоцита цитоплазма практически не видна из-за обильной крупной желтовато-красного цвета зернистости. Палочкоядерная стадия базофильного гранулоцита обычно не встречается.
Сегментоядерный гранулоцит такого же размера, как и палочкоядерный. Ядро разделено на отдельные сегменты, соединенные тонкими перемычками. Количество сегментов колеблется от 2 до 5. Ядро фиолетовое, расположено в центре клетки. Сегментоядерный нейтрофил имеет розовую (оксифильную) цитоплазму, в которой содержится мелкая фиолетовая зернистость. Ядро эозинофила состоит обычно из двух сегментов, занимая меньшую часть клетки. Большая часть клетки заполнена крупной, густо расположенной желтовато-красной зернистостью. Ядро базофила состоит, как правило, из 3 сегментов. Светло-фиолетовая цитоплазма содержит крупную синего или темно-фиолетового цвета зернистость, которая местами наложена на ядро, в связи, с чем его контуры нечеткие.
Морфология клеток лимфатического ростка
К клеткам лимфатического ряда относят лимфобласт и плазмобласт (4-й класс), пролимфоцит и проплазмоцит (5-й класс), лимфоцит и плазмоцит (6-й класс).
Лимфобласт имеет диаметр 15—20 мкм. Ядро округлое, с нежно-сетчатой структурой хроматина, бледно-фиолетового цвета, расположено в центре. В ядре четко виды 1—2 ядрышка. Цитоплазма светло-синяя, окружает ядро узким ободком, не содержит зернистости. Участок цитоплазмы вблизи ядра имеет более светлую окраску (перинуклеарная зона).'
В периферической крови и костном мозге у здорового человека лимфобластов не бывает. Их обнаруживают при лимфолейкозе в небольшом количестве. В норме в пунктате лимфатического узла содержится лимфобластов от 0,1 до 0,5 %, а в пунктате селезенки — до 0,2 %.
Пролимфоцит является небольшой клеткой диаметром 11—12 мкм. Ядро округлое, бледно-фиолетового цвета, с нежной сетью хроматина. В некоторых случаях может содержать остатки ядрышек. Цитоплазма голубая, окружает ядро в виде неравномерного ободка, иногда содержит азурофильную (красновато-фиолетовую) зернистость.
В норме в периферической крови и в костном мозге пролимфоциты могут встречаться в виде единичных экземпляров. В пунктате нормального лимфатического узла их содержится 65—80 %, а в селезенке — до 60 %.
Лимфоцит — зрелая клетка диаметром от 7—9 до 12—13 мкм в зависимости от величины цитоплазмы. Ядро округлое, темно-фиолетового цвета, компактное, иногда имеет вдавление. Ядрышек не содержит. Выявляются малые лимфоциты с узким ободком голубой цитоплазмы, которая практически незаметна, средние и большие лимфоциты, цитоплазма которых занимает большую часть клетки, менее интенсивно окрашена и содержит азурофильную зернистость. Вокруг ядра всегда определяется перинуклеарная зона. Содержатся в костном мозге в количестве 4,4—13,7 %.
Плазмобласт — крупная клетка диаметром 16—20 мкм с округлым, центрально или эксцентрично расположенным, большим ядром, имеющим нежную структуру и несколько ядрышек. Цитоплазма ярко-синего цвета, окружает ядро широким поясом. Вокруг ядра выражена перинуклеарная зона. В норме эти клетки могут содержаться в пунктате лимфатического узла и селезенки в виде единичных экземпляров.
Проплазмоцит — клетка диаметром 10—20 мкм. Ядро округлое, компактное, расположено эксцентрично. В ядре чередуются темно- и светло-фиолетовые участки, которые расположены радиально от центра к периферии, что напоминает расположение спиц в колесе, — колесовидная структура ядра. Ядрышки отсутствуют. Цитоплазма интенсивного синего цвета, широкая, вакуолизированная. Хорошо видна перинуклеарная зона.
Плазмоцит — зрелые плазматические клетки (клетки Унна), разнообразные как по форме, так и по размерам (от 8 до 20 мкм). Ядро имеет почти постоянную величину, а меняется большей частью величина цитоплазмы. Ядро круглое или чаще овальное и расположено эксцентрично, имеет характерную грубую колесовидную структуру. Цитоплазма окрашивается в интенсивный синий цвет с ясным просветлением вокруг ядра, однако встречаются клетки с более светлой цитоплазмой и менее выраженной перинуклеарной зоной. В цитоплазме могут быть различной величины вакуоли, расположенные, как правило, в ее периферической части и придающие ей ячеистое строение. Нередко встречаются многоядерные плазматические клетки, содержащие 2—3 ядра и более одинаковой или различной величины. Плазматические клетки больших размеров могут иметь цитоплазму, окрашенную в серо-голубой цвет, с менее отчетливой перинуклеарной зоной или с ее отсутствием.
В норме в пунктате костного мозга находят зрелые плазматические клетки в количестве до 1,8 %, а в пунктате лимфатического узла и селезенки — плазмобласты, проплазмоциты и зрелые плазматические клетки в количестве 0,1—0,8 %.
В периферической крови в норме плазматических клеток не находят. Они появляются в крови при ряде инфекций (кори, краснухе, ветряной оспе), сывороточной болезни, некоторых болезнях кожи, инфекционном мононуклеозе, агранулоцитозе, туберкулезе, лимфогранулематозе, тяжелом сепсисе, крупозной пневмонии, актиномикозе, циррозе печени, миеломной болезни. При некоторых формах миеломной болезни молодые плазматические клетки могут поступать в периферическую кровь в большом количестве. Морфология плазматических клеток при миеломной болезни имеет характерные черты — миеломные клетки.
Миеломные клетки имеют большие размеры, достигающие иногда 40 мкм и более в диаметре. Ядро нежное, содержит 1—2 больших или несколько мелких ядрышек, окрашенных в голубой цвет. Нередко встречаются клетки с 3—5 ядрами. Цитоплазма больших размеров, окрашивается в различные цвета: светло-голубой, светло-фиолетовый, интенсивно фиолетовый, а иногда красноватый, обусловленный присутствием гликопротеидов. Околоядерное просветление выражено нечетко или отсутствует. В редких случаях находят 1—2 гиалиновых включения — тельца Русселя величиной 2—4 мкм. При окраске азур-эозином они приобретают красный цвет.
Морфология клеток моноцитарного ростка
К клеткам моноцитарного ряда относят монобласт (4-й класс), промоноцит (5-й класс), моноцит (6-й класс).
Монобласт имеет диаметр 12—20 мкм. Ядро округлое, иногда дольчатое, имеет нежную структуру, светло-фиолетовую окраску. Содержит 2—5 ядрышек. Цитоплазма нежно-голубая, занимает меньшую часть клетки.
Промоноцит имеет диаметр 12—20 мкм. Ядро крупное, рыхлое, бледно-фиолетовое, может содержать остатки ядрышек. Цитоплазма широкая, серовато-фиолетового цвета.
Моноцит является зрелой клеткой диаметром 12—20 мкм. Ядро рыхлое, светло-фиолетовое. Форма ядра может быть различной: бобовидной, дольчатой, подковообразной. Цитоплазма серовато-фиолетового цвета, широкая, светлая, может содержать обильную мелкую азурофильную зернистость.
В норме в периферической крови и в костном мозге монобластов и промоноцитов, как правило, не бывает. Встречаются они как временное явление при острых инфекциях (например, при инфекционном мононуклеозе) и при других заболеваниях, сопровождающихся высоким моноцитозом.
Морфология клеток эритроцитарного ростка
К клеткам эритроцитарного ростка относят эритробласт (4-й класс), пронормоцит, нормоцит, ретикулоцит (5-й класс), эритроцит (6-й класс).
Эритробласт имеет диаметр 20—25 мкм. Ядро нежной структуры, округлое, занимает большую часть клетки, красновато-фиолетового цвета, содержит 1—5 ядрышек. Цитоплазма насыщенного синего цвета, не содержит зернистости. Вокруг ядра определяется зона просветления.
Эритробласты встречаются в нормальном костном мозге в количестве 11,4—29,4 %, а в периферической крови — только при патологических состояниях.
Патологические формы эритробластов наблюдаются при некоторых патологических состояниях (остром сепсисе, апластических анемиях, остром лейкозе, тяжелых инфекционных заболеваниях, после облучения и др.). Изменяется морфология ядра и цитоплазмы клеток различных стадий созревания. Ядро теряет нормальную структуру, хроматин становится однородным. Встречаются эритробласты с плотным, пикнотичным базихроматином, как у зрелых нормобластов. Цитоплазма может быть вакуолизированной. Цвет ее не соответствует степени созревания ядра.
Мегалобласты — большие эмбриональные эритробласты. В костном мозге и в периферической крови появляются в постэмбриональной жизни только при патологических состояниях, связанных с дефицитом гемопоэтического фактора — витамина В,2, фолиевой кислоты. Мегалобласты в зависимости от степени созревания делятся на промегалобласты и базофильные, полихроматофильные, оксифильные мегалобласты.
Пронормоцит — клетка диаметром 12—18 мкм. Ядро имеет более грубую структуру, чем у эритробласта, но еще сохраняет нежную сетчатую структуру, Ядрышки отсутствуют. Цитоплазма барофильная, не содержит зернистости.
Нормоцит имеет диаметр 8—12 мкм. В зависимости от степени насыщенности их цитоплазмы гемоглобином различают базо-фильный, полихроматофильный и оксифильный нормоциты. Самые крупные — базофильные нормоциты, наименьший размер имеют оксифильные нормоциты. Ядра этих клеток имеют грубую структуру, окрашены в темно-фиолетовый цвет. Цитоплазма базофильного нормоцита — синяя, полихроматофильного — серовато-фиолетовая, оксифильного — розовая.
Нормоцит вызревает в эритроцит через стадию ретикулоцита — молодого предшественника эритроцита, сохранившего остатки базофильной субстанции (РНК) цитоплазмы, которая выявляется при помощи специальной окраски.
Ретикулоцит — клетка диаметром 9—11 мкм. В зависимости от способа окраски может быть голубого или зеленого цвета. Содержит нитчато-сетчатую субстанцию, которая окрашена в синий цвет.
Эритроцит — зрелая клетка периферической крови диаметром 7—8 мкм, розово-красного цвета. Имеет форму двояковогнутого диска, что ведет к неравномерности в окраске — клетка более светлая в центре и более интенсивно окрашена по периферии.
Морфология клеток мегакариоцитарного ростка
К клеткам мегакариоцитарного ростка относят мегакариобласт (4-й класс), промегакариоцит и мегакариоцит (5-й класс), тромбоцит (6-й класс).
Мегакариобласт имеет диаметр 20—-25 мкм. Ядро округлое, с нежной структурой, красновато-фиолетового цвета, имеет ядрышки. Цитоплазма небольшая, интенсивно барофильная, не содержит зернистости. Вокруг ядра заметна зона просветления.
Промегакариоцит — значительно более крупная клетка, чем мегакариобласт. Ядро грубой структуры, не содержит ядрышек. Цитоплазма барофильная, занимает большую часть клетки, зернистость в ней отсутствует.
Мегакариоциты — гигантские клетки костного мозга. Мегакариоцит представляет собой гигантскую клетку костного мозга диаметром 60—120 мкм. Ядро имеет грубую структуру, различной, в некоторых случаях причудливой, формы. Цитоплазма отличается очень большими размерами, содержит зернистость розовато-фиолетового цвета. От цитоплазмы мегакариоцита отшнуровываются тромбоциты.
Тромбоциты (кровяные пластинки) — зрелые элементы периферической крови, имеющие небольшие размеры (1,5—3 мкм), округлую или овальную форму. Периферическая часть — гиаломер — светлого цвета, центральная часть — грануломер— розовато-фиолетового цвета, содержит мелкие гранулы.
