- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •Раздел II Исследования крови на общий анализ
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •Раздел IV Патологические изменения состава крови
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах. Пояснительная записка
- •Уважаемые студенты!
- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •II.Класс частично детерминированных полипотентных клеток предшественников
- •1.2 Клеточный состав крови и диагностическое значение
- •Раздел II
- •2.1 Основные правила инфекционной безопасности при взятии крови на общий анализ.
- •1 Этап дезинфекции
- •2.2 Понятие о клиническом анализе
- •Технология забора капиллярной крови на общий анализ
- •Взятие крови для гематологических исследований может осуществляться 3 способами:
- •2.3 Определение гемоглобина
- •2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГем
- •2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре mf-1020
- •2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
- •2.4 . Подсчет эритроцитов
- •2.4.1 Методика подсчета эритроцитов в камере Горяева
- •2.5 Подсчет лейкоцитов
- •2.5.1 Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева
- •2.6 Скорость оседания эритроцитов
- •2.6.1 Метод Панченкова
- •2.7.Индексы красной крови
- •2.7.1 Подсчет индексов красной крови
- •2.8 Приготовление мазков крови
- •2.8.1 Методика приготовления мазков крови
- •Комбинированная окраска Мая—Грюнвальда—Романовского—Гимзе по Паппенгему.
- •2.9.Лейкоцитарная формула
- •2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы
- •Изменения содержания отдельных элементов белой крови
- •Изменения в клеточном составе «белой» крови могут быть классифицированы на 5 основных типов.
- •Лейкоцитарная формула здорового человека
- •Морфологические структурные изменения лейкоцитов при патологии
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •3.1 Тромбоциты
- •3.1.1 Методика окраски мазков крови на тромбоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •3.1.2 Методика определения длительности кровотечения (уколочная проба по Дуке)
- •3.1.3 Методика определения времени свертывания капиллярной крови (метод Сухарева)
- •3.2 Ретикулоциты
- •3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •Объем эритроцитов
- •3.3.1 Унифицированный метод с помощью микроцентрифуги.
- •3..3..2 Унифицированный микрометод (модификации. Тодорова).
- •3.4 Осмотическая резистентность
- •3.4.1 Унифицированный метод определения осмотической резистентности эритроцитов в модификации Идельсона
- •Раздел I V Патологические изменения состава крови
- •4.1 Анемии
- •4. 1.1 Анемии вследствие кровопотерь
- •4.1.2 Железодефицитные анемии
- •1. 3 В12 (фолиево) - дефицитные анемии
- •4.1.4 Апластические анемии
- •4.1.5 Гемолитические анемии
- •4.2 Лейкозы
- •4.2.1 Лейкозы острые
- •4.2.2 Лейкозы хронические
- •4.3 Геморрагические диатезы
- •4.3.1 Тромбоцитопении и тромбоцитопатии
- •4.3.2 Геморрагические диатезы, связанные с нарушениями в системе свертывания крови
- •4.3.3Геморрагические диатезы, связанные с изменением сосудистой стенки
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах
- •3.Федеральный закон Российской Федерации от 21 ноября 2011 г. N 323-фз "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации"
Изменения в клеточном составе «белой» крови могут быть классифицированы на 5 основных типов.
Нейтрофильно-эозинопенический. Характеризуется увеличением содержания лейкоцитов, нейтрофилов; снижением эозинофилов, лимфоцитов, моноцитов. Наблюдается при онкологических заболеваниях (раке), пневмониях, перитоните, септических инфекциях.
Нейтрофильно-эозинофильный. Выявляются лейкоцитоз, нейтрофильный сдвиг влево, уменьшение содержания лимфоцитов (лимфопения), моноцитов (моноцитопения) повышенное содержание эозинофилов. Встречается при туберкулезе легких, лимфогранулематозе, скарлатине.
Нейтропенический. Характеризуется уменьшением с держания лейкоцитов и нейтрофилов, «дегенеративным сдвигом влево, относительным лимфоцитозом. Отмечается при инфекционных заболеваниях (брюшном тифе, кори, бруцеллезе, гриппе и др.).
Лимфатические и моноцитарные реакции: лейкоцитоз лимфоцитоз, моноцитоз. Встречается при инфекционных заболеваниях.
Протозойный. Сопровождается лейкопенией, нейтропенией (с нейтральным сдвигом влево), лимфопенией. Чаш наблюдается при малярии, лейшманиозе.
При осложненном течении гнойно-воспалительных провесов весьма показательно изменение лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ), рассчитываемого по формуле:
(4Ми + ЗЮ + 2П + С)х (Пл. + 1)
ЛИИ =
(Мон + Лимф) х (Э + 1),
где Ми — миелоциты, Ю. — юные, П. — палочкоядерные, С - сегментоядерные нейтрофилы; Пл. — плазматические клетки; Мон — моноциты; Лимф — лимфоциты; Э — эозинофилы.
В норме ЛИИ равен 0,3—1,5 ЕД.
ЛИИ больше 1,5 свидетельствует об интоксикации организма, свыше 4-5 — о преобладании в ней бактериального компонента.
ЛИИ используется для оценки степени бактериальной интоксикации и эффективности проводимой антибактериальной терапии.
Определение ЛИИ возможно лишь при обнаружении в крови отдельных клеток, не встречающихся в норме. К их числу относятся плазматические клетки, незрелые гранулоциты, молодые лимфоциты и некоторые другие.
Плазматические клетки в небольшом количестве (0,5—3%) появляются при любом инфекционном и воспалительном процессе, а также при опухолях, сывороточной болезни, после вакцинации. Содержание этих клеток незначительно при миеломной болезни (плазмоцитоме) и резко возрастает в случаях лейкемизации.
Лейкоцитарная формула здорового человека
Лейкоциты |
Базофилы |
Эозинофилы |
Юные нейтрофилы |
Палочкоядерные нейтрофилы
|
Сегментоядерные нейтрофилы |
Лимфоциты |
Моноциты |
4,0- 9,0х 109/л |
0-1% |
0,5-5 % |
0-1% |
1-6% |
47-72% |
19-37% |
3-9% |
Принцип: Микроскопия сухих фиксированных и окрашенных мазков крови с дифференцированием различных форм лейкоцитов.
Реактивы: 1.Иммерсионное масло
2.70% спирт
Специальное оборудование:
1.Микроскоп
2.11- Клавишный счетчик для подсчета лейкоцитарной формулы или счетные машинки СЛ-1
Ход исследования
Подсчет лейкоцитарной формулы проводят с помощью иммерсионной системы микроскопа. В связи с тем, что мазке различные виды лейкоцитов располагаются неравномерно (моноциты и нейтрофилы — преимущественно вдоль верхнего и нижнего продольного края препарата, лимфоциты — ближе к его центру), подсчет лейкоцитарной формулы осуществляют, пользуясь следующими методическими указаниями. Под малым увеличением микроскопа находят край мазка крови вблизи образовавшей щеточки. У продольного края мазка наносят каплю иммерсионного масла, после чего фокусируют плоскость препарата. Наблюдая в окуляр, отступают на 2—3 поля зрения по направлению к середине мазка. Затем продолжают продвижение препарата в том же направлении на 3—5 полей зрения, в каждом из них подсчитывая имеющиеся лейкоциты. Вслед за этим продвигают мазок 3—5 полей зрения вдоль продольного края, меняя правление продвижения мазка под прямым углом, возвращаются к краю мазка, продвигая при этом мазок еще 3—5 полей зрения и так далее. Зигзагообразную линию, по которой продвигают мазок крови, называют линией Меандра:
Подсчет продолжают до тех пор, пока не будет сосчитано 50 % клеток. Затем подсчет продолжают на противоположной стороне мазка, т. е 50 лейкоцитов вверху и 50 лейкоцитов внизу. Так же, как описано выше, при протяжении мазка подсчитывают все лейкоциты, обнаруживаемые в поле зрения. Подсчет заканчивают, когда сумма лейкоцитов будет равна 100. Регистрацию лейкоцитов при подсчете производят с помощью счетчика II клавишного СЛ-1, при этом получают общую сумму и количество каждого вида лейкоцитов в процентах. При отсутствии счетчика регистрацию производят с помощью записи на листе бумаги. По вертикали записывают начальные буквы названий лейкоцитов: метамиелоциты (мтмц.), палочкоядерные (п.), сегментоядерные (с.), эозинофильные (э.), базофильные гранулоциты (б.), лимфоциты (лимф.), моноциты (мон.), плазматические клетки (мл.). По мере подсчета лейкоцитарной формулы каждый найденный лейкоцит регистрируют палочкой или точкой, которую ставят в горизонтальном ряду, соответствующем тому или иному виду лейкоцитов. Для облегчения последующего подсчета каждого вида лейкоцитов палочки или точки группируются десятками:
Процентное содержание различных видов лейкоцитов не отражает истинного количества их в 1 л крови, поэтому вычисляют абсолютное содержание лейкоцитов в 1 л крови.. Для этого необходимо знать количество лейкоцитов в I л крови, процентное содержание отдельных их видов, подсчитанных в окрашенном препарате. Абсолютное содержание отдельных видов лейкоцитов в 1 л крови высчитывают, пользуясь следующей пропорцией: а — 100 %, х-б, где а — количество лейкоцитов, подсчитанных в камере Горяева; б — процентное содержание лейкоцитов подсчитанных в мазке крови. Допустим, что количество лейкоцитов, подсчитанных в камере Горяева, составляет 8х 109/л, а количество моноцитов, посчитанных в мазке крови, — 4%. Абсолютное количество моноцитов будет равно:
8х 109/л-100 %
8х 109/л х 4 =0,32 х109/л экземпляров
Х - 4%, х= 100
