Комбинированная окраска Мая—Грюнвальда—Романов­ского—Гимзе по Паппенгему.

На нефиксированный мазок налива­ют пипеткой готовый краситель — фиксатор Мая—Грюнвальда, представляющий собой раствор эозин-метиленового синего в метиленовом спирте, на 3 мин. Через 3 мин к покрывающей раст­вор краске добавляют равное количество дистиллированной во­ды и продолжают окрашивание еще 1 мин. После этого краску смывают и мазок высушивают на воздухе. Затем высушенный мазок докрашивают свежеприготовленным водным раствором краски Романовского в течение 8—15 мин.(=10 мин).

2.9.Лейкоцитарная формула

2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы

Количество лейкоцитов в сосудистом русле зависит от выраженности процессов их образования, скорости их выхода (мобилизации) из костного мозга и перемещения в ткани (в особенно­сти в очаги повреждения), от степени захвата легкими и селезенкой. В силу этих и других причин содержание лейкоцитов в крови здорового человека подвержено определенным коле­баниям: оно повышается к концу дня, при физической нагрузке, эмоциональном напряжении, резкой смене темпера­туры окружающей среды. Следует иметь в виду и возмож­ность перераспределения лейкоцитов в кровяном русле за счет их пристеночного накопления в сосудах с замедленным кровотоком. Увеличение их содержания наступает после при­ема пищи (пищеварительный лейкоцитоз). Даже положение руки в момент взятия крови из пальца может повлиять на ре­зультаты анализа.

Самый многочисленный отряд лейкоцитов составляют гранулоциты, т.е. зернистые лейкоциты. Зернистыми они называются потому, что в их цитоплазме обнаруживается мно­жество мелких зернышек. К зернистым лейкоцитам относят эозинофилы, т.е. лейкоциты, окрашивающиеся кислыми красителями (у здорового человека на их долю приходится (1 —5% от всего количества лейкоцитов), базофилы, окрашивающие­ся основными красками (в норме их не более 1% от всего ко­личества лейкоцитов), а также нейтрофилы, окрашивающие­ся нейтральными красителями и составляющие большинство лейкоцитов. Последние различаются по степени своей зрелости и делятся на юные лейкоциты (0-1%), лейкоциты среднего возраста — палочкоядерные (1-6 %) и зрелые, или сегментоядерные, нейтрофилы (47—72%).

Эозинофилы и базофилы служат «транспортерами» важ­ного биогенного амина — гистамина, избыток которого вызы­вает аллергические реакции, проявляющиеся, в частности, в виде крапивницы и бронхиальной астмы.

Другая разновидность лейкоцитов — агранулоциты, т.е. лейкоциты, лишенные мелких зернышек, гранул. К ним от­носятся моноциты, которые могут образовываться не только в костном мозге, но и в лимфатических узлах, элементах со­единительной ткани. К агранулоцитам причисляют также лимфоциты, образующиеся преимущественно в лимфатичес­ких узлах. У практически здорового человека моноциты со­ставляют 3—9%, лимфоциты — 19-37 от всего количества лейкоцитов.

При резкой активации кроветворения возможен выход я кровь незрелых лейкоцитарных клеток (вплоть до бластных).

Лейкоцитарная формула - это процентное соотношение различных видов лейкоцитов. В норме встречаются: нейтрофилы - палочкоядерные- 1-6 % . сегм.- 47-72 и т. д

При патологических процессах в крови могут выявлять и предшественники палочкоядерных клеток: метамиелоцит. и миелобласты.

Увеличение содержания нейтрофилов в крови характер, но для острых инфекционных заболеваний, интоксикация злокачественных новообразований, т.е. всех тех состоят которым свойственно внедрение в организм микробов, накопление в нем продуктов распада клеток, чужеродных веществ (известно, что нейтрофилы выполняют в организм фагоцитарную и бактерицидную функции). Оно особенно выражено при лейкозах. В крови больных лейкозами и страдающих так называемыми лейкемоидными реакциями обнаруживаются и предшественники обычных лейкоцитов — миелоциты, промиелоциты и миелобласты.

Появление незрелых нейтрофилов в крови (большого количества палочкоядерных нейтрофилов, метамиелоцитов юных миелоцитов, промиелоцитов) носит название нейтрофильного сдвига влево. Его выраженность отражает тяжесть патологического процесса. При многих тяжелых инфекциях септических и гнойных процессах лейкоцитарная формула изменяется за счет увеличения количества палочкоядерных нейтрофилов, метамиелоцитов и миелоцитов. Такой ядерный сдвиг влево встречается, в частности, при ангинах, остром ап­пендиците, холецистите, тяжелых формах пневмоний, актив ном туберкулезе, абсцессе легкого, гнойном менингите, дифтерии, сепсисе.

Значительное количество нейтрофилов с повышенной сегментированностью ядер характеризует нейтрофильный сдвиг вправо. Он наблюдается при лучевой болезни, некоторых других заболеваниях.

Для дополнительной, углубленной оценки сдвига в лейкоцитарной формуле (влево, вправо) нередко прибегают к рас­чету индекса сдвига (ИС) в содержании нейтрофилов, различающихся структурой ядра. Под индексом сдвига принято понимать соотношение показателей: (миелоциты+метамиелоциты+палочкоядерные нейтрофилы)/сегментоядерные нейтрофилы. В норме ИС составляет 0,06.

При лейкопенических реакциях уменьшается количеств нейтрофилов в крови. Такое наблюдается при гипо- и апластической анемии, лучевой болезни. Для этих состояний характерно угнетение продукции клеток костным мозгом, сис­тематическом употреблении некоторых лекарственных пре­паратов: сульфаниламидов, амидопирина, снотворных и др.