- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •Раздел II Исследования крови на общий анализ
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •Раздел IV Патологические изменения состава крови
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах. Пояснительная записка
- •Уважаемые студенты!
- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •II.Класс частично детерминированных полипотентных клеток предшественников
- •1.2 Клеточный состав крови и диагностическое значение
- •Раздел II
- •2.1 Основные правила инфекционной безопасности при взятии крови на общий анализ.
- •1 Этап дезинфекции
- •2.2 Понятие о клиническом анализе
- •Технология забора капиллярной крови на общий анализ
- •Взятие крови для гематологических исследований может осуществляться 3 способами:
- •2.3 Определение гемоглобина
- •2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГем
- •2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре mf-1020
- •2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
- •2.4 . Подсчет эритроцитов
- •2.4.1 Методика подсчета эритроцитов в камере Горяева
- •2.5 Подсчет лейкоцитов
- •2.5.1 Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева
- •2.6 Скорость оседания эритроцитов
- •2.6.1 Метод Панченкова
- •2.7.Индексы красной крови
- •2.7.1 Подсчет индексов красной крови
- •2.8 Приготовление мазков крови
- •2.8.1 Методика приготовления мазков крови
- •Комбинированная окраска Мая—Грюнвальда—Романовского—Гимзе по Паппенгему.
- •2.9.Лейкоцитарная формула
- •2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы
- •Изменения содержания отдельных элементов белой крови
- •Изменения в клеточном составе «белой» крови могут быть классифицированы на 5 основных типов.
- •Лейкоцитарная формула здорового человека
- •Морфологические структурные изменения лейкоцитов при патологии
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •3.1 Тромбоциты
- •3.1.1 Методика окраски мазков крови на тромбоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •3.1.2 Методика определения длительности кровотечения (уколочная проба по Дуке)
- •3.1.3 Методика определения времени свертывания капиллярной крови (метод Сухарева)
- •3.2 Ретикулоциты
- •3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •Объем эритроцитов
- •3.3.1 Унифицированный метод с помощью микроцентрифуги.
- •3..3..2 Унифицированный микрометод (модификации. Тодорова).
- •3.4 Осмотическая резистентность
- •3.4.1 Унифицированный метод определения осмотической резистентности эритроцитов в модификации Идельсона
- •Раздел I V Патологические изменения состава крови
- •4.1 Анемии
- •4. 1.1 Анемии вследствие кровопотерь
- •4.1.2 Железодефицитные анемии
- •1. 3 В12 (фолиево) - дефицитные анемии
- •4.1.4 Апластические анемии
- •4.1.5 Гемолитические анемии
- •4.2 Лейкозы
- •4.2.1 Лейкозы острые
- •4.2.2 Лейкозы хронические
- •4.3 Геморрагические диатезы
- •4.3.1 Тромбоцитопении и тромбоцитопатии
- •4.3.2 Геморрагические диатезы, связанные с нарушениями в системе свертывания крови
- •4.3.3Геморрагические диатезы, связанные с изменением сосудистой стенки
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах
- •3.Федеральный закон Российской Федерации от 21 ноября 2011 г. N 323-фз "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации"
2.6 Скорость оседания эритроцитов
2.6.1 Метод Панченкова
СОЭ — это процесс разделения свежевыпущенной крови с примесью антикоагулянтов на два слоя: нижний — эритроциты, верхний — плазма и лейкоциты. СОЭ выявляет изменения в соотношении белковых компонентов плазмы крови, а также числа и объема эритроцитов при различных заболеваниях.
Капилляр Панченкова - это пипетки с делениями от 0 (верхняя отметка) до 100 мм. На уровне деления 50 нанесена буква « Р.» (реактив), а на уровне отметки 0- буква « К» - (кровь).
Аппарат Панченкова - представляет собой штатив для установки стеклянных капилляров в вертикальном положении. Каждому капилляру соответствует порядковый номер на штативе.
Методика определения.
1.Капилляр Панченкова промывают 5% раствором цитрата натрия.
В пробирку наливают 5% раствор цитрата натрия в объеме 1/4 части капилляра.
Кровь из пальца забирают до верхней метки — цифры «О» (буква «К» — кровь) капилляра.
4.Кровь выдувают из капилляра в пробирку и смешивают с цитратом натрия.
5.Полученную смесь набирают в капилляр до верхней метки и ставят вертикально в аппарат Панченкова при температуре 18-22.°С (при более низкой температуре оседание замедляется, а при более высокой — ускоряется).
6.Через 1 час отмечают величину образовавшегося столбика плазмы в миллиметрах.
Пределы нормальных колебаний СОЭ у мужчин — 1—10 мм/ч, у женщин — 2—15 мм/ч. Более высокая СОЭ у женщин может быть объяснена меньшим количеством эритроцитов и большим содержанием фибриногена.
Клинико-диагностическое значение: В механизме СОЭ принимают участие физические, физико-химические и биологические факторы. Их влияние в целом объясняется адсорбционной теорией, суть которой состоит в том, что эритроциты адсорбируют белковые частицы плазмы, образуют агломераты (скопления эритроцитов) и смещаются вниз при отстаивании крови. В конечном итоге СОЭ зависит от количества эритроцитов и соотношения концентрации «агломеринов» и сил, удерживающих эритроциты в состоянии взвеси. Наибольшее влияние на СОЭ оказывает соотношение белков плазмы, поэтому СОЭ можно считать пробой коллоидной устойчивости сыворотки крови. Альбумины (мелкодисперсные белки, составляющие в норме 60% от общего белка сыворотки крови) оказывают сильное защитное действие на эритроциты и препятствуют их оседанию. Увеличение же количества глобулинов (грубодисперсные белки, составляющие в норме 40% белка сыворотки), например, при воспалительных заболеваниях и опухолях, резко увеличивает СОЭ. Яркой иллюстрацией «содружественного» влияния обоих факторов на величину СОЭ является нефротический синдром. При нем имеет место как значительное снижение альбуминов за счет потери их с мочой, так и абсолютное увеличение у - и р-глобулинов и накопление в крови аномальных грубодисперсных белков — парапротеинов; значительно увеличивается и холестерин крови — липид плазмы, который также способствует ускорению СОЭ. СОЭ достигает высшей степени (70—80 мм/ч) при различных видах парапротеинемии (миелома, макроглобулинемия). Напротив, при взаимной «нейтрализации» патологических факторов, действующих антагонистически на процесс оседания эритроцитов, СОЭ может оставаться нормальной, например, при остром гепатите. При этом пока не наступило значительного понижения фибриногена, оседание эритроцитов может увеличиваться в соответствии с уменьшением соотношения альбумины/глобулины. При наступлении выраженной фибриногенопении и увеличении содержания желчных кислот происходит компенсация влияния на СОЭ уменьшения соотношения альбумины/глобулины, вследствие чего оседание эритроцитов возвращается к норме или даже замедляется.
Таким образом, СОЭ увеличивают:
• изменение белкового «спектра» крови: увеличение глобулинов, снижение альбуминов, появление парапротеинов, увеличение содержания фибриногена, что наиболее часто наблюдается при воспалительных и неопластических процессах;
• уменьшение числа эритроцитов (анемии);
увеличение объема эритроцитов и увеличение содержания в них гемоглобина. Такие эритроциты (мегало- и макроциты) имеют большой удельный вес, тяжелее обычных, поэтому оседают скорее, чем нормо-микроциты. Поэтому при мегалобластических анемиях скорость оседания эритроцитов больше, чем при железодефицитных;
увеличение содержания холестерина в крови (атеросклероз и вторичные гиперлипидемии).
СОЭ замедляют:
увеличение числа эритроцитов (эритремия);
понижение рН крови - развитие ацидоза (при сердечной недостаточности);
увеличение содержания желчных кислот в крови (механическая и паренхиматозная желтухи).
Это интересно!
Метод Панченкова имеет ряд принципиальных недостатков обусловленных плохой стандартизацией производимых промышленностью капилляров, необходимостью использовать для анализа только капиллярную кровь, а также невозможностью адекватно отмыть капилляр при многократном применении. В последние годы метод Панченкова стал применяться для определения СОЭ венозной крови, не смотря на то, что никаких научно-практических исследований по референтным величинам для этого метода, по изучению влияния различных факторов при исследовании венозной крови проведено не было. Поэтому метод Панченкова в настоящее время является источником ошибочных результатов и проблем в работе КДЛ и деятельности врачей-клиницистов, не используется в других странах (кроме стран бывшего СССР) и должен быть исключен из практики лабораторий.
2.6.2 Метод Вестергрена
В данном методе используются стандартные капилляры из стекла или пластика длиной 300 мм ± 1,5 мм (рабочей является длина капилляра 200 мм), диаметром – 2,55 мм ± 0,15 мм, что повышает чувствительность метода. Время измерения – 1 ч. Для анализа может быть использована как венозная, так и капиллярная кровь. Методика определения СОЭ методом Вестергрена включает следующие этапы:
Ход определения
1. венозная кровь берется в вакуумные пробирки с К-ЭДТА (капиллярная кровь берется в пробирки с К-ЭДТА);
2. пробу венозной (капиллярной) крови смешать с 5% раствором натрия цитрата в соотношении 4:1;
3. произвести забор крови в капилляр Вестергрена;
4. через 1 ч измерить СОЭ по высоте столба прозрачной плазмы.
Метод Вестергрена в настоящее 41 время полностью автоматизирован, что существенно повышает производительность КДЛ и качество результатов. Вместе с тем, необходимо понимать, что классический метод Вестергрена имеет целый ряд модификаций, сущность которых состоит в уменьшении длины капилляра (например, используются моноветты или вакуумные пробирки с раствором натрия цитрата рабочая длина которых составляет 120 мм, а не 200 мм, как в классическом методе Вестергрена), изменении угла установки капилляра (например, ряд фирм использует установку вакуумных пробирок под углом 18°), укорочении времени для наблюдения за оседанием эритроцитов (до 30–18 мин) или сочетании этих изменений. Насколько такие модификации можно называть методом Вестергрена в научной литературе не решен.
На результаты определения СОЭ методом Панченкова и классическим методом Вестергрена могут оказывать существенное влияние ряд факторов преаналитического и аналитического этапов (не связанных с заболеванием пациента) производства лабораторных анализов:
• температура в помещении где проводится анализ (повышение температуры в помещении на 1 °С увеличивает СОЭ на 3%);
• время хранения пробы (не более 4 ч при комнатной температуре);
• используемый антикоагулянт (рекомендован цитрат натрия);
• правильная вертикальность установки капилляра;
• длина капилляра;
• внутренний диаметр капилляра;
• степень разведения крови антикоагулянтом (рекомендуемое разведение 4:1);
• величина гематокрита.
