- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •Раздел II Исследования крови на общий анализ
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •Раздел IV Патологические изменения состава крови
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах. Пояснительная записка
- •Уважаемые студенты!
- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •II.Класс частично детерминированных полипотентных клеток предшественников
- •1.2 Клеточный состав крови и диагностическое значение
- •Раздел II
- •2.1 Основные правила инфекционной безопасности при взятии крови на общий анализ.
- •1 Этап дезинфекции
- •2.2 Понятие о клиническом анализе
- •Технология забора капиллярной крови на общий анализ
- •Взятие крови для гематологических исследований может осуществляться 3 способами:
- •2.3 Определение гемоглобина
- •2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГем
- •2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре mf-1020
- •2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
- •2.4 . Подсчет эритроцитов
- •2.4.1 Методика подсчета эритроцитов в камере Горяева
- •2.5 Подсчет лейкоцитов
- •2.5.1 Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева
- •2.6 Скорость оседания эритроцитов
- •2.6.1 Метод Панченкова
- •2.7.Индексы красной крови
- •2.7.1 Подсчет индексов красной крови
- •2.8 Приготовление мазков крови
- •2.8.1 Методика приготовления мазков крови
- •Комбинированная окраска Мая—Грюнвальда—Романовского—Гимзе по Паппенгему.
- •2.9.Лейкоцитарная формула
- •2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы
- •Изменения содержания отдельных элементов белой крови
- •Изменения в клеточном составе «белой» крови могут быть классифицированы на 5 основных типов.
- •Лейкоцитарная формула здорового человека
- •Морфологические структурные изменения лейкоцитов при патологии
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •3.1 Тромбоциты
- •3.1.1 Методика окраски мазков крови на тромбоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •3.1.2 Методика определения длительности кровотечения (уколочная проба по Дуке)
- •3.1.3 Методика определения времени свертывания капиллярной крови (метод Сухарева)
- •3.2 Ретикулоциты
- •3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •Объем эритроцитов
- •3.3.1 Унифицированный метод с помощью микроцентрифуги.
- •3..3..2 Унифицированный микрометод (модификации. Тодорова).
- •3.4 Осмотическая резистентность
- •3.4.1 Унифицированный метод определения осмотической резистентности эритроцитов в модификации Идельсона
- •Раздел I V Патологические изменения состава крови
- •4.1 Анемии
- •4. 1.1 Анемии вследствие кровопотерь
- •4.1.2 Железодефицитные анемии
- •1. 3 В12 (фолиево) - дефицитные анемии
- •4.1.4 Апластические анемии
- •4.1.5 Гемолитические анемии
- •4.2 Лейкозы
- •4.2.1 Лейкозы острые
- •4.2.2 Лейкозы хронические
- •4.3 Геморрагические диатезы
- •4.3.1 Тромбоцитопении и тромбоцитопатии
- •4.3.2 Геморрагические диатезы, связанные с нарушениями в системе свертывания крови
- •4.3.3Геморрагические диатезы, связанные с изменением сосудистой стенки
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах
- •3.Федеральный закон Российской Федерации от 21 ноября 2011 г. N 323-фз "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации"
2.5 Подсчет лейкоцитов
2.5.1 Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева
Лейкоциты — белые кровяные тельца — играют главную роль в противомикробной защите организма. Гранулоциты фагоцитируют микробы и разрушают их с помощью ферментов, заключенных в гранулах, лимфоциты вырабатывают антитела и обеспечивают иммунные реакции организма.
Методика определения пробирочным методом: в пробирку наливают 0,4 мл раствора Тюрка (жидкость Тюрка содержит уксусную кислоту для разрушения эритроцитов и метиленовую синь для окраски ядер лейкоцитов). Капиллярной пипеткой набирают из свежей капли 0,02 мл крови, осторожно выдувают ее в пробирку с реактивом и ополаскивают пипетку. Смесь хорошо перемешивают. При этом разведение крови в 20 раз. Концом круглой стеклянной палочки отбирают каплю разведенной крови и наносят на край шлифованного стекла камеры.
Подсчет ведут в 100 больших неразгрефленных квадратах, собранных вместе по четыре. Используется малое увеличение.
Вывод формулы подсчета № 1 .
100 квадратов содержат по площади 1600 малых квадратов (16х 100)
Объем крови над малым квадратом 1/4000 мм3
Разведение крови в 20 раз
Количество лейкоцитов в 1 мкл крови = в -4000-20. = А х 50
1600
Например: в 100 больших квадратах сетки Горяева сосчитано 130 лейкоцитов. В 1 мкл крови количество лейкоцитов будет равно 130 х 50=6500, или 6,5-103.
Для того чтобы определить содержание лейкоцитов в 1 л крови, нужно число лейкоцитов, выраженное в тысячах, умножить на 109.
В нашем примере количество лейкоцитов в 1 л крови равно 6,5-109.
Вывод формулы подсчета № 2
1. Объем малого квадрата 1/4000 мм3.
2. Объем одного большого квадрата, содержащего 16 маленьких, 16/4000 = 4/1000 мм
3. Объем 100 больших квадратов 100 • 4/1000 = 4/10 мм3.
4. Количество лейкоцитов в 1 мм3 камеры вычисляется из пропорции: 4/10 мм3 — А клеток, 1 мм3 — X клеток,
Х="1"хАх10
4
5. Количество лейкоцитов в 1 мкл периферической крови, т.е. с учетом разведения в 20 раз равняется
Ах, 10•х20 = Ах50
4
Практически подсчитанное количество лейкоцитов (при разведении в 20 раз) умножают на 50.
Клинико-диагностическое значение: Содержание лейкоцитов в норме в 1 мкл крови составляет 4000—9000 (4—9 • 103/мкл). По системе СИ число лейкоцитов выражают содержанием их в 1 литре (л) крови. Коэффициент пересчета с обычно употребляемых тысяч (тыс.) в 1 мм3, выраженных как «тыс. 103/мм3», в рекомендуемые по СИ «тыс. • 109/л» равен 106. Таким образом, 4000-9000 лейкоцитов в 1 мкл выражаются как 4—9 • 103/л.
Увеличение числа лейкоцитов в крови (выше 9 • 109/л) называется лейкоцитозом, уменьшение (менее 4 • 109/л) — лейкопенией.
Лейкоцитоз может быть:
Перераспределительным, когда возникает в результате сосудистых реакций с освобождением кровяных депо при приеме пищи, мышечной работе, эмоциях, шоке.
Реактивным, когда проявляется как временная реакция крови на инфекцию или интоксикацию (временная гиперплазия костного мозга); бластные клетки при этом в периферической крови никогда не появляются. Такой лейкоцитоз наблюдается при пневмониях, гнойных заболеваниях, инфаркте миокарда, отравлении угарным газом, грибами.
При лейкозах, когда он достигает наибольших цифр (100 000— 800 000-1 000 000, т.е. 100 • 109- 800 • 109-1000 • 109/л) и обусловлен опухолевой гиперплазией самой кроветворной ткани, в крови могут появляться при этом бластные клетки.
Лейкопения может возникать:
При бактериальных и вирусных заболеваниях (брюшной тиф, грипп, корь, вирусный гепатит, сепсис).
При агранулоцитозах: иммунных, когда к лейкоцитам начинают вырабатываться антитела — при системной красной волчанке, ревматоидном артрите, приеме лекарств (анальгин, сульфаниламиды и др.); токсических — при воздействии ионизирующего излучения, испорченных злаков.
При лейкопенических формах лейкозов, т.е. протекающих с низким числом клеток в периферической крови независимо от их качественного состава. Так могут проявляться начальная стадия острого лейкоза или терминальная стадия хронического миелоза.
При спленомегалиях с картиной гиперспленизма, или угнетения кроветворения, объясняемых функциональной гиперреактивностью селезенки в отношении ее влияния на кроветворение (депрессорный и гемолитический механизмы) при системных и изолированных спленомегалиях.