- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •Раздел II Исследования крови на общий анализ
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •Раздел IV Патологические изменения состава крови
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах. Пояснительная записка
- •Уважаемые студенты!
- •Раздел I Кроветворение. Состав и функции крови.
- •II.Класс частично детерминированных полипотентных клеток предшественников
- •1.2 Клеточный состав крови и диагностическое значение
- •Раздел II
- •2.1 Основные правила инфекционной безопасности при взятии крови на общий анализ.
- •1 Этап дезинфекции
- •2.2 Понятие о клиническом анализе
- •Технология забора капиллярной крови на общий анализ
- •Взятие крови для гематологических исследований может осуществляться 3 способами:
- •2.3 Определение гемоглобина
- •2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГем
- •2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре mf-1020
- •2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
- •2.4 . Подсчет эритроцитов
- •2.4.1 Методика подсчета эритроцитов в камере Горяева
- •2.5 Подсчет лейкоцитов
- •2.5.1 Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева
- •2.6 Скорость оседания эритроцитов
- •2.6.1 Метод Панченкова
- •2.7.Индексы красной крови
- •2.7.1 Подсчет индексов красной крови
- •2.8 Приготовление мазков крови
- •2.8.1 Методика приготовления мазков крови
- •Комбинированная окраска Мая—Грюнвальда—Романовского—Гимзе по Паппенгему.
- •2.9.Лейкоцитарная формула
- •2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы
- •Изменения содержания отдельных элементов белой крови
- •Изменения в клеточном составе «белой» крови могут быть классифицированы на 5 основных типов.
- •Лейкоцитарная формула здорового человека
- •Морфологические структурные изменения лейкоцитов при патологии
- •Раздел III Дополнительные гематологические исследования
- •3.1 Тромбоциты
- •3.1.1 Методика окраски мазков крови на тромбоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •3.1.2 Методика определения длительности кровотечения (уколочная проба по Дуке)
- •3.1.3 Методика определения времени свертывания капиллярной крови (метод Сухарева)
- •3.2 Ретикулоциты
- •3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)
- •Объем эритроцитов
- •3.3.1 Унифицированный метод с помощью микроцентрифуги.
- •3..3..2 Унифицированный микрометод (модификации. Тодорова).
- •3.4 Осмотическая резистентность
- •3.4.1 Унифицированный метод определения осмотической резистентности эритроцитов в модификации Идельсона
- •Раздел I V Патологические изменения состава крови
- •4.1 Анемии
- •4. 1.1 Анемии вследствие кровопотерь
- •4.1.2 Железодефицитные анемии
- •1. 3 В12 (фолиево) - дефицитные анемии
- •4.1.4 Апластические анемии
- •4.1.5 Гемолитические анемии
- •4.2 Лейкозы
- •4.2.1 Лейкозы острые
- •4.2.2 Лейкозы хронические
- •4.3 Геморрагические диатезы
- •4.3.1 Тромбоцитопении и тромбоцитопатии
- •4.3.2 Геморрагические диатезы, связанные с нарушениями в системе свертывания крови
- •4.3.3Геморрагические диатезы, связанные с изменением сосудистой стенки
- •Раздел V Исследование на гематологических анализаторах
- •3.Федеральный закон Российской Федерации от 21 ноября 2011 г. N 323-фз "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации"
2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре mf-1020
Введение: мини фотометры являются миниатюрными настольными приборами для измерения гемоглобина крови.
Особенности прибора: цифровой индикатор, кювета открытого типа, относительная устойчивость к светорассеиванию, двухканальная оптическая схема.
Прибор показывает концентрацию гемоглобина в г/л. Светопоглощение зеленого света с длиной волны(546 нм) раствором гемиглобинцианида напрямую переводятся в единицы измерения гемоглобина. Настройка и калибровка прибора осуществляется при помощи двух ручек - « ZERO» и «CAL» . К прибору прилагается светофильтр (калибратор), назначение которого - убедиться в исправности оптических и электронных узлов и калибровки минифотометра.
Масса прибора 1 кг 300 гр.
Порядок измерения:
1.Включите прибор.
2.В течение 10 мин прогрейте.
3.Убедитесь в том, что прибор правильно откалиброван.
4.Установите кювету с холостой пробой реагента трансформирующего раствора. 5.С помощью ручки « ZERO» на цифровом индикаторе установите нулевое значение. 6.Приготовьте кровь, разбавив ее 1:251 с трансформирующим раствором и проведите измерение.
Приготовление пробы:
1 .Двадцать микрометров крови (0,02 мл) необходимо разбавить в 5 ,0 мл трансформирующего раствора р-ра Драбкина- 1:21
2.Хорошо перемешайте (встряхните). Прежде чем приступить к измерению, подождите 5-10 мин, особенно если реагент не содержит детергент.
Калибровка минифотометра по стандартному р-ру гемиглобинцианида
Вставьте кювету, содержащую трансформирующий реактив (р-р Драбкина) в кюветный отсек.
При помощи ручки « ZERO» установите нулевое значение в цифровом табло.
Вставьте кювету, содержащую стандартный р-р гемиглобинцианида, в кюветный отсек.
При помощи ручки « CAL» установите данное значение стандартного калибровочного р-ра в цифровом табло (пример 150 г/л).
Повторите процедуру калибровки от пункта 1 до пункта 4.
Калибровка окончена, и Вы можете приступить к измерению
Калибровка минифотометра при помощи калибратора (по фактору)
1.Вставьте калибратор со светофильтром в кюветный отсек таким образом, чтобы была
видна надпись «ZERO» с цифровым значением (например, 0.1.6)
2.При помощи ручки «ZERO» установите это значение (п.п.0.1.6) в цифровом табло.
3.Переверните калибратор и вставьте его в кюветный отсек таким образом, чтобы
была видна надпись «CAL» с калибровочным значением (пример 159).
4.При помощи ручки «CAL» установите данное значение на цифровом табло.
Повторите процедуру от пункта 1 до пункта 4.
Калибровка окончена, и Вы можете приступать к измерениям.
Требования к реактивам:
1.Любая модификация р-ра пригодна для применения.
2.Разбавление 10 мкл крови в 2,5 мл трансформирующего не пригодно для этой модели.
3.Можно приготавливать самим р-р-1 раз в месяц, хранится в посуде из темного стекла.
2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре
Принцип метода: Гемоглобин, взаимодействуя с ацетонциангидрином, в присутствии железосинеродистого калия K3[Fe(CN)6] образует гемиглобинцианид красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина в пробе крови.
Реактивы: 1) трансформирующий раствор (0,5 мл ацетонциангидрина, 0,2 г железосинеродистого калия, 1 г гидрокарбоната натрия NaHCb растворяют в 1 л дистиллированной воды; реактив стоек, хранится в посуде из темного стекла); 2) стандартный раствор гемиглобинцианида (раствор, выпускаемый фирмой «Ренал», содержит 59,75 мг% гемиглобинцианида; раствор фирмы «Иммуна» —64,23 мг%. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 150 и 154 г/л при разведении ее в 251 раз).
Ход определения. К 5мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл (капилляр Сали) крови. При этом кровь разводится в 251 раз. Оставляют пробирки на 20 мин при комнатной температуре.
Фотометрируют при зеленом светофильтре (длина волны 540 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм (1 см) против дистиллированной воды.
Стандартный раствор фотометрируют при тех же условиях, что и опытную пробу.
Расчет. Содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику, который строится по стандартному раствору гемиглобинцианида или по формуле:
С=Е о/ Е к х 120
Где С- концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л
Ео - оптическая плотность опытной, ед. опт. Плотность
Ек- оптическая плотность калибровочной пробы, ед.плот.
120-концекнтрация гемоглобина кВ калибровочном растворе, г/л.
Приготовленные разведения фотометрируют. против дистиллированной воды («холостая» проба).