1.1.1.2.5. Методы исследования кала с применением флотационных растворов

В основе методов флотации (всплывания) лежит разность удельного веса флотационного раствора и яиц гельминтов, удельный вес флотационного раствора выше, в результате яйца гельминтов всплывают на поверхность жидкости и обнаруживаются в поверхностной пленке.

Необходимые реактивы и оборудование

Один из флотационных растворов

Ареометр

Предметные стекла (обезжиренные)

Пипетки стеклянные

Химические стаканчики емкостью 30-50 мл

Кюветы эмалированные

Стеклянные или деревянные палочки

Подготовка к исследованию

1) Приготовление флотационного раствора по одной из двух прописей:

а) раствор N 1. Раствор нитрата натрия или азотнокислого натрия (предложенный Калантарян) с плотностью 1,38-1,40 готовят из расчета 1000 г вещества на 1 л горячей воды;

б) раствор N 2. Насыщенный раствор хлорида натрия с плотностью 1,18-1,20 (предложенный Фюллеборном) готовят из расчета 400-420 г соли на 1 л кипящей воды.

2) Одну из солей растворяют в горячей воде в эмалированной посуде, причем кладут соль в емкость с горячей водой порциями при подогревании на плите и постоянном перемешивании до полного растворения.

3) Удельный вес флотационных растворов измеряется ареометром только после остывания раствора при комнатной температуре.

4) Измерение удельного веса флотационного раствора ареометром строго обязательно, так как приготовление раствора по прописи не гарантирует получение нужного удельного веса (например, когда используемая соль недостаточно химически чистая).

5) Фильтровать приготовленные растворы необязательно. Если раствор приготовлен в большом количестве, то в последующие дни перед исследованием его подогревают с размешиванием осадка и после остывания раствора снова измеряют ареометром удельный вес.

Подготовка предметных стекол: предметные стекла обязательно обезжирить, например, в смеси Никифорова (равные части этилового спирта и эфира).

Подготовка к исследованию

1) В химический стаканчик объемом 30-50 мл налить небольшое количество одного из двух флотационных растворов.

2) Поместить в стаканчик 2,5 г кала.

3) Тщательно размешать палочкой (индивидуальной для каждого обследуемого).

4) Удалить сразу же после размешивания всплывшие крупные частицы палочкой (или ложечкой с дырочками).

5) Добавлять постепенно солевой раствор до образования выпуклого мениска.

6) Накрыть стаканчик обезжиренным стеклом.

7) Оставить взвесь на 30 мин при использовании растворов N 1 и 2.

8) Микроскопировать при увеличении: объектив 8, 10, окуляр 7, 10, уточнение морфологического строения - окуляр 40.

9) При невозможности микроскопирования сразу после снятия стекла необходимо добавить несколько капель глицерина и прикрыть покровным стеклом.

10) При использовании раствора N 2 необходимо просматривать не только стекло, но и осадок для выявления тяжелых яиц трематод.

           

1.1.1.3. Методы исследования кала на личинки гельминтов Метод Бермана

     

Применяется как специальный метод для диагностики стронгилоидоза и основан на положительном гидротаксисе личинок.

Необходимое оборудование

Штатив

Стеклянная воронка (диаметром 10 см)

Металлическое сито или сетка "мельничный газ"

Резиновая трубка с зажимом

Предметные стекла

Стеклянные или деревянные палочки

Чашки Петри

Центрифуга

Микроскоп

Подготовка к исследованию

1) Собрать аппарат Бермана, для чего закрепить в штативе стеклянную воронку с металлическим ситом. На нижний конец воронки надеть резиновую трубку с зажимом.

2) Пробу кала объемом 20-50 г поместить на металлическое сито или мелкоячеистую металлическую сетку, или сетку "мельничный газ".

3) Сетку с пробой кала приподнять и в воронку налить воду таким образом, чтобы нижняя часть сетки с калом была погружена в воду.

4) Через 24 ч зажим на резиновой трубке быстро открыть и жидкость спустить в центрифужную пробирку.

5) Полученную жидкость центрифугировать 1-2 мин.

6) Надосадочную жидкость быстро слить.

7) Осадок нанести на предметное стекло или в чашку Петри.

8) Можно спустить жидкость в чашку Петри и исследовать без центрифугирования с использованием МБС. При обнаружении личинок для их обездвиживания внести одну каплю раствора Люголя, личинку перенести на предметное стекло и прикрыть покровным.

9) Микроскопировать при увеличении: объектив 8 или 10, окуляр 7 или 10, уточнение морфологического строения при увеличении: объектив 40, окуляр 10.