- •Биотехнологические основы селекции производственных штаммов микроорганизмов
- •1. Особенности строения и функционирования наследственного аппарата прокариот
- •2. Модификационная /адаптационная/ изменчивость микроорганизмов в биотехнологических процессах
- •2.1. Понятие о фенотипе и механизмы его формирования
- •2.2. Норма реакции /поведения/ микроорганизма и её наследственная обусловленность
- •2.3. Обратимость фенотипов
- •2.4. Средства и механизмы управления адаптационной изменчивостью
- •2.5. Понятие о гомологии днк как критерии родственности определяемых форм микроорганизмов.
- •2.6. Заключение
- •3. Принципы и способы получения мутантных штаммов микроорганизмов
- •3.1. Мутации и механизмы её возникновения
- •3.2. Спонтанные и индуцированные мутации
- •3.3. Фенотипическое проявление и оценка мутаций
- •4. Принципы и техника получения рекомбинантных штаммов микроорганизмов.
- •4.1. Горизонтальный путь переноса генетической информации
- •4.2. Конъюгация
- •4.3. Трансдукция
- •4.4. Трансформация
- •5. Методы селекции микроорганизмов и генная инженерия.
- •5.1. Введение
2.4. Средства и механизмы управления адаптационной изменчивостью
Получение микроорганизмов – модификантов и их использование в биопроизводстве может быть управляемым, если известны способы регулирования метаболизма и роста. Их чаще связывают с факторами внешней среды. Многообразно обменных процессов, необходимых для синтеза различных веществ и роста клеток требует их хорошей координации /научно обоснованной биотехнологии/.
Каждый метаболический процесс включает несколько ферментативных реакций. Но регуляция клеточного метаболизма происходит на двух уровнях – на уровне синтеза ферментов и на уровне изменения их активности. Цель этой регуляции – обеспечить нужное соотношение между скоростью синтеза суммарного клеточного белка. Эта скорость определяется частотой транскрипции структурных генов.
Многие ферменты образуются непрерывно вне зависимости от условий среды. Такие ферменты называют конструктивным /соответственно, также говорят о конструктивном синтезе ферментов/.
Образование катаболических ферментов регулируется путем индукции субстратом, когда он имеется в питательной среде. Все другие катаболические ферменты, которые клетка способна синтезировать не должны образоваться , пока в них нет надобности . Индукция и репрессия действуют медленно /механизм грубой наводки/, а изменение активности ключевого фермента проявляется мгновенно /тонкая регуляция/.
Образование анаболитических ферментов регулируется путем репрессии конечным продуктом , появившемся в среде при определенном накоплении . Ферменты, необходимые для синтеза основных структурных компонентов бактерий, обычно образуются непрерывно, но их образование появляется если конечный продукт имеется в избытке. В таком случае говорят о репрессии конечным продуктом.
Регуляция на уровне активности ферментов свойственна, как правило, ключевым ферментом клеточного метаболизма под действием положительного или отрицательного эффектора. Оба типа регуляции – индукция и репрессия приводят к почти одинаковому результату: они влияют на пропускную способность того или иного метаболического пути.
2.5. Понятие о гомологии днк как критерии родственности определяемых форм микроорганизмов.
Модификационная изменчивость может настолько повлиять на морфологические и физиологические признаки микроорганизмов, что их таксономическая принадлежность /родственность/ к исходному фенотипу или типовому штампу вызывает большие сомнения. Более того, в селекционной работе классические ключи классификации и таксономии нередко не дают четкого ответа к какому роду и виду следует отнести те или другие микроорганизмы с почти одинаковыми внешними признаками и физиологическим поведением.
Для
этого в таксономию микроорганизмов в
последние годы был введен дополнительный
метод определения гомологии ДНК как
критерий родственности определяемых
форм. Действительно, модификационная
изменчивость, по существу, не затрагивает
наиболее консервативную часть
наследственного аппарата клетки – ДНК.
В макромолекуле ДНК возможно множество
сочетаний пар мономеров, обеспечивающее
все мыслимые степени изменчивости
структуры гена. Доказательством наличия
вариаций набора пар нуклеотидов в ДНК
служит тот факт, что при равном количестве
аденика /А/ и /T/,
гуанина /Г/ и цитозина /Ц/ отношение
у разных видов микроорганизмов колеблется
от 0,69 до 1,83.
Разные
виды микроорганизмов, имея различные
генотипы, естественно, имеют и суммарные
различия в химическом составе генов,
что отражается в колебаниях коэффициента
.
Этот показатель одинаков как у форм
одного вида, так и у близкородственных
бактерий. В результате коэффициента
соотношения пар комплементарных бактерий
и был принят в качестве коэффициента
видоспецифичности /критерий родственности,
или гомологии ДНК/.
