3. Стерилизация и дезинфекция

Полное освобождение любого материала от живых микроорганизмов и их покоящихся форм – стерилизация. Агенты, вызывающие гибель микробных клеток, называются бактерицидными. К ним относится высокая температура, луч.энергия, летучие химические соединения. Жидкости можно освободить от микробов фильтрованием.

Методы стерилизации:

1 Фламбирование - обработка поверхности пламенем (бактериологические петли, иглы, пинцеты, ножницы и др.)

2 Кипячение – производится в стерилизаторе на слабом огне, чтобы избежать разбрызгивания. По окончании стерилизации воду сливают, а инструменты берут стерильным пинцетом. Инструменты с мет.частями стерилизуют в 2% р-ре гидрокарбоната Na.

3 Пастеризация (неполная стерилизация) – уничтожение в материале только вегетативных клеток организмов. Воздействуют температурами 75-80гр. в течении 5-10 мин. Бактериальные эндоспоры остаются жизнеспособными. Их прорастанию препятствует низкий ph, высокие концентрации сахара, отсутствие O2.

4 Стерилизация сухим жаром осуществляется в сухожаровых шкафах. Максимальная температура достигает 200гр. Так стерилизуют стеклянную посуду. Перед стерилизаций посуду тщательно моют и сушат.

5 Стерилизация влажным жаром – в аппарате Коха или в автоклаве при открытом выпускном кране (питательные среды, свойства которых изменяются при высоких температурах)

6 Дробная стерилизация (тиндализация) – обработка материала текучим паром. При этим питательные среды подвергают 3 или 4 кратной обработке влажным жаром в течении 1 часа при температурах 56-75гр. с интервалами 24ч. В течении которой поддерживается температура благоприятная для прорастания. Проросшие из поры вегетативные клетки погибают при очередном нагревании материала.

7 Автоклавирование – обработка влажным паром под давлением. Автоклав представляет собой 2х стенный котел. Состоит из 2х камер – большой (стерилизационной), малой (водопроводной). Нагревание осуществляется с помощью вмонтированных электродов и регулируется автоматически.

8 Стерилизация фильтрованием – удобны жидкие питательные среды. В микробиологической практике широко применяются асбестовые и стеклянные фильтры.

9 Стерилизация облучением – на клетки бактерий летальных эффект оказывают УФ, рентгеновские, гамма, альфа, бета лучи и нейтроны. Бактерицидные лампы используются для стерилизации открытых поверхностей и воздуха помещений не менее чем на 30 мин до начала работы

10 Химическая стерилизация (дезинфекция) – удаление или разрушение патогенных микроорг в объектах или поверхностях с помощью хим.агентов. Бактерицидное действие обусловлено активностью функциональных групп, концентрацией данного вещества, длительностью контакта, ph, присутствием орг.вещества.

Наиболее часто применяются галогены и их производные (хлорамины, настойка I)

Фенольные соединения

Спирты

Микробоцидные газы (формальдегид)

3 Билет

1. Химический состав вирусов. Инфекционность нуклеиновых кислот.

По химическому составу вирусы делятся на:

1 простые (белок + нуклеиновая кислота)

2 сложные ( нукл.кислота + белок + липиды + углеводы. Есть дополнительная липопротеиновая оболочка - пеплос)

Основная мембрана вируса образует мембрану клетки хозяина. На поверхности пеплоса находятся пепломеры (выступы). Служат для прикрепления и узнавания вируса.

У вируса гриппа 2 вида пепломеров:

1 столбчатые (гемагглютинин)

2 грибовидные (нейраминидаза)

Гемагглютинин вызывает агглютинацию (склеивание эритроцитов). Нейраминидаза разрушает нейраминовую кислоту в клеточных стенках, обеспечивает проникновение вируса внутрь клетки.

Содержание липидов у вирусов – 0,2-50%, углеводов – 17-22%.

Нуклеиновые кислоты вирусов:

ДНК – А, Т, Г, Ц, У; сахара – дезоксирибоза, глюкоза, гексозамонофосфат, гентибиоза.

РНК – А,У,Г,Ц,Т (редко); сахар – рибоза

Днк и рнк одно- и двухцепочечные. В состав н.к. вирусов входят модифицированные нуклеотиды (присоед –СН3, -ОН, аминокислоты): этилурацил, глютамилурацил, глютамилтимин и др.

Засчет модифицированных нукл.оснований вирусы стараются защитить свою нуклеиновую кислоту, т.к. если разрезать нуклеиновую кислоту, она уже не сможет инфицировать.

2. Азот в форме аммиака и соединений аммония, получающийся в процессах биогенной азотфиксации, быстро окисляется до нитратов и нитритов. Этот процесс носит название нитрификации, он осуществляется нитрифицирующими бактериями

1 ст NH3 + 1½ O2 = (NO2-) + 2H+ + H2O

2 ст (NO2-) + ½ O2 = NO3-

Все живые организмы поставляют азот в окружающую среду. С одной стороны, все они выделяют в ходе жизнедеятельности продукты азотистого обмена: аммиак, мочевину и мочевую кислоту. Последние два соединения разлагаются в почве с образованием аммиака (который при растворении в воде дает ионы аммония). Азот, включённый в состав живых существ, после их гибели подвергается аммонификации (разложение содержащих азот сложных соединений с выделением аммиака и ионов аммония(NH4+)) и нитрификации.

Нитрат используется микроорганизмами для 2х целей:

- синтез азотсодержащих клеточных компонентов (ассимиляционная денитрификация)

NO3 ̅ --- -2e--- NO2͞--- -2e---HNO—2e---NH2OH—2e---NH3

(большие затраты восстановительной силы NADH, NADFH. Обладают большим сродством к электронам). Используются 8 электронов для образования аммиака, который используется этими организмами для аммонификации.

- диссимиляционная денитрификация

NO3̅ –2e—NO2͞—e—NO –e—NO2---N2

Восстановление нитрата 4я электронами. Обеспечивает замыкание круговорота азота в природе.

Денитрификация осуществляется с помощью нитрат, нитрит редуктазы.