- •1. Происхождение и пути эволюции микроорганизмов.
- •2. Репродукция ретровирусов
- •2 Билет
- •Природа и происхождение вирусов. Рибозимы.
- •Анаболизм у микроорганизмов
- •Стерилизация и дезинфекция
- •3 Билет
- •Химический состав вирусов. Инфекционность нуклеиновых кислот.
- •Разработал р.Кох.
- •1.Типы геномов вирусов
- •2. Азотфиксация. Молекулярный механизм.
- •3. Чистые культуры микроорганизмов. Определение чистоты культуры.
- •1. Строение вирусного гена
- •2. Нитрификация, денитрификация, аммонификация
- •3. Микроскопия живых микробов. Определение подвижности бактерий.
- •1)Белки вирусов
- •2) Дыхание микроорганизмов. Химизм и виды, смысл.
- •3)Фазово-контрастная микроскопия
- •Архитектура вирионов. Самосборка
- •Анаэробное дыхание.
- •8Билет.
- •1) Ди частицы. Особенности и. Процесса
- •2)Этц археев и бактерий
- •3)Закономерности роста микроорганизмов
- •9Билет.
- •1)Типы геномов вирусов
- •2)Конъюгация (межцарственная).
- •3)Микроскопия грибов и актиномицетов
- •1.Трансляция. Ранняя и поздняя.
- •2.Особенности строения клеточной стенки грамотрицательных, грамположительных бактерий и архей.
- •3.Морфология клеток микроорганизмов.
- •Репликация
- •Патогенез
- •Инсерция - тип хромосомной перестройки, заключающийся в появлении вставки в каком-либо участке нуклеотидной последовательности.
- •Регуляция:
- •Биологический смысл
- •3. Окраска по Граму.
- •2 Брожение
- •3 Молочнокислое брожение
- •2. Электрон-транспортные цепи бактерий и археев
- •Принципы составления питательных сред для выращивания микроорганизмов
- •3)В клеточных культурах in vitro
- •2.Перевиваемые кл. Культуры
- •1.Формирование вирионов. Самосборка. Выход из клетки.
- •2.Геномика микроорганизмов. Виды генетической рекомбинации.
- •3.Аммонификаторы.
- •Культура клеток используется в различных научных и практических областях:
- •Репродукция вирусов с днк-геномами
- •Трансдукция
- •Титрование вирусов
- •1.Продуктивная и абортивная формы инфекций.
- •2. Анаэробное дыхание.
- •3. Морфология и распространение архей.
- •1. Репликация
- •2. Энергетический обмен веществ у микроорганизмов.
- •3. Титрование вирусов (см. Билет 21)
3)В клеточных культурах in vitro
Размножаясь в культуре клеток, вирусы нередко оказывают цитопатическое действие, видимое под световым микроскопом.
1.Первичные культуры клеток. Источником получения первичных культур клеток являются обладающие большой потенцией роста эмбриональные ткани птиц (главным образом куриные фибробласты), экспериментальных животных, обезьян, но чаще всего готовят их из трипсинизированных тканей абортированных 8-14-недельных плодов человека. Для этого ткань плода измельчают ножницами на мелкие кусочки размером 2-4 мм. Затем для разрушения межклеточного вещества кусочки ткани заливают раствором трипсина.
Среды:
- Игла
-199 (синтетическая, поэтому доб-ют еще сыворотку крови).
Когда полученные клетки засевают в сосуд, они располагаются в один слой, но они подвижны. Они прикрепляются и размножаются (клоны) до тех пор, пока не начнут соединяться с другими клонами – контактная гибридизация. Первичные кл. культуры имеют ограниченный срок жизни, их можно переселять от 2 до 5 раз. Их преимущество: сохраняют нормальный генотип (2n) и хар-ки, присущие нормальным нетрансформированным тканям.
2.Перевиваемые кл. Культуры
Это стабильные или, как их нередко называют, иммортализованные (бессмертные) линии клеток, автономно размножающиеся, подобно бактериям. Получают их из нормальных тканей человека (амниона - FL, А-0, А-1; почек - Rh, 1ШЧ, диплоидных клеток); животных (почек обезьян - Vero, MS, BSC-1; почек кролика - ПК и его роговицы -SIRK) и злокачественных опухолей (шейки матки- HeLa, гортани - НЕр-2, полости рта - KB, костного мозга человека - Д-6 и др.), которые выращиваются путем последовательных пассажей на питательных средах вот уже многие десятки лет.Выбор системы определяется тропизмом вируса – способность репродуцироваться в опр-ых типах клеток. Гетероплоидные. Недостаток: склонны к злокачественному перерождению.
3.К полуперевиваемым культурам относятся диплоидные клетки человека. Они представляют собой клеточную систему, сохраняющую в процессе 50 пассажей (до года) диплоидный набор хромосом, типичный для соматических клеток используемой ткани. Диплоидные клетки человека не претерпевают злокачественного перерождения и этим выгодно отличаются от опухолевых. НО! они труднее культивируются.
Чтобы увеличить кол-во клеток, исп-ют суспензионное культивирование (на микроносителях).
нейротропные (в. бешенства)
пневмотропные (в. гриппа)
дерматропные (в. оспы)
политропные (в. лейкоза мышей)
пантропные (в любых клетках – в. болезни Ауески)
Билет №18
1.Формирование вирионов. Самосборка. Выход из клетки.
В формировании вибриона лежат белок-белковые и белок-нуклеиновые взаимодействия; они ассоциируют друг с другом в результате гидрофобных, гидрофильных взаимодействий, ионных и водородных связей, а также за счет пространственного взаимодействия. Процесс идет ступенчато и начинается с формирования нуклеопротеида. У Т-4 в самосборке участвуют упаковочные и сборочные белки. Упаковочные образуют пакасому, а сборочные локализуются внутри нее, откуда затем выходят, а вместо них затаскивается НК и капсид закрывается. У ϕХ-174 имеется два сборочных белка В и D (белки-шапероны). Формируется открытый капсид, внутрь которого застраиваются шапероны,, затем, после внесения НК, они удаляются из капсида, причем D-белки остаются на нем в виде пепломеров. Выход вибриона из клетки может происходить путем:
Взрыва вирусы, оболочка которых построена по икосаэдрическому типу, разрывают оболочку клетки хозяина
Почкования оболочечные вирусы имеют М-белок, который встраивается в мембрану и обеспечивает ее видоизменение, после чего вирион одевается мембраной клетки хозяина и отпочковывается от нее. Либо вирус выходит через каналообразующие белки (аллостерические). Нуклеопротеид вируса дотрагивается до этого белка, тот меняет свою конформацию и налипает на вирион.