16. Назовите методы исследования живых клеток и тканей

Изучение живых клеток и тканей позволяет получить наиболее полную информацию об их жизнедеятельности — проследить движение, процессы деления, разрушения, роста, дифференцировки и взаимодействия клеток, продолжительность их жизненного цикла, реактивные изменения в ответ на действие различных факторов.

К таким методам относятся: 1) прижизненные исследования клеток в организме (in vivo); 2) витальное и суправитальное окрашивание; 3) исследования живых клеток и тканей в культуре (in vitro); 4) клеточные гибриды; 5) гибридомы; 6) технология рекомбинантных ДНК.

17. Назовите методы исследования химического состава и метаболизма клеток и тканей

Для изучения химического состава биологических структур – локализации веществ, их концентрации и динамики в процессах метаболизма – применяют специальные методы исследования.

К таким методам относятся следующие качественные методы: 1) цито- и гистохимические методы, позволяющие выявлять локализацию различных химических веществ в структурах клеток, тканей и органов – ДНК, РНК, белков, углеводов, липидов, аминокислот, минеральных веществ, витаминов, активность ферментов; 2) радиоактивные изотопы; 3) метод радиоавтографии; 4) методы иммунофлюоресцентного анализа, применение антител; 5) фракционирование клеточного содержимого.

18. Укажите количественные методы исследования химического состава и метаболизма клеток и тканей.

В настоящее время наряду с качественными методами разработаны и применяются количественные гистохимические методы определения содержания различных веществ в клетках и тканях. Особенность количественно-гистохимических (в отличие от биохимических) методов исследования заключается в возможности изучения концентрации и содержания химических компонентов в конкретных структурах клеток и тканей.

К таким методам относятся следующие количественные методы:

Цитоспектрофотометрия – метод количественного изучения внутриклеточных веществ по их абсорбционным спектрам.

Цитоспектрофлюориметрия – метод количественного изучения внутриклеточных веществ по спектрам их флюоресценции или по интенсивности флюоресценции на одной заранее выбранной волне (цитофлюориметрия).

Современные микроскопы — цитофлюориметры позволяют обнаружить в различных структурах малые количества вещества (до 1014—10~16 г) и оценить локализацию исследуемых веществ в микроструктурах.

Интерферометрия. Этот метод позволяет оценить сухую массу и концентрацию плотных веществ в живой и фиксированной клетках. С помощью этого метода, например, можно установить суммарное содержание белков в живых и фиксированных клетках.

19. Какие методы анализа изображения клеточных и тканевых структур Вы знаете?

Полученные изображения микрообъектов в микроскопе, на телевизионном экране дисплея, на электронных микрофотографиях могут подвергаться специальному анализу — выявлению морфометрических, денситометрических параметров и их статистической обработке.

Таким образом, применение новых методов исследований в гистологии, цитологии и эмбриологии позволяет выяснить общие закономерности организации тканей и клеток, структурные основы биохимических процессов, определяющих функцию конкретных структурных компонентов клетки.