- •Шаронова н.Л., Пахомова в.М., Бунтукова е.К. Экология почвенной микробиоты и диагностика почв
- •Содержание
- •Глава 5. Влияние сельскохозяйственного использования почв на почвенную микробиоту 107
- •Глава 6. Влияние антропогенной деградации биоценозов на почвенную микробиоту 167
- •Введение
- •Глава 1. Общие представления о почвенной микробиоте
- •Почвенные водоросли
- •Почвенные животные
- •Простейшие
- •Коловратки
- •Нематоды
- •Тихоходки
- •Членистоногие
- •Почвенные грибы
- •Прокариоты
- •Цианобактерии
- •Протеобактерии
- •Спирохеты
- •Цитофаги
- •Грамположительные бактерии
- •Микоплазмы
- •Архебактерии
- •Глава 2. Специфика почвы как среды обитания микроорганизмов
- •Твердая фаза почвы
- •Жидкая фаза почвы
- •Газовая фаза почвы
- •Концентрация ионов водорода
- •Окислительно-восстановительные условия
- •Температура
- •Глава 3. Основные принципы биологической индикации и диагностики почв
- •Ботаническая и зоологическая биоиндикация и диагностика почв
- •Почвенно-альгологическая индикация
- •Микробиологическая диагностика и биологическая активность почв
- •Биологическая индикация загрязнения почвенной среды и самоочищения почв
- •Глава 4. Влияние промышленного загрязнения на почвенную микробиоту
- •Загрязнение тяжелыми металлами
- •Концепция предельно допустимых концентраций (пдк) тяжелых металлов в почве
- •Влияние тяжелых металлов на микроорганизмы в почве
- •Микробиологическое нормирование загрязнения почв тяжелыми металлами
- •Радиоактивное загрязнение
- •Загрязнение нефтью и нефтепродуктами
- •Влияние углеводородного загрязнения почв на показатели комплекса микромицетов
- •Влияние загрязнения углеводородами на водоросли
- •Биодеградация нефти в почве
- •Воздействие кислых дождей
- •Глава 5. Влияние сельскохозяйственного использования почв на почвенную микробиоту
- •Микробиологические аспекты загрязнения почв пестицидами
- •Влияние пестицидов на почвенные микроорганизмы
- •Микробиологические подходы к оценке действия пестицидов
- •Детоксикация пестицидов в почве
- •Влияние внесения минеральных удобрений
- •Влияние минеральных удобрений на общую численность и биомассу микроорганизмов в почве
- •Влияние минеральных удобрений на численность различных физиологических групп микроорганизмов и активность процессов азотфиксации и денитрификации в почве
- •Минеральные удобрения как фактор воздействия на видовой состав почвенных микроорганизмов и устойчивость микробных систем почв к удобрениям
- •Оценка устойчивости микробных систем различных почв к воздействию минеральных удобрений
- •Влияние длительного применения минеральных удобрений на микробную систему почв
- •Влияние эрозионных процессов
- •Глава 6. Влияние антропогенной деградации биоценозов на почвенную микробиоту
- •Влияние рекреационной и пастбищной дегрессии почв на микроорганизмы
- •Влияние рубки леса на микроорганизмы
- •Лабораторный практикум работа 1. Определение численности микроорганизмов различных физиологических групп в почве
- •1. Приготовление плотных и жидких питательных сред для выявления разных физиологических групп микроорганизмов
- •Ход работы
- •2. Выявление групп микроорганизмов методом обрастания комочков почвы
- •3. Взятие средней почвенной пробы и подготовка образца к микробиологическому анализу
- •4. Приготовление почвенной суспензии
- •Учет различных групп микроорганизмов
- •Материалы и оборудование
- •Работа 2. Исследование реакции микроорганизмов на факторы внешней среды
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 3. Исследование микробиоценозов почвы и определение ее биологической активности
- •1. Исследование микробоценозов почвы методом обрастания стекол по Холодному - Росси Ход работы
- •2. Определение биологической активности почвы по интенсивности разложения полотна методом Мишустина – Вострова - Петровой Ход работы
- •3. Определение биологической активности почвы по интенсивности разложения целлофановых мембран методом Гузева – Иванова - Левина Ход работы
- •4. Определение изменений в инициированном микробном сообществе Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 4. Выявление ризосферной и корневой (ризопланы) микрофлоры методом теппер
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 5. Исследование свободноживущих и симбиотических азотфиксирующих бактерий
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 6. Исследование азотфиксирующей активности ацетиленовым методом в лабораторных условиях
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 7. Определение мобилизуемых запасов фосфора и калия в почве по методу буткевича
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 8. Определение токсичности водных экстрактов почвы и индивидуальных соединений с использованием в качестве тест-объекта бактерий pseudomonas putida
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 9. Определение общей микробной биомассы в почве
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 10. Определение ферментативной активности почвы
- •1. Газометрический метод определения активности каталазы в почве
- •Ход работы
- •2. Определение активности дегидрогеназы в почве
- •Ход работы
- •3. Определение активности инвертазы в почве
- •Ход работы
- •4. Определение активности уреазы в почве
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Приложение
- •Глоссарий
- •Список использованной и рекомендованной литературы
Биологическая индикация загрязнения почвенной среды и самоочищения почв
Показатели, характеризующие состояние почвенной биоты и биологическую активность почв, используют для контроля за теми изменениями в почвах, которые происходят при включении о них разного рода посторонних веществ, чаще всего антропогенного происхождения. Обычно для получения более точных результатов необходимо исследовать также контрольную чистую почву. Различают следующие типы химических загрязнений: нефтепродуктами (углеводородами), тяжелыми металлами, радионуклидами, пестицидами, избыточными или загрязненными минеральными удобрениями, искусственными полимерами, различными отходами химических производств, в том числе и отравляющими газами и многочисленными мутагенами. Иногда происходит загрязнение почв посторонними микроорганизмами особенно и сточных вод или микробиологических производств.
Глава 4. Влияние промышленного загрязнения на почвенную микробиоту
По словам Одума Ю. (1975): «Загрязнение – нежелательное изменение физических, химических, биологических характеристик воздуха, воды, почвы, которое может оказывать неблагоприятное влияние на жизнь человека, нужных ему растений и животных, на разного рода производственные процессы, условия жизни, истощать и портить его сырьевые ресурсы. Количество поллютантов и масштабы загрязнения увеличиваются как в связи с ростом самого населения, так и в связи с ростом его материальных потребностей. Явление загрязнения не ограничивается индустриально развитыми странами, и давно уже приняло глобальный характер за счет переноса загрязняющих веществ в биосфере.
В зависимости от уровня экономического развития характер загрязнения в разных регионах мира различается: если для промышленно развитых стран характерно наличие химического загрязнения, то для слабо развитых государств более характерно органическое загрязнение, которое дополняется глобальным загрязнением воздуха и воды, связанным с развитыми странами. Промышленное загрязнение связано с попаданием в природную среду радиоактивных веществ, выбросами газов, загрязнением тяжелыми металлами, нефтью и т.д.
Учитывая разнообразие типов биоценозов, почвенного покрова, специфики протекания почвенных процессов, можно представить насколько разнообразны последствия загрязнений в биосфере.
Загрязнение тяжелыми металлами
К тяжелым металлам (ТМ) относят более 40 химических элементов периодической системы Д.И. Менделеева, масса атомов которых составляет свыше 50 атомных единиц массы (а. е. м.). Это Pb, Zn, Cd, Hg, Cu, Mo, Mn, Ni, Sn, Co и др. Сложившееся понятие «тяжелые металлы» не является строгим, т.к. к ТМ часто относят элементы-неметаллы, например As, Se, а иногда даже F, Be и другие элементы, атомная масса которых меньше 50 а.е.м.
Среди ТМ много микроэлементов, биологически важных для живых организмов. Они являются необходимыми и незаменимыми компонентами биокатализаторов и биорегуляторов важнейших физиологических процессов. Однако избыточное содержание ТМ в различных объектах биосферы оказывает угнетающее и даже токсическое действие на живые организмы.
Источники поступления ТМ в почву делятся на природные (выветривание горных пород и минералов, эрозионные процессы, вулканическая деятельность) и техногенные (добыча и переработка полезных ископаемых, сжигание топлива, влияние автотранспорта, сельского хозяйства и т.д.) Сельскохозяйственные земли, помимо загрязнения через атмосферу, загрязняются ТМ еще и специфически, при применении пестицидов, минеральных и органических удобрений, известковании, использовании сточных вод. В последнее время, особое внимание ученые уделяют городским почвам. Последние испытывают значительный техногенный пресс, составной частью которого является загрязнение ТМ.
В табл. 4, 5 представлено распределение ТМ в различных объектах биосферы и источники поступления ТМ в окружающую среду.
На поверхность почвы ТМ поступают в различных формах. Это оксиды и различные соли металлов, как растворимые, так и практически нерастворимые в воде (сульфиды, сульфаты, арсениты и др.). В составе выбросов предприятий по переработке руды и предприятий цветной металлургии — основного источника загрязнения окружающей среды ТМ — основная масса металлов (70-90 %) находится в форме оксидов.
Попадая на поверхность почв, ТМ могут либо накапливаться, либо рассеиваться в зависимости от характера геохимических барьеров, свойственных данной территории.
Таблица. 4.
Содержание ТМ в различных объектах биосферы, мг/кг сухой массы
(по Войткевичу с соавт., 1990; по Торшину с соавт., 1990)
Элемент |
Почвы |
Пресные воды |
Морские воды |
Растения |
Животные (в мышечной ткани) |
Mn |
1000 (20-10000) |
0,008 |
0,0002 |
0,3-1000 |
0,2-2,3 |
Zn |
90 (1-900) |
0,015 |
0,0049 |
1,4-600 |
240 |
Cu |
30 (2-250) |
0,003 |
0,00025 |
4-25 |
10 |
Co |
8 (0,05-65) |
0,0002 |
0,00002 |
0,01-4,6 |
0,005-1 |
Pb |
35 (2-300) |
0,003 |
0,00003 |
0,2-20 |
0,23-3,3 |
Cd |
0,35 (0,01-2) |
0,0001 |
- |
0,05-0,9 |
0,14-3,2 |
Hg |
0,06 |
0,0001 |
0,00003 |
0,005-0,02 |
0,02-0,7 |
As |
6 |
0,0005 |
0,0037 |
0,02-7 |
0,007-0,09 |
Se |
0,4 (0,01-12) |
0,0002 |
00,0002 |
0,001-0,5 |
0,42-1,9 |
F |
200 |
0,1 |
1,3 |
0,02-24 |
0,05 |
B |
20 (2-270) |
0,15 |
4,44 |
8-200 |
0,33-1 |
Mo |
1,2 (0,1-40) |
0,0005 |
0,01 |
0,03-5 |
0,02-0,07 |
Cr |
70 (5-1500) |
0,001 |
0,0003 |
0,016-14 |
0,002-0,84 |
Ni |
50 (2-750) |
0,0005 |
0,00058 |
0,02-4 |
1-2 |
Таблица 5.
Источники поступления ТМ в окружающую среду
(Вредные химические вещества, 1988)
Элемент |
Естественное загрязнение |
Техногенное загрязнение |
As |
Извержение вулканов, ветровая эрозия. |
Добыча и переработка мышьяксодержащих руд и минералов, пирометаллургия и получение серной кислоты, суперфосфата; сжигание каменного угля, нефти, торфа, сланцев; синтез и использование мышьяксодержащих ядохимикатов, препаратов, антисептиков. |
Se |
Сульфидные месторождения, в которых селен изоморфно замещает серу. Вулканическая деятельность. Выпадение с атмосферными осадками. |
Обогащение руд, производство серной кислоты, сжигание угля |
B |
Входит в состав многих минералов. |
Сточные воды производств: металлургического, машиностроительного, текстильного, стекольного, керамического, кожевенного, а также бытовые сточные воды, насыщенные стиральными порошками. Разработка борсодержащих руд, внесение удобрений |
F |
Широко распространен в природе, составляя примерно 0,08% земной коры. Входит в состав свыше 1000 минералов. Фтороводородом богаты вулканические газы. |
Электростанции, работающие на угле, производство алюминия и суперфосфатных удобрений. |
Cr |
В элементарном состоянии в природе не встречается. В виде хромита входит в состав земной коры. |
Выбросы предприятий, где добывают, получают и перерабатывают хром. |
Со |
Известно более 100 кобальтсодержащих минералов. |
Сжигание в процессе промышленного производства природных и топливных материалов. |
Мо |
Входит в состав многих минералов. |
Металлургический процесс переработки и обогащения руд, фосфорные удобрения, производство цемента, выбросы ТЭС. |
Ni |
Входит в состав 53 минералов. |
Выбросы предприятий горнорудной промышленности, цветной металлургии, машиностроительные, металлообрабатывающие, химические предприятия, транспорт, ТЭС. |
Cu |
Общие мировые запасы меди в рудах оценивают 465 млн.т. Входит в состав минералов Самородная образуется в зоне окисления сульфидных месторождений. Вулканические и осадочные породы. |
Предприятия цветной металлургии, транспорт, удобрения и пестициды, процессы сварки, гальванизации, сжигание углеводородных топлив. |
Zn |
Относиться к группе рассеянных элементов. Широко распространен во всех геосферах. Входит в состав 64 минералов |
Высокотемпературные технологические процессы, Потери при транспортировке, сжигание каменного угля. (Ежегодно с атм. осадками на 1 км2 поверхности Земли выпадает 72 кг цинка, что в 3 раза больше, чем свинца и в 12 раз больше, чем меди (Дмитриев, Тарасова) |
Cd |
Относится к редким рассеянным элементам: содержится в виде изоморфной примеси во многих минералах и всегда в минералах цинка. |
Локальное загрязнение – выбросы промышленных комплексов, загрязнение различной степени мощности это тепловые энергетические установки, моторы, минеральные удобрения, табачный дым |
Hg |
Рассеянный элемент, концентрируется в сульфидных рудах. Небольшое количество встречается в самородном виде (Из 1 м3 дождевой воды на Землю выпадает всего 200 мкг, что в 15-20 раз больше, чем ее добывает человечество.) |
Процесс пирометаллургического получения металла, а также все процессы, в которых используется ртуть. Сжигание любого органического топлива (нефть, уголь, торф, газ, древесина) металлургические производства, термические процессы с нерудными материалами. Потери на предприятиях по производству хлора, каустической соды. При сжигании мусора, сточные воды. |
Pb |
Содержится в земной коре, входит в состав минералов. В окружающую среду поступает в виде силикатной пыли почвы, вулканического дыма, испарений лесов, морских солевых аэрозолей и метеоритной пыли. |
Выбросы продуктов, образующихся при высокотемпературных технологических процессах, выхлопные газы, сточные воды, добыча и переработка металла, транспортировка, истирание и рассеивание его во время работы машин и механизмов. |
Большая часть ТМ, поступивших на поверхность почвы, закрепляется в верхних гумусовых горизонтах. ТМ сорбируются на поверхности почвенных частиц, связываются с органическим веществом почвы, в частности в виде элементно-органических соединений, аккумулируются в гидроксидах железа, входят в состав кристаллических решеток глинистых минералов, дают собственные минералы в результате изоморфного замещения, находятся в растворимом состоянии в почвенной влаге и газообразном состоянии в почвенном воздухе, являются составной частью почвенной биоты.
Степень подвижности ТМ зависит от геохимической обстановки и уровня техногенного воздействия. Тяжелый гранулометрический состав и высокое содержание органического вещества приводят к связыванию ТМ почвой. Рост значений рН усиливает сорбированность катионообразующих металлов (медь, цинк, никель, ртуть, свинец и др.) и увеличивает подвижность анионообразующих (молибден, хром, ванадий и пр.). Усиление окислительных условий увеличивает миграционную способность металлов. В итоге по способности связывать большинство ТМ, почвы образуют следующий ряд: серозем > чернозем > дерново-подзолистая почва.
Загрязнение почв ТМ имеет сразу две отрицательные стороны. Во-первых, поступая по пищевым цепям из почвы в растения, а оттуда в организм животных и человека, ТМ вызывают у них серьезные заболевания. Росту заболеваемости населения и сокращению продолжительности жизни, а также к снижению количества и качества урожаев сельскохозяйственных растений и животноводческой продукции. Во-вторых, накапливаясь в почве в больших количествах, ТМ способны изменять многие ее свойства. Прежде всего, изменения затрагивают биологические свойства почвы. Сильное загрязнение ТМ приводит к изменению и более консервативных признаков почвы, таких как гумусное состояние, структура, pH среды и др. Результатом этого является частичная, а в ряде случаев и полная утрата почвенного плодородия.
В природе встречаются территории с недостаточным или избыточным содержанием в почвах ТМ. Аномальное содержание ТМ в почвах обусловлено двумя группами причин: биогеохимическими особенностями экосистем и влиянием техногенных потоков вещества. В первом случае, районы, где концентрация химических элементов выше или ниже оптимального для живых организмов уровня, называются природными геохимическими аномалиями или биогеохимическими провинциями. Здесь аномальное содержание элементов обусловлено естественными причинами – особенностями почвообразующих пород, почвообразовательного процесса, присутствием рудных аномалий. Во втором случае, территории называются техногенными геохимическими аномалиями. В зависимости от масштаба они делятся на глобальные, региональные и локальные.
Механизм токсического действия ТМ представлен в табл. 6. Токсическое воздействие ТМ на биологические системы в первую очередь обусловлено тем, что они легко связываются с сульфгидрильными группами белков (в том числе и ферментов), подавляя их синтез и, тем самым, нарушая обмен веществ в организме.
Живые организмы выработали разнообразные механизмы устойчивости к ТМ: от восстановления ионов ТМ в менее токсичные соединения до активации систем ионного транспорта, осуществляющих эффективное и специфическое удаление токсических ионов из клетки во внешнюю среду.
Таблица 6.
Механизм действия токсичности ТМ (по Торшину с соавт., 1990)
Элемент |
Действие |
As |
Перевод в нерастворимое неактивное состояние многих метаболитов |
Se |
Замещение антиметаболитами S |
As |
PO4 |
Cu, Zn, Cd, Hg, Pb, B |
Влияние на проницаемость мембран, реакция с SH — группами цистеина и метионина |
Pb |
Изменение трехмерной структуры белков |
Cu, Zn, Hg, Ni |
Образование комплексов с фосфолипидами |
Ni |
Образование комплексов с альбуминами |
F |
Ингибирование ферментов: зависящих от присутствия Mg, энолазы; |
As |
пируватдегидрогеназы; |
Hg2+ |
щелочной фосфатазы, глюко-6-фосфотазы, лактатдегидрогеназы; |
Cd2+ |
аденозинтрифосфотазы, алкогольдегидрогеназы, амилазы, карбоангидразы, карбоксипептидазы (пентидазы), глутаматоксалоацетаттранаминазы; |
Pb2+ |
ацетилхолинэстеразы, щелочной фосфатазы, АТФазы |
Ni2+ |
карбоангидразы, цитохромоксидазы, бензопиренгидроксилазы |
Устойчивость живых организмов, прежде всего растений, к повышенным концентрациям ТМ и их способность накапливать высокие концентрации металлов могут представлять большую опасность для здоровья людей, поскольку допускают проникновение загрязняющих веществ в пищевые цепи.
В зависимости от геохимических условий производства пища человека как растительного, так и животного происхождения может удовлетворять потребности человека в минеральных элементах, быть дефицитной или содержать превышающее их количество, становясь более токсичной, вызывая заболевания и даже смерть.
Разные ТМ представляют опасность для здоровья человека в различной степени. Наиболее опасными являются Hg, Cd, Pb, табл. 7.
Почва, в отличие от других компонентов природной среды, не только геохимически аккумулирует компоненты загрязнений, но и выступает как природный буфер, контролирующий перенос химических элементов и соединений в атмосферу, гидросферу и живое вещество.
Таблица 7.
Классы загрязняющих веществ по степени их опасности
(ГОСТ 17.4.1.02-83)
№ |
Класс |
Элемент |
I |
высоко опасные |
Hg, Cd, Pb, Zn, As, Se, F |
II |
умеренно опасные |
Cu, Co, Ni, Mo, Cr, B, Sb |
III |
мало опасные |
V, W, Mn, Sr, Ba |
Актуальность проблемы воздействия тяжелых металлов на почвенные микроорганизмы определяется тем, что именно в почве сосредоточена большая часть всех процессов минерализации органических остатков, обеспечивающих сопряжение биологического и геологического круговоротов. Почва является экологическим узлом связей биосферы, в котором наиболее интенсивно протекает взаимодействие живой и неживой материи. На почве замыкаются процессы обмена веществ между земной корой, гидросферой, атмосферой, обитающими на суше организмами, важное место среди которых занимают почвенные микроорганизмы. Наиболее важными для почвенной микробиологии являются так называемые потенциально токсичные и относительно легко доступные элементы - Ni, Сu, РЬ, Cd, Zn, Hg.
Проблема взаимодействия тяжелых металлов и микроорганизмов исследуется в нескольких главных направлениях. Это вопросы, связанные с изучением изменений различных биохимических, физиологических, генетических и других особенностей микроорганизмов при их контакте с металлами в условиях чистой культуры. При исследовании аккумуляции тяжелых металлов микроорганизмами установлены способы проникновения и места локализации этих элементов в клетках, влияние физиологических параметров культуры и внешних условий на накопление металлов микроорганизмами. Токсическое действие металлов на микроорганизм проявляется в ингибировании их метаболизма, в изменениях кинетики роста и морфологии. В качестве механизмов, обеспечивающих устойчивость микроорганизмов к действию тяжелых металлов, отмечают биологическую трансформацию и частичную детоксикацию некоторых из них. Часто эти механизмы являются генетически обусловленными.
Другой круг вопросов, представляющих интерес для биогеохимии и биотехнологии, группируется вокруг проблемы выщелачивания металлов из руд, горных пород и промышленных отвалов с использованием микроорганизмов.
Наконец, в ряду важнейших стоит проблема нарушения и охраны окружающей среды от загрязнения тяжелыми металлами. В этой области исследований выделяются вопросы диагностики и индикации загрязнения почвы тяжелыми металлами, а также проблема нормирования техногенной нагрузки на почву вообще и почвенную микробиоту в частности.
