6. Идентификация чистых культур по совокупности свойств.

Определение вида возбудителя по его биохимическим свойствам называется биохимической идентификацией.

Для исследования способности бактерий расщеплять белки (протеолитические свойства) используют молоко или среду с желатином. Протеолиз в молоке выражается растворением сгустка казеина, который образован бактериями, которые свертывают молоко.

Среды с желатином готовят на мясной воде, добавляя 1 % пептону, 0,5 % хлориду натрия и 10-20 % желатину. Протеолиз проявляется разжижением столбика среды. Поскольку некоторые виды бактерий отличаются по особенностям разжижения желатина, этот признак можно учитывать при их идентификации.

Пептолитические свойства (способность расщеплять пептоны – продукты неполного гидролиза белка) обнаруживают с помощью МПБ и пептонной воды. Их засевают микроорганизмами, а затем определяют образование конечных продуктов – аммиака, сероводорода и индола.

В микробиологической практике широко используются дифференциально диагностические среды Ендо, Левина, Плоскирева, среды Гисса.

За последние годы в практике микробиологических лабораторий начали использовать специальные тест-системы для определения разнообразных свойств бактерий: “Roche”, “API”, “Enterotest”, пластины и диски индикаторные биохимические. Они удобны для пользования, надежные, позволяют определять 12-20 и больше разнообразных признаков, значительно облегчить идентификацию микробов.

Гемолитическая активность микроорганизмов является одним из самых существенных признаков их вирулентности, потому ее определение стало рутинной процедурой любой специализированной лаборатории. С этой целью используют кровяной МПА

Редуцирующие свойства изучают, добавляя в состав сред красители (метиленовий синий, например), которые способны возобновляться. Фиксируя время изменения цвета индикатора, можно судить о степени выражение редуцирующей активности.

Декарбоксилазную активность бактерий оценивают на специальных средах с аминокислотами (лизином, орнитином, глютаминовой кислотой и др.) и соответствующими индикаторами.

18. Стерилизация. Методы нетепловой физической стерилизации.

1. Понятие «стерилизация».

Стерилизация - это комплекс мероприятий, направленных на уничтожение вегетативных и споровых форм патогенных и непатогенных микроорганизмов на изделиях медицинского назначения.

2. Стерилизация фильтрованием, механизм. Аппаратура, стерилизуемый материал.

Фильтрование относится к механическим факторам, влияющим на микроорганизмы. Для этого используются бактериальные фильтры. Бактериальные фильтры задерживают микроорганизмы и их споры, так как размеры пор на фильтрах меньше, чем размеры микроорганизмов. Фильтрование используют для стерилизации жидких материалов, не выдерживающих нагревание. Фильтрование можно также использовать для получения токсинов, фагов и других продуктов жизнедеятельности микроорганизмов.

Аппаратура:асбестовые и мембранные фильтры, воронки Зейтца, специальные колбы, вакуумный насос. Мембранный фильтр стерилизуют кипячением, вставляют в стерильную воронку Зейтца, а воронку – в колбу, присоединенную к вакуумному насосу. Фильтрование производят при помощи насоса. Систему с асбестовым фильтром предварительно стерилизуют в автоклаве.

Стерилизуемый материал: сыворотка крови, антибиотики, растворы гормонов, витаминов, ферментов.

Недостаток этого метода в том, что он не освобождает стерилизуемый материал от вирусов.