- •Предмет и задачи биохимии
- •Аминокислоты, классификация и состав
- •Биологическая роль белков
- •Физико-химические свойства белков
- •Ферменты. Классификация и химия ферментов.
- •Свойства ферментов
- •Механизм действия ферментов
- •Кинетика ферментативной реакции
- •Значение ферментов в медицине
- •Нуклеиновые кислоты
- •Классификация нуклеиновых кислот
- •Углеводы
- •Качественные реакции на углеводы
- •Восстанавливающие и невосстанавливающие углеводы
- •Простые липиды
- •Сложные липиды
- •Обмен энергии
- •III этап представляет собой полное окисление ацетил-Ко а в цикле Кребса с образованием углекислого газа и освобождением водорода.
- •Обмен простых белков
- •Промежуточный обмен аминокислот в организме. Общие пути обмена.
- •Конечные продукты распада аминокислот
- •Обмен сложных белков. Обмен нуклеопротеидов.
- •Обмен хромопротеидов
- •Белки сыворотки, плазмы, спинномозговой жидкости
- •Электрофорез
- •Клинико-диагностическое значение исследования протеинограмм
- •Показатели азотистого обмена
- •Креатинин
- •Порядок проведения пробы Реберга-Тареева
- •Мочевина
- •Мочевая кислота
- •Желчные пигменты. Обмен желчных пигментов в норме
- •Гемоглобин
- •Производные гемоглобина
- •Биосинтез белка
- •Специфические белки
- •Орозомукоид (кислый альфа-гликопротеин)
- •Иммуноферментный анализ (ифа)
- •Твердофазный иммуноферментный анализ
- •Исследование общего белка
- •Определение белка в суточной моче
- •Электрофорез белков
- •Виды диспротеинемий
- •Генетические дефекты синтеза белков
- •Парапротеинемия
- •Основные требования к процессу проведения электрофореза
- •Подготовка электрофореграмм к учету результатов способами денситометрии и фотометрии
- •Мочевина — главная составляющая фракции остаточного азота
- •Проба Реберга
- •Алгоритм определения
- •Качественное обнаружение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови
- •Билирубин «прямой» (конъюгированный) в сыворотке крови
- •Основные пути распада углеводов
- •Глюконеогенез
- •Контрольные вопросы
- •Регуляция углеводного обмена
- •Патология обмена углеводов
- •Обмен липидов. Переваривание и всасывание
- •Распад и синтез триглицеридов
- •Окисление вжк
Белки сыворотки, плазмы, спинномозговой жидкости
Концентрация общего белка в сыворотке зависит от синтеза и распада альбумина и глобулина. Остальные белки сыворотки не оказывают существенного воздействия на концентрацию общего белка из-за их малого количества. Альбумины синтезируются в печени, глобулины — в лимфоцитах. Распад белков плазмы происходит во всех тканях пропорционально их метаболической активности. Белки сыворотки поддерживают объем крови, создавая онкотическое давление, транспортируют вещества, обеспечивают иммунологическую сопротивляемость и воспалительную реакцию (глобулины), выполняют много других функций как гормоны, ферменты, биологически активные вещества, регуляторы энзимов.
Нормальные показатели общего белка в сыворотке крови, г/л:
Кровь из пуповины 48-80
Недоношенные 36-60
Новорожденные 46-70
1 неделя 44-76
Дети до 1 года 51-73
Дети до 2 лет 56-75
Дети старше 2 лет 60-83
Взрослые 64-83
Нормальные показатели общего белка в спинномозговой жидкости, г/л:
1-30 дней 0,20-1,50
1-3 месяца 0,20-1,00
3-6 месяцев 0,15-0,50
0,5-10 лет 0,10-0,30
10-40 лет 0,15-0,45
40-50 лет 0,20-0,50
50-60 лет 0,25-0,55
больше 60 лет 0,30-0,60
Гипопротеинемия — снижение общего количества белка в сыворотке крови. Причины:
Снижение процесса биосинтеза белков крови в печени
Недостаток поступления белка пищи
Потеря белка организмом.
Гиперпротеинемия — повышение общего количества белка в сыворотке крови. Причины:
Сгущение крови из-за потери жидкости
За счет усиления синтеза иммуноглобулинов при хронических инфекционных заболеваниях.
Появление патологических белков.
Электрофорез
Электрофорез — процесс передвижения заряженных частиц под действием электрического поля.
Разделение белков основано на различной скорости перемещения белков в электрическом поле в зависимости от знака и величины электрического заряда и молекулярной массы белка.
Существуют высокоэффективные разновидности электрофореза: диск-электрофорез в полиакриламидном геле, электрофорез в крахмальном блоке, иммуноэлекрофорез.
Самым простым по технике выполнения является электрофорез на хроматографической бумаге, ацетатцеллюлозной пленке, посредством которых можно разделить белки сыворотки крови на пять основных фракций.
Название белковых фракций |
Молекулярная масса (средняя) |
Содержание фракций от общего белка |
|
% |
Концентрация, г/л |
||
Альбумины |
67000 |
55-65 |
42-51 |
Альфа-1-глобулины |
55000 |
3,0-5,0 |
2,0-5,0 |
Альфа-2-глобулины |
150000 |
6,0-10,0 |
4,0-7,0 |
Бета-глобулины |
75000 |
9,0-12,0 |
5,0-9,0 |
Гамма-глобулины |
160000 |
12-20 |
8,0-17 |
При проведении электрофореза для выявления белковых фракций используют красители (индикаторы), которые связываются с белками. К ним относятся бромфеноловый синий, амидошварц, пунцовый красный, азокармин и т. д.
Разделение белков сыворотки крови электрофорезом осуществляют при комнатной температуре.
Оптимальное время электрофореза подбирается опытным путем. Обычно при электрофорезе на ацетатцеллюлозной пленке время составляет 30-40 минут.
Содержание белковых фракций определяется по электрофореграммам (протеинограммам) фотометрическим или с использованием денситометрии.
Денситометр — прибор, позволяющий записывать (сканировать) картину разделения фракций белков в отраженном или проходящем мнохроматическом световом потоке.