Педиатрические аспекты темы

1. Возрастные особенности иммунологической реактивности. Динамика антителообразования в развивающемся организме.

2. Иммунологические взаимоотношения в системе мать – плод. Изо­антигены эритроцитов АВО. Резус-антиген и его значение в патологии беременности.

Тема 15. Учение об иммунитете. Клетки иммунной системы. Иммунный статус организма человека и методы его оценки. Современные иммунологические методы Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

1. Иммунная система организма человека. Центральные и периферические органы иммунной системы.

2. Клетки иммунной системы и их характеристика. Популяции и субпопуляции лимфоцитов, их характеристика.

3. Формы иммунного ответа.

4. Межклеточная кооперация в иммунном ответе.

5. Цитокины (монокины, лимфокины, интерлейкины, интерфероны, колониестимулирующие факторы) и их свойства. Сеть цитокиновых взаимодействий.

6. Клиническая иммунология и ее задачи.

7. Методы оценки иммунного статуса организма человека.

8. Реакция иммунофлюоресценции (прямая и непрямая) и ее практическое применение.

9. Радиоиммунный и иммуноферментные методы, их сущность и практическое использование. Иммуноблотинг.

Информация к занятию Серологический метод исследования. Методы оценки иммунного статуса организма человека. Иммуномодуляторы

Иммуноферментный анализ (ИФА) обладает высокой чувствительностью и специфичностью, применяясь наиболее часто для определения антител. Известный антиген адсорбируется на поверхности лунок полистироловой пластины, в которые затем вносят двукратные разведения исследуемой сыворотки. Планшеты инкубируют при 37⁰ С в течение 1 часа, отмывают и вносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом (пероксидаза хрена). После инкубации в термостате при 37⁰ в течение 1 часа планшет вновь промывают и во все лунки вносят пероксид водорода, а также индикатор – ортофенилендиамин. В случае положительной реакции пероксидаза в составе комплекса антиген-антитело вызовет разложение пероксида водорода с изменением цвета реакционной смеси со светло-желтого на красно-коричневый. Интенсивность окрашивания зависит от уровня антител в исследуемой сыворотке и может быть измерена на вертикальном спектрофотометре. ИФА сопровождается постановкой контролей с заведомо положительной и отрицательной эталонными сыворотками. Учет реакции осуществляется с помощью специального иммуноферментного анализатора – вертикального спектрофотометра (рис.40, см. приложение).

Радиоиммунный анализ (РИА). Сущность РИА сходна с ИФА, однако сыворотку про­тив иммуноглобулинов человека метят не ферментом, а радионуклидом (Н³- тритием, С¹⁴, I¹²⁵, и т.д.). Результаты реакции учитывают с помощью β и γ анализаторов.

Иммунофлюоресцентный метод (ИФМ). Антитела против антигенов вирусов и бактерий метят флюоресцирующим веществом (чаще всего изотиоцианатом флюоресцеина). Готовят микропрепараты на предметных стеклах из материала от больного (смыв из носоглотки, отделяемое бубона, мазки-отпечатки из трупного материала и т. д.) и обрабатывают их флюоресцирующей сывороткой. Если в микропрепаратах имеются антигены, соответствующие антителам флюоресцирующей сыворотки, то антитела соединяются с ними и образовавшиеся комплексы будут светиться при люминесцентной микроскопии. Эта модификация ИФМ называется прямой. При непрямом ИФМ микропрепарат обрабатывают сначала обычной сывороткой против определенного антигена, а затем - антиглобулиновой флюоресцирующей сывороткой. Метод иммунофлюоресценции широко применяется для диагностики различных инфекций, в частности, гриппа, острых респираторных вирусных заболеваний, сифилиса и т.д.