Государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«ЯРОСЛАВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ»

Министерства здравоохранения и социального развития

Российской Федерации

Рекомендуется Учебно-методическим объединением

по медицинскому и фармацевтическому образованию вузов России

в качестве учебного пособия для студентов медицинских вузов

Зам. Председателя УМО

по медицинскому и фармацевтическому образованию вузов России,

проректор ММА им. И.М.Сеченова, профессор И.Н.Денисов

20.03.2003.

РУКОВОДСТВО К ПРАКТИЧЕСКИМ ЗАНЯТИЯМ

ПО ОБЩЕЙ МИКРОБИОЛОГИИ

(для студентов лечебных и педиатрических факультетов высших медицинских учебных заведений)

Издание 2, дополненное и переработанное

Под редакцией профессора В.А.Романова

Ярославль, 2011

УДК 579.61+612.017.1 (076)

ББК 52.64 Р85

Руководство к практическим занятиям по общей микробиологии (для студентов лечебных и педиатрических факультетов высших медицинских учебных заведений). Ярославль, 2011 г., с. 108

Составители: Романов Виталий Александрович – доктор медицинских наук, профессор, академик РАЕ, Почетный работник высшего профессионального образования РФ, заведующий кафедрой микробиологии с вирусологией и иммунологией ГБОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России, Малафеева Эльвира Васильевна, доктор медицинских наук, академик РАЕ, профессор кафедры микробиологии с вирусологией и иммунологией ГБОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России

Достижения современной микробиологии, иммунологии и вирусологии имеют не только фундаментальное, но и важное практическое значение. Прогресс науки в этих областях определил разработку и внедрение новых методов диагностики, профилактики и лечения инфекционных болезней. Вместе с тем, традиционные подходы к решению указанных проблем, основанные на классических принципах микробиологии, иммунологии и вирусологии, по-прежнему верно служат практической медицине. Освоение студентами принципов общей медицинской микробиологии на современном уровне является чрезвычайно важным для последующего изучения курса частной микробиологии. Предлагаемое пособие, созданное на основе действующей программы по микробиологии, иммунологии и вирусологии для студентов лечебных, медико-профилактических и педиатрических факультетов (Москва, 2000), позволит студентам ознакомиться с методами общей микробиологии и иммунологии, а также самостоятельно освоить и выполнить ряд этих методов и приемов. Наличие перечня вопросов, знаний и умений к каждому занятию, подробное описание методов и их трактовка существенно облегчит подготовку студентов к практическим занятиям и самостоятельную работу на них.

Пособие предназначено для студентов медицинских вузов, а также может быть использо­вано при подготовке и проведении занятий аспирантами и преподавателями кафедры микробиологии и кафедр смеж­ных специальностей.

Учреждение-разработчик: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ЯРОСЛАВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Рецензенты: зав. кафедрой детских инфекционных болезней ГБОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России доктор медицинских наук, профессор И.Г.Ситников; зав. кафедрой клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России доктор медицинских наук, профессор А.А.Баранов

Рекомендовано к печати: цикловой методической комиссией по морфологическим и патоморфологическим дисциплинам ГБОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России от 28.11. 2002 (протокол № 1);

Утверждено и рекомендовано к изданию: Центрально-координационным методическим советом и Редакционно-издательским советом ГБОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России, председатель – профессор Ю.П.Троханов (протокол № 2, от 25.12.2002)

Оглавление

Темы	Содержание	Стр.
Тема 1	Морфология микроорганизмов. Микроскопический метод ис­следования микроорганизмов. Простые и сложные методы окраски бактерий ………	4
Тема 2	Морфология микроорганизмов. Структура бактериальной клетки ………	11
Тема 3	Морфология и классификация спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм и актиномицетов……………………………………………..	16
Тема 4	Физиология микробов. Асептика, антисептика, дезинфекция, стерилизация. Культивирование бактерий. Бактериологический метод исследования. Методы и этапы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий…………………………………………………………	21
Тема 5	Физиология бактерий. Дыхание и размножение бактерий. Методы культивирования аэробов и анаэробов……………………………………...	33
Тема 6	Физиология бактерий. Ферменты бактерий. Выделение чистых культур аэробных и анаэробных бактерий ………………………………………….	41
Тема 7	Ферменты бактерий. Бактериологический метод исследова­ния. Итоговое занятие по теме "Морфология и физиология микробов»………………….	47
Тема 8	Вирусы бактерий (бактериофаги) …………………………………………..	48
Тема 9	Генетика микроорганизмов ………………………………………………….	50
Тема 10	Экология микроорганизмов Микрофлора организма человека. Микробиологические основы химиотерапии инфекционных болезней …	55
Тема 11	Экология микроорганизмов. Микробиология воды, воздуха, почвы, пищевых продуктов …………………………………………………….……	62
Тема 12	Учение об инфекции. Факторы патогенности бактерий. Роль макроорганизма, внешней среды и социальных условий в развитии инфекции. Формы инфекции ………………………………………………..	72
Тема 13	Учение об иммунитете. Виды иммунитета. Неспецифическая резистентность. Серологические реакции…………………………………..	76
Тема 14	Учение об иммунитете. Серологические реакции. Антигены и их характеристика ………………………………………………………….……	83
Тема 15	Учение об иммунитете. Клетки иммунной системы. Иммунный статус организма человека и методы его оценки. Современные иммунологические методы……………………………………………………	88
Тема 16	Учение об иммунитете. Специфическая профилактика и лечение инфекционных заболеваний. Диагностические биопрепараты. Аллергены……………………………………………………………………..	95
Тема 17	Контрольное занятие по теме «Инфекция и иммунитет» (тестовый контроль и устное собеседование)………	102
	Рекомендуемая литература	102
	Приложение – цветные вкладки	103

Тема 1. Морфология микроорганизмов. Микроскопический метод ис­следования микроорганизмов. Простые и сложные методы окраски бактерий Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

1. История развития микробиологии.

2. Предмет и задачи микробиологии.

3. Правила работы в микробиологической лаборатории.

4. Устройство светового микроскопа. Правила работы с микроскопом. Сущность и техника иммерсионной микроскопии.

5. Основные морфологические формы бактерий.

6. Простые и сложные методы окраски микроорганизмов.

7. Значение медицинской микробиологии в практической деятельности врача.

Информация к занятию Этапы развития микробиологии

1. Эвристический период - ранние представления о причинах возникновения заразных болезней.

2. Морфологический период, связанный с изобретением микроскопа и открытием мира микробов А.Левенгуком.

3. Физиологический период. Открытия Л. Пастера – основоположника микробиологии. Становление и развитие микробиологии как науки. Р. Кох и значение его работ для развития медицинской бактериологии. Открытие Д.И. Ивановским вирусов и значение этого открытия для биологии и медицины.

4. Иммунологический период. Открытие Л.Пастером принципа вакцинации. Учение И.И.Мечникова о фагоцитозе как основа клеточной иммунологии. Открытие гуморальных факторов иммунитета (П.Эрлих, Э.Бе­ринг). Прогресс иммунологии во второй половине XX века (Ф. Бернет, С.Тонегава и др.).

5. Химиотерапевтический период (П. Эрлих, А. Флеминг, С.Ваксман, З.В.Ермольева).

6. Молекулярно-генетический период. Клеточная и генная инженерия, развитие биотехнологии (Д. Уотсон, Ф. Крик, М.Ниренберг, Г. Корана, Келер и Мильштейн) и микробиологической промышленности.

7. В развитие микробиологии огромный вклад внесли отечественные ученые (С.Н. Виноградский, Г.Н.Габричевский, Л.А.Тарасевич, Е.Н.Павловский, Н.Ф.Гама­лея, Л.А. Зильбер, П.Ф. Здродовский, А.А. Смородинцев, М.П. Чумаков, В.М.Жданов, О.Г.Анджапаридзе и др.).

На современном этапе своего развития микробиология, вирусология и иммунология решают важные проблемы снижения и ликвидации инфекционных болезней, улучшения экологических и санитарно-гигиенических условий, создания и применения антибактериальных, противовирусных, биологических лечебно-профилактических препаратов на основе прогресса биотехнологии и генной инженерии.

Предмет и задачи медицинской микробиологии.

Предметом медицинской микробиологии является мир невидимых невооруженным глазом живых существ – микробов (бактерий, спирохет, риккетсий, хламидий, вирусов, грибов). Задачи микробиологии: изучение свойств патогенных (болезнетворных) микробов, вызывающих у человека различные инфекционные заболевания, исследование микрофлоры организма человека и окружающей среды, разработка методов микробиологической диагностики, профилактики и лечения инфекционных заболеваний.

Организация работы и оборудование микробиологической лаборатории, правила работы в ней.

В микробиологических лабораториях лечебно-профилактических учреждений проводятся бактериологические (микроскопия, выделение чистых культур и их изучение), вирусологические и иммунологические исследования, а при наличии необходимости и соответствующих условий - эксперименты на лабораторных животных. Клинико-микробиологические лаборатории проводят микробиологическую диагностику инфекционных болезней. Лаборатории системы санитарно-эпидемиологического надзора выполняют бактериологические, вирусологические и серологические исследования материала от больных, носителей возбудителя инфекции и здоровых лиц, работающих в системе здравоохранения, торговли и общественного питания, а также исследуют бактериальную загрязненность объектов окружающей среды (воздуха, воды, почвы, продуктов питания). Специальные лаборатории контролируют безвредность и эффективность иммунобиологических препаратов (вакцин, сывороток, иммуноглобулинов, аллергенов и др.).

Микробиологическая лаборатория должна иметь следующие помещения:

1. лабораторные комнаты и боксы для работы в асепти­ческих условиях, оборудованные бактерицидными лампами;

2. помещение для стерилизации питательных сред, посуды, обеззараживания отработанного инфицированного материала;

3. комнату для мытья посуды;

4. виварий - помещение для содержания зараженных лабораторных животных.

Все помещения лаборатории должны быть обеспечены вентиляцией, водопроводом, канализацией, электроэнергией и, по возможности, газом. Стены должны быть окрашены масляной краской или покрыты кафельной плиткой, пол — линолеумом. Мебель в микробиологической лаборатории (столы, шкафы, стулья и др.) должна быть устойчива к действию влаги и дезинфицирующих веществ. Лабораторный стол покрывают материалами (линолеум, пластик), которые хорошо моются и могут подвергаться обработке дезинфицирующими растворами. На столе должны находиться спиртовка или газовая горелка, предметные и покровные стекла, вата в стеклянном сосуде, набор красителей и эмалированный кювет с мостиком для окраски препаратов, пипетки, спирт, фильтровальная бумага, штатив для пробирок и петель, бутыль с водой, дезинфицирующий раствор (3% раствор фенола).

В лаборатории должен находиться набор лабораторной посуды (пробирки бактериологические, серологические и центрифужные, чашки Петри, пипетки градуированные и пастеровские, стекла предметные и покровные, стекла предметные с лунками, воронки, цилиндры, шпатели стеклянные, ступки фарфоровые, флаконы Ру или матрацы, ампулы, кастрюли для варки питательных сред, баки для стерилизации заразного материала и т. д.), необходимые инструменты (ножницы, пинцеты, скальпели, шприцы, стерилизаторы для инструментов, водяные бани, фильтры Зейтца).

Микробиологическая лаборатория должна быть обеспечена необходимыми питательными средами (простыми, дифференциально-диагностическими, элективными), химическими реактивами (хлоридом натрия, едким натром, соляной, серной и уксусной кислотами, индикаторами для определения рН, фенолом, ацетатом свинца, щавелевой кислотой), набором углеводов и многоатомных спиртов (глюкозой, лактозой, сахарозой, мальтозой, маннитом и др.), красителями (основным и кислым фуксином, метиленовым синим, генциановым фиолетовым, везувином, красителем Романовского - Гимзы), спиртом этиловым, хлороформом, фильтровальной бумагой, марлей, маркерами по стеклу, иммерсионным маслом.