1.7 Рефрактометрия (офс 42-0040-07)
Показателем преломления (индексом рефракции) называют отношение скорости света в вакууме к скорости света в испытуемом веществе (абсолютный показатель преломления). На практике определяют так называемый относительный показатель преломления (n), который является отношением скорости света в воздухе к скорости света в испытуемом веществе.
Показатель преломления зависит от температуры и длины волны света, при которой проводят определение. В растворах показатель преломления зависит также от концентрации вещества и природы растворителя.
Рефрактометрию применяют для установления подлинности и чистоты вещества. Метод применяют также для определения концентрации вещества в растворе, которую находят по графику зависимости показателя преломления раствора от концентрации. На графике выбирают интервал концентраций, в котором наблюдается линейная зависимость между показателем преломления и концентрацией. В этом интервале концентрацию вычисляют по формуле:
X = (n - no)/F,
где: X – концентрация, в процентах;
n – показатель преломления раствора;
nо – показатель преломления растворителя при той же температуре;
F – фактор, равный величине прироста показателя преломления при увеличении концентрации на 1 % (устанавливается экспериментально).
Для определения показателя преломления применяют рефрактометры. Определение проводят при температуре (20 ± 0,5) ºС и длине волны линии D спектра натрия (589,3 нм). Показатель преломления, определенный при таких условиях, обозначается индексом .
Современные приборы откалиброваны таким образом, что отсчеты, полученные по их шкалам, соответствуют показателям преломления для D линии спектра натрия. При проведении измерений следует соблюдать указания в отношении соответствующего источника света, приведенные в инструкции к прибору. Если используют белый свет, то рефрактометр снабжен компенсирующей системой.
Цена деления термометра не должна превышать 0,5 ºС.
Обычно измерения показателя преломления проводят на рефрактометрах Аббе, в основу которых положено явление полного внутреннего отражения при прохождении светом границы раздела двух сред с разными показателями преломления. Диапазон измеряемых показателей преломления при измерении в проходящем свете 1,3-1,7. Точность измерения показателя преломления должна быть не ниже ±2×10-4.
Могут быть использованы рефрактометры других типов с такой же или большей точностью.
2.Химические методы анализа
2.1 Анизидиновое число (офс 42-0119-09)
Анизидиновым числом (IAH) называется число, определяющее содержание в испытуемом веществе (масло, твердые жиры, липиды) вторичных продуктов окисления (альдегидов, кетонов), равное увеличенной в 100 раз оптической плотности, измеренной в кювете с толщиной слоя 1 см раствора, содержащего 1 г испытуемого вещества в 100 мл смеси растворителей после реакции с п-анизидином в условиях стандартизованной методики.
Операции с растворами проводят быстро, избегая воздействия яркого света.
Испытуемый раствор А. Если не указано иначе в частной фармакопейной статье, навеску 0,500 г испытуемого вещества помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в триметилпентане, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.
Испытуемый раствор Б. К 5,0 мл испытуемого раствора А прибавляют 1,0 мл 0,25 % раствора п-анизидина в уксусной кислоте ледяной и встряхивают.
Раствор сравнения. К 5,0 мл триметилпентана прибавляют 1,0 мл 0,25 % раствора п-анизидина в уксусной кислоте ледяной и встряхивают.
Методика. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора А в максимуме поглощения при длине волны 350 нм относительно триметилпентана. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора Б в максимуме поглощения при длине волны 350 нм ровно через 10 мин после его приготовления относительно раствора сравнения.
Анизидиновое число рассчитывают по формуле:
,
где: А1 – оптическая плотность испытуемого раствора Б;
А2 – оптическая плотность испытуемого раствора А;
а – навеска испытуемого вещества в испытуемом растворе А, в граммах.
Примечание. Раствор п-анизидина используют свежеприготовленным.