Проведите маркировку и фиксацию материала с использованием гистологических кассет

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3. Подготовить рабочее место:

3.1.

расстелить клеенку (поставить лоток)

3.2.

поставить на клеенку (лоток):

емкость с широким горлом и притертой крышкой, заполненную 10% нейтральным формалином; гистологические кассеты, пинцет

4. маркировка и фиксация материала

4.1.

открыть кассету

4.2.

поместить в кассету вырезанный врачом кусочек материала

4.3.

Подготовить бумажную этикетку: простым карандашом написать порядковый номер, под которым материал зарегистрирован в журнале

4.4.

Этикетку поместить в кассету

4.5.

Закрыть кассету, при этом должен раздаться щелчок

4.6.

Поместите кассету с материалом в емкость широким горлом, заполненную 10% нейтральным формалином. При этом объем фиксатора должен превышающем объем фиксируемого материала в 10-20 раз

4.7.

Закрыть емкость крышкой и оставить под вытяжкой на время, необходимое для фиксации (1 сутки).

5. Завершение работы

5.1.

использованные инструменты сложить в емкость для дезинфекции, экспозиция 1 час.

5.2.

клеенку (лоток) протереть ветошью, смоченной в дез.растворе.

5.3.

сбросить ветошь в емкость с дез.раствором, экспозиция 1 час.

5.4.

снять резиновые перчатки, погрузить их в емкость с дезраствором, экспозиция 1 час.

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3. Подготовить рабочее место:

3.1.

Подготовить батарею для обезвоживания и уплотнения материала

3.2.

Подготовить инструменты

3.3.

Подготовить формочки для заливки

3.4.

Подготовить емкость с холодной водой для быстрого охлаждения парафина

4. обезвоживание

4.1.

Промытый материал поместить в 70% спирт

4.2.

Продемонстрировать, как материал переносят из одного реактива в другой, указать время выдержки в каждом реактиве

5. Заливка материала

5.1.

Достать из термостата емкости с парафином (2-я порция) и заливочный парафин

5.2.

Поместить емкости с парафином на водяную баню

5.3.

Теплым пинцетом перенести материал в центр бумажной формочки

5.4.

Заполнить формочку парафином для заливки

5.5.

Формочки до краев погрузить в холодную воду, пока на поверхности не появится пленка

5.6.

Полностью погрузить формочку в воду

6. Завершение работы

6.1.

Убрать емкости с парафином в термостат

6.2.

Утилизировать кассету (марлю)

6.3.

Перчатки снять и поместить в дезраствор

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3. Подготовить рабочее место:

3.1.

Водяную баню наполнить водой и включить для нагрева

3.2.

Предметные стекла промаркировать и положить на планшет

4. Изготовление срезов

4.1.

Парафиновый блок закрепить в объектодержателе

4.2.

Закрепить нож под углом 7-9°

4.3.

Перевести объектодержатель в среднее положение (на уровне лезвия ножа)

4.4.

Подвести нож до соприкосновения с объектом

4.5.

Установить микрометрическую шкалу на 20 мкм

4.6.

Выровнять поверхность блока до тех пор, пока не начнут получаться первые полные срезы

4.7.

Перевести микрометрическую шкалу на 6-7 мкм

4.8.

Поворотом рукоятки микротома получить серию из 4-6 срезов

5. Монтировка срезов на стекло:

5.1.

Перенести срезы препаровальной иглой или кисточкой с лезвия ножа на подогретую воду

5.2.

Предметное стекло опустить в воду под углом 90º рядом со срезом, аккуратно выловить срез

5.3.

Удалить излишки воды фильтровальной бумагой

5.4.

Сложить стекла со срезами на планшет

5.5

Поместить стекла в термостат до полного высыхания

6. Завершение работы

6.1.

Снять нож, протереть и сложить в футляр

6.2.

Снять блок

6.3.

Очистить микротом от остатков парафина

6.4.

Перчатки снять и поместить в дезраствор

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3.Подготовить рабочее место:

3.1.

Подготовить лоток, салфетки, песочные часы, парфиновые срезысрезы

3.2.

Поместить на лоток штатив

3.3.

Составить батарею для депарафинирования, расположив растворы в следующей последовательности: ксилол (1) – ксилол (2) – спирт 100 – спирт 96 (1) – спирт 96 (2) – спирт 70 дист.вода

3.4.

Составить батарею для окрашивания, расположив растворы в следующей последовательности: дист.вода- гематоксилин- дист.вода- водопроводная вода- эозин- дист.вода

4. депарафинирование

4.1.

Поместить срезы в раствор ксилола 1-2 на 3-5 мин в каждый

4.2.

Провести срезы по батарее спиртов нисходящей концентрации

4.3.

Сполоснуть срезы в дистиллированной воде

5. окрашивание срезов гематоксилином-эозином

5.1.

депарафинированные срезы перенести в дистиллированную воду

5.2.

окрасить гематоксилином 2-5 мин

5.3.

промыть дистиллированной водой - 1 мин

5.4.

промыть водопроводной водой - 3-5 мин

5.5.

окрасить 1% раствором эозина – 0,5-1 мин

5.6.

быстро промыть дистиллированной водой

6. Завершение работы

6.1.

Разобрать батарею, бюксы с растворами составить на место, утилизировать использованные салфетки

6.2.

Перчатки снять и поместить в дезраствор

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3. Подготовка рабочего места:

3.1.

Подготовить лоток, салфетки, песочные часы, окрашенные препараты, планшет

3.2.

Поместить на лоток штатив

3.3.

Составить батарею, расположив растворы в следующей последовательности: вода - спирт 70%- спирт 96% (1)- спирт 96% (2)- спирт 100% - ксилол (1)- ксилол (2)

4. Обезвоживание и просветление препаратов

4.1.

Поместить стекла с окрашенными срезами в раствор 70% спирта по 1-2 мин в каждом растворе

4.2.

Перенести стекла в раствор 96% спирта по 1-2 мин в каждом растворе

4.3.

Перенести стекла в раствор 100% спирта

4.4.

Поместить стекла в раствор ксилола I - П на 1-3 мин в каждом растворе

4.5.

Удалить салфеткой остатки ксилола по краям стекла и с обратной стороны

4.6.

Положить стекло на планшет

5. Заключение препаратов

5.1.

Нанести каплю среды для заключения на край среза

5.2.

Поставить у края капли покровное стекло под углом 45°, при этом заключающая среда должна растечься по краю покровного стекла

5.3.

Придерживая препаровальной иглой свободный край покровного стекла, медленно опустить его на срез

5.4.

Оставить стекла в горизонтальном положении до полного высыхания заключающей среды

6. Завершение работы

6.1.

Разобрать батарею, бюксы с растворами составить на место, утилизировать использованные салфетки

6.2.

Перчатки снять и поместить в дезраствор

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3. Подготовить рабочее место:

3.1.

Водяную баню наполнить водой и включить для нагрева

3.2.

Предметные стекла промаркировать и положить на планшет

4. Изготовление срезов

4.1.

Парафиновый блок закрепить в объектодержателе

4.2.

Закрепить нож под углом 7-9°

4.3.

Перевести объектодержатель в среднее положение (на уровне лезвия ножа)

4.4.

Подвести нож до соприкосновения с объектом

4.5.

Установить микрометрическую шкалу на 20 мкм

4.6.

Выровнять поверхность блока до тех пор, пока не начнут получаться первые полные срезы

4.7.

Перевести микрометрическую шкалу на 6-7 мкм

4.8.

Поворотом рукоятки микротома получить серию из 4-6 срезов

5. Монтировка срезов на стекло:

5.1.

Перенести срезы препаровальной иглой или кисточкой с лезвия ножа на подогретую воду

5.2.

Предметное стекло опустить в воду под углом 90º рядом со срезом, аккуратно выловить срез

5.3.

Удалить излишки воды фильтровальной бумагой

5.4.

Сложить стекла со срезами на планшет

5.5

Поместить стекла в термостат до полного высыхания

6. Завершение работы

6.1.

Снять нож, протереть и сложить в футляр

6.2.

Снять блок

6.3.

Очистить микротом от остатков парафина

6.4.

Перчатки снять и поместить в дезраствор

1.

Вымыть и осушить руки

2.

Надеть перчатки

3. Подготовить рабочее место:

3.1.

Водяную баню наполнить водой и включить для нагрева

3.2.

Предметные стекла промаркировать и положить на планшет

4. Изготовление срезов:

4.1.

Фиксировать блок в объектодержателе так, чтобы длинная ось блока располагалась вдоль длинной оси микротома, а поверхность была горизонтальной.

4.2.

Установить нож/лезвие под углом 13-15°

4.3.

Расположить нож/лезвие над блоком

4.4.

При помощи макровинта поднять блок до соприкосновения с ножом.

4.5.

Установить микрометрическую шкалу на получение толстых срезов (20-25 мкм)

4.6.

Движением ножа/лезвия срезать верхний слой парафина и выровнять поверхность блока до тех пор, пока не начнут получаться первые полные срезы.

4.7.

Перевести микрометрическую шкалу на получение тонких срезов (6-8 мкм)

4.8.

Изготовить необходимое количество парафиновых срезов.

5. Монтировка срезов на стекло:

5.1.

Перенести срезы препаровальной иглой или кисточкой с лезвия ножа на подогретую воду

5.2.

Предметное стекло опустить в воду под углом 90º рядом со срезом, аккуратно выловить срез

5.3.

Удалить излишки воды фильтровальной бумагой

5.4.

Сложить стекла со срезами на планшет

5.5.

Поместить стекла в термостат до полного высыхания

6. Завершение работы

6.1.

Снять нож, протереть и сложить в футляр

6.2.

Снять блок

6.3.

Очистить микротом от остатков парафина

6.4.

Перчатки снять и поместить в дезраствор