
- •Алгоритмы действий студентов при выполнении практических заданий пм 05: Проведение лабораторных гистологических исследований
- •Подготовка посуды и предметных стекол к работе
- •«Приготовление фиксаторов»
- •«Фиксация материала»
- •«Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)»
- •«Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин»
- •1 Этап – обезвоживание:
- •2 Этап – уплотнение:
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант 1):
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант ):
- •6. «Приготовление спиртов различной концентрации» Приготовление абсолютного спирта
- •7. «Разведение спиртов»
- •8. «Приготовление гистологических срезов»
- •9. «Устранение артефактов приготовления гистологических срезов»
- •10. «Уход за микротомом и микротомными ножами»
- •11. «Монтировка срезов на стекло»
- •12. «Приготовление адгезивной среды»
- •13.«Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)»
- •14. «Приготовление красящих растворов» Приготовление раствора гематоксилина
- •Приготовление 1% раствора эозина
- •15. «Окраска гистологических препаратов»
- •16. «Обезвоживание и просветление препаратов »
- •17. «Заключение препаратов»
- •18. «Обработка материала при срочной операционной биопсии»
- •19. «Микроскопирование препаратов»
- •1 Этап – настройка освещения микроскопа
- •2 Этап – микроскопирование препаратов
Приготовление 1% раствора эозина
Оснащение: торсионные весы, шпатель, мерные колбы, стеклянная палочка
Реактивы: эозин, дистиллированная вода
Алгоритм действий:
Приготовить навеску 100 мг эозина
В мерную колбу налить 100 мл дистиллированной воды
Добавить эозин
Тщательно размешать.
15. «Окраска гистологических препаратов»
Окраска препаратов гематоксилином-эозином
Вариант 1. Прогрессивное окрашивание
Оснащение: емкости для окраски препаратов*
Реактивы: гематоксилин Эрлиха, 1% водный раствор эозина, дистиллированная вода
Алгоритм действий:
депарафинированные срезы перенести в дистиллированную воду
окрасить гематоксилином Эрлиха – 2-5 мин
промыть дистиллированной водой - 1 мин
промыть водопроводной водой - 3-5 мин
окрасить 1% раствором эозина – 0,5-1 мин
быстро промыть дистиллированной водой
провести обезвоживание и заключение препаратов
Вариант 2 . Регрессивное окрашивание
Оснащение: емкости для окраски препаратов*
Реактивы: гематоксилин Эрлиха, 1% водный раствор эозина, 1% растворе хлористоводородной кислоты в 70% спирте, дистиллированная вода
Алгоритм действий:
депарафинированные срезы перенести в дистиллированную воду
окрасить гематоксилином Эрлиха – 5-10 мин
ополоснуть дистиллированной водой
дифференцировать в 1% растворе хлористоводородной кислоты в 70% спирте – 1-2 с
промыть водопроводной водой - 5-10 мин
осуществить контроль под микроскопом: если хроматин и ядрышко видны недостаточно четко, то дифференцировку следует повторить
ополоснуть дистиллированной водой
окрасить 1% раствором эозина – 0,5-1 мин
быстро промыть дистиллированной водой
провести обезвоживание и заключение препаратов
Окраска препаратов пикрофуксином
Оснащение: емкости для окраски препаратов*
Реактивы: железный гематоксилин Вейгерта или гематоксилин Эрлиха, пикрофуксин, дистиллированная вода,
Алгоритм действий:
депарафинированные срезы перенести в дистиллированную воду
окрасить железным гематоксилином Вейгерта или гематоксилином Эрлиха – 2-5 мин
ополоснуть в дистиллированной воде
окрасить в пикрофуксином - 3-5 мин.
промыть дистиллированной водой,
быстро провести обезвоживание в спиртах, начиная с 96%
провести заключение препаратов
*
В качестве емкости для окраски можно
использовать различные стеклянные и
пластиковые сосуды с горизонтальным и
вертикальным расположением стекол
16. «Обезвоживание и просветление препаратов »
Оснащение: бюксы с притертой крышкой, штатив для бюксов,
Реактивы: ксилол, спирты различной концентрации (70%-100%),
Алгоритм действий:
Поместить стекла с окрашенными срезами в раствор 70% Спирта по 1-2 мин в
Перенести стека в раствор 96% Спиртакаждом растворе
Перенести стека в раствор 100% Спирта
Поместить стекла в раствор КсилолаIна 1-3 мин
Поместить стекла в раствор КсилолаПна 1-3 мин
После чего провести заключение препаратов.