- •Алгоритмы действий студентов при выполнении практических заданий пм 05: Проведение лабораторных гистологических исследований
- •Подготовка посуды и предметных стекол к работе
- •«Приготовление фиксаторов»
- •«Фиксация материала»
- •«Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)»
- •«Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин»
- •1 Этап – обезвоживание:
- •2 Этап – уплотнение:
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант 1):
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант ):
- •6. «Приготовление спиртов различной концентрации» Приготовление абсолютного спирта
- •7. «Разведение спиртов»
- •8. «Приготовление гистологических срезов»
- •9. «Устранение артефактов приготовления гистологических срезов»
- •10. «Уход за микротомом и микротомными ножами»
- •11. «Монтировка срезов на стекло»
- •12. «Приготовление адгезивной среды»
- •13.«Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)»
- •14. «Приготовление красящих растворов» Приготовление раствора гематоксилина
- •Приготовление 1% раствора эозина
- •15. «Окраска гистологических препаратов»
- •16. «Обезвоживание и просветление препаратов »
- •17. «Заключение препаратов»
- •18. «Обработка материала при срочной операционной биопсии»
- •19. «Микроскопирование препаратов»
- •1 Этап – настройка освещения микроскопа
- •2 Этап – микроскопирование препаратов
10. «Уход за микротомом и микротомными ножами»
Оснащение: широкая кисточка, салфетка.
Реактивы: машинное или вазелиновое масло, ксилол
Алгоритм действий:
Снять микротомный нож, очистить его от остатков парафина и положить в футляр
Объектодержатель и станину очистить от остатков парафина кисточкой
Все скользящие поверхности микротомов смазать тонким слоем машинного или вазелинового масла.
При постоянной работе на микротоме все скользящие поверхности один раз в неделю протирать салфеткой, смоченной растворителем.
11. «Монтировка срезов на стекло»
Вариант 1
Оснащение: столик для расправления и сушки срезов, предметные стекла, стеклянная палочка, химический стакан, пипетка, препаровальная игла, кисточка, маркер
Реактивы: дистиллированная вода, адгезивная среда*
Алгоритм действий:
Включить столик для расправления и сушки срезов
Взять в одну руку 5-6 чистых обезжиренных стекол в виде веера
Стеклянной палочкой нанести адгезивную среду на каждое стекло
Растереть адгезивную среду обезжиренным спиртом пальцем по поверхности стекла до его середины
Промаркировать стекла**
Поместить стекла на столик
Нанести пипеткой 3-4 капли теплой дистиллированной воды на край стекла, покрытый адгезивной средой
Препаровальной иглой или кисточкой перенести приготовленные срезы с лезвия ножа микротома на каплю воды на стекле. Срез приклеивают на стекло блестящей, обращенной к ножу стороной.
Препаровальной иглой расправить срез и правильно его сориентировать
Оставить стекло на столике до полного испарения воды; частично расплавляющийся парафин обеспечит хорошую фиксацию среза на стекле
Вариант 2
Оснащение: водяная баня, термостат, предметные стекла, планшет, стеклянная палочка, препаровальная игла, кисточка, маркер, фильтровальная бумага
Реактивы: дистиллированная вода, адгезивная среда
Алгоритм действий:
Водяную баню наполнить водой и включить для нагрева
Взять в одну руку 5-6 чистых обезжиренных стекол в виде веера
Стеклянной палочкой нанести адгезивную среду на каждое стекло
Растереть адгезивную среду обезжиренным спиртом пальцем по поверхности стекла до его середины
Промаркировать стекла
Срезы перенести препаровальной иглой или кисточкой с лезвия ножа на подогретую воду
П
одготовленным
предметным стеклом выловить срезУдалить излишки воды фильтровальной бумагой
Сложить стекла со срезами на планшет
Поместить стекла в термостат до полного высыхания.
*
в
качестве адгезивной среды можно
использовать как готовый желатиновыйадгезив
для гистологических срезов, так и
приготовленные самостоятельно растворы
яичного белка с глицерином,и раствор
сыворотки крови (см. тему «Приготовление
адгезивной среды»)
*
*
для
маркировки стекол предпочтительно
использовать лабораторный маркер для
предметных стекол, устойчивый к
воздействию ксилола, спирта, ацетона
(А) или алмазный карандаш (Б).
(А) (Б)
