
- •Алгоритмы действий студентов при выполнении практических заданий пм 05: Проведение лабораторных гистологических исследований
- •Подготовка посуды и предметных стекол к работе
- •«Приготовление фиксаторов»
- •«Фиксация материала»
- •«Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)»
- •«Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин»
- •1 Этап – обезвоживание:
- •2 Этап – уплотнение:
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант 1):
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант ):
- •6. «Приготовление спиртов различной концентрации» Приготовление абсолютного спирта
- •7. «Разведение спиртов»
- •8. «Приготовление гистологических срезов»
- •9. «Устранение артефактов приготовления гистологических срезов»
- •10. «Уход за микротомом и микротомными ножами»
- •11. «Монтировка срезов на стекло»
- •12. «Приготовление адгезивной среды»
- •13.«Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)»
- •14. «Приготовление красящих растворов» Приготовление раствора гематоксилина
- •Приготовление 1% раствора эозина
- •15. «Окраска гистологических препаратов»
- •16. «Обезвоживание и просветление препаратов »
- •17. «Заключение препаратов»
- •18. «Обработка материала при срочной операционной биопсии»
- •19. «Микроскопирование препаратов»
- •1 Этап – настройка освещения микроскопа
- •2 Этап – микроскопирование препаратов
6. «Приготовление спиртов различной концентрации» Приготовление абсолютного спирта
Вариант 1.
Оснащение: фарфоровая ступка с пестиком, спиртовка, банка с притертой пробкой
Реактивы: сульфат меди, 96% спирт.
Алгоритм действий:
Сульфат меди растереть в ступке до порошкообразного состояния
Прокалить над спиртовкой, постоянно помешивая до полного испарения воды. При этом сульфат меди приобретает бледно-голубую окраску.
Безводный сульфат меди засыпать в банку (1часть)
Добавить 4-6 частей 96% спирта
Плотно закрыть пробкой и взболтать
Оставить сутки, периодически взбалтывая
Если весь сульфат меди адсорбировал воду и вновь приобрел синюю окраску, спирт слить в новую банку, добавить безводный сульфат меди и перемешать. Процедуру повторяют до тех пор, пока сульфат меди не останется безводным.
Вариант 2.
Оснащение: термостат, фарфоровая ступка с пестиком, банка с притертой пробкой, прямоугольный лоток, бумага
Реактивы: сульфат меди, 96% спирт.
Алгоритм действий:
Сульфат меди растереть в ступке до порошкообразного состояния
Лист бумаги положить на дно прямоугольного лотка
Распределить медный купорос тонким слоем на бумаге
Поместить лоток в термостат при 56º С; периодически помешивать. При этом сульфат меди приобретает бледно-голубую окраску.
Безводный сульфат меди засыпать в банку (1часть)
Добавить 4-6 частей 96% спирта
Плотно закрыть пробкой и взболтать
Оставить сутки, периодически взбалтывая
Если весь сульфат меди адсорбировал воду и вновь приобрел синюю окраску, спирт слить в новую банку, добавить безводный сульфат меди и перемешать. Процедуру повторяют до тех пор, пока сульфат меди не останется безводным.
7. «Разведение спиртов»
Оснащение: мерный цилиндр, широкогорлые банки с притертыми пробками, таблица разведения спиртов.
Реактивы: спирт 96%, дистиллированная вода
Алгоритм действий:
Изучить таблицу разведения спиртов и рассчитать необходимое количество 96% спирта и дистиллированной воды
Отмерить в цилиндре необходимое количество 96% спирта и перелить его с подготовленную банку
Отмерить мерным цилиндром требуемое количество дистиллированной воды и перелить ее в банку со спиртом
Перемешать полученный раствор
Таблица 1
ПРИГОТОВЛЕНИЕ СПИРТОВ РАЗЛИЧНОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ
РЕАКТИВЫ |
ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ 100 МЛ СПИРТА |
||||||
40% |
45% |
50% |
60% |
70% |
80% |
90% |
|
96% спирт, мл |
42 |
47 |
52 |
63 |
73 |
83 |
94 |
Дистиллированная вода, мл |
58 |
53 |
48 |
37 |
27 |
17 |
6 |
8. «Приготовление гистологических срезов»
Вариант 1: Приготовление гистологических срезов на санном микротоме
Оснащение: санный микротом, препаровальная игла, кисточка для снятия срезов, парафиновые блоки
Алгоритм действий:
Ф
иксировать блок в объектодержателе так, чтобы длинная ось блока располагалась вдоль длинной оси микротома, а поверхность была горизонтальной.
Установить нож/лезвие под углом 13-15°
Медленно подвести нож/лезвие к блоку
При помощи макровинтаотрегулировать высоту расположения блока до соприкосновения с ножом.
Установить микрометрическую шкалу на получение толстых срезов (20-25 мкм)
Движением ножа/лезвия срезать верхний слой парафина и выровнять поверхность блока до тех пор, пока не начнут получаться первые полные срезы.
Перевести микрометрическую шкалу на получение тонких срезов (6-8 мкм)
Изготовить необходимое количество парафиновых срезов.
Монтировать срезы на стекло
Вариант 2: Приготовление гистологических срезов на ротационном микротоме
Оснащение: ротационный микротом, препаровальная игла, кисточка для снятия срезов., парафиновые блоки
Алгоритм действий:
|
|
|
|
|
|
-
|
|
|