Департамент здравоохранения города Москвы

Алгоритмы манипуляций

для проведения

практических занятий

ПМ 05: Проведение лабораторных гистологических исследований

Специальность: 060604 Лабораторная диагностика

2011

Составлено в соответствии с Государственными требованиями к минимуму содержания и уровню подготовки выпускников по специальности: 060604 Лабораторная диагностика

Общая редакция: Кочерыжкина Н.А. – преподаватель высшей квалификационной категории ГОУ СПО МУ №4

Алгоритмы действий студентов при выполнении практических заданий пм 05: Проведение лабораторных гистологических исследований

1. Подготовка посуды и предметных стекол к работе

2. Приготовление фиксаторов

3. Фиксация материала

4. Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)

5. Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин

6. Приготовление спиртов различной концентрации»

7. Разведение спиртов

8. Приготовление гистологических срезов

9. Устранение артефактов приготовления гистологических срезов

10. Уход за микротомом и микротомными ножами

11. Монтировка срезов на стекло

12. Приготовление адгезивной среды

13. Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)

14. Приготовление красящих растворов

15. Окраска гистологических препаратов

16. Обезвоживание и просветление препаратов

17. Заключение препаратов

18. Обработка материала при срочной операционной биопсии

19. Микроскопирование препаратов

1. Подготовка посуды и предметных стекол к работе

Оснащение: раковина с проточной водой, эмалированная посуда для замачивания и кипячения стекол, электрическая плита, вытяжной шкаф, эксикаторы, банкас широким горлом, пинцет, хлопчатобумажные салфетки, картонные коробки.

Реактивы:2-3% раствор гидрокарбоната натрия, раствор моющего средства, смесь Никифорова,

Алгоритм действий:

• Сложить стекла в эмалированную посуду и замочить в теплой мыльной воде

• Прокипятить стекла в 2-3% растворе гидрокарбоната натрия

• Промыть в проточной воде в течение нескольких часов

• Протереть чистой хлопчатобумажной тканью

• Поместить в смесь Никифорова на несколько дней.

• Пинцетом извлечь стекла из смеси Никифорова

• Протереть чистой тканью

• Проверить качество обезжиривания: капнув на предметное стекло воду из пипетки: по обезжиренному стеклу вода растекается тонким слоем, а не собирается в каплю.

• Сложить в коробку

2. «Приготовление фиксаторов»

Приготовление 10% раствора формалина

Оснащение: вытяжной шкаф, банкас широким горломи притертой пробкой

Реактивы: 1 л40% формальдегида, 100 гкарбоната кальция или магния.

Алгоритм действий:

• На дно широкогорлой банки насыпать 100г карбоната кальция или магния

• Добавить 1 л 40% формальдегида

• Перемешать и оставить на сутки

• Полученный нейтральный формалин разбавить водопроводной водой в соотношении 1:10

Приготовление раствора Карнуа

Оснащение: вытяжной шкаф, банкас широким горломи притертой пробкой,мерный цилиндр, пипетки

Реактивы: спирт 100%, хлороформ , ледяная уксусная кислота.

Алгоритм действий:

• В приготовленную емкость последовательно отмерить и добавить:

• 60мл 100% спирта

• 30 мл хлороформа

• 10мл ледяной уксусной кислоты

• Перемешать

• Использоватьфиксатор следует сразу после приготовления.

3. «Фиксация материала»

Вариант 1. С использованием гистологических кассет

Оснащение: вытяжной шкаф, емкость с широким горлом, гистологические кассеты, плотная бумага, простой карандаш

Реактивы: 10% раствор нейтрального формалина

Алгоритм действий:

	ХХХ ХХХ
Вырезанный кусочек материала поместить в кассету	Подготовить бумажную этикетку. простым карандашом написать порядковый номер, под которым материал зарегистри-рован в журнале	Этикетку поместить в кассету

• Закрыть кассету (при этом должен раздаться щелчок).

• Поместите кассету с материалом в емкостьшироким горлом

• Добавьте фиксатор в объеме в 10-20 раз превышающем объем фиксируемого материала

• Если цвет фиксатора изменился после погружения в него кусочков ткани, необходимо немедленно сменить фиксатор.

• Закрыть емкость крышкой и оставить под вытяжкой на время, необходимое для фиксации.

Вариант 2.

Оснащение: вытяжной шкаф, емкость с широким горлом, марлевые салфетки, плотная бумага, простой карандаш

Реактивы: 10% раствор нейтрального формалина

Алгоритм действий:

• Налить фиксатор в подготовленную емкость

• Подготовить марлевую салфетку

• Подготовить бумажную этикетку: простым карандашом написать на ней порядковый номер, под которым материал зарегистрирован в журнале.

• Положить этикетку в центр салфетки надписью вниз

• Поместить на салфетку вырезанные кусочки материала

• Завязать салфетку

• Поместить материал в сосуд с фиксатором

• Если цвет фиксатора изменился после погружения в него кусочков ткани, необходимо немедленно сменить фиксатор.

• Закрыть емкость крышкой и оставить материал в вытяжном шкафу до конца фиксации