Алгоритм определения групп крови по системе аво

 «Инструкция по определению групп крови по системе АВО»

(Приказ МЗ Украины от 05.07.1999 г. № 164)

«Инструкции о применении набора диагностических

моноклональных реагентов анти-А, анти-В и анти-АВ

для определения групп крови человека по системе АВО »

 от 16.02.2006 г.

Определение группы крови по системе АВО проводят моноклональными реагентами (мышиные моноклональные Ig M) анти-А, анти-В и анти-АВ обычными методами определения антигенов эритроцитов и агглютининов в сыворотке (плазме) крови с помощью стандартных эритроцитов.

І. Определение группы крови с помощью моноклональных реагентов (цоликлонив) анти-А и анти-В

Материалы:

• моноклональные реагенты (цоликлоны) анти-А (розового цвета), анти-В (синего цвета) по 5мл во флаконах.

• маркированные пипетки («анти-А», «анти-В» и т.д.)

• белая фарфоровая пластинка

• кровь больного (взята из антикоагулянтом)

Условия проведения исследований:

• Определение группы крови проводится в помещении с достаточным освещением при температуре от 15 ° С до 25 ° С.

• Необходимо работать в перчатках.

• Необходимо проверить срок годности реагентов.

• Не следует пользоваться моноклональными реагентами, если они имеют нерастворимый осадок или помутнение.

• Для каждого реагента используют отдельную промаркированную пипетку.

• Моноклональные реагенты не следует хранить открытыми.

Техника определения группы крови с помощью цоликлонив антигенов А и В:

1 Нанести на планшет или на белую фарфоровую пластинку под соответствующими надписями «Анти - А» и «Анти - В» по одной капле (100 мкл) цоликлона анти-А и анти-В.

2. Рядом с каплями антител нанести по одной капле (50 мкл) исследуемой крови (соотношение кровь : реагент - 1:10)

  - в случае определения группы крови, взятой с пальца или взятой без консерванта, необходимо обеспечить достаточно большое количество эритроцитов, то есть брать первые капли с пальца (без сильного выдавливания) или свободные эритроциты из осадка крови, которая свернулась (без чрезмерного количества сыворотки).

3. Реагенты и кровь тщательно смешать чистой, сухой, стеклянной палочкой на пластине.

4. Наблюдать за ходом реакции при легком покачивании пластины или планшета в течение 5 минут (через возможность более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В).

Оценка результатов:

Положительный результат - выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов.

     Агглютинацию можно наблюдать невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, которые быстро сливаются, образуют большие хлопья или один большой аглютинат.

 Отрицательной результат - капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, аглютинаты в ней не наблюдаются.

• Кровь относится к группе 0 (I), если отсутствует (-) агглютинация с

цоликлонамы анти-А и анти-В.

• Кровь принадлежит к группе А (II), если агглютинация (+)

наблюдается с цоликлоном анти-А.

• Кровь принадлежит к группе В (III), если агглютинация (+)

наблюдается с цоликлоном анти-В.

• Кровь принадлежит к группе АВ (IV), если агглютинация (+)

наблюдается с цоликлоном анти-А, анти-В и анти-АВ.

 

Табл. 1 Трактовка результатов реакции

Реакция эритроцитов, которые исследуются, с моноклональными реагентами (цоликлонамы)

Анти - А Анти - В Контроль Анти - АВ

0 (I) - - -

А (II) -

В (III) -

АВ (IV)

Группа исследуемой крови	Реакция эритроцитов, которые исследуются, с моноклональными реагентами (цоликлонами)
	Анти - А	Анти – В	Контроль Анти - АВ
0(І)	-	-	-
А (II)	+	-	+
В (III)	-	+	+
АВ (IV)	+	+	+

Вопросы

1. что с чем агглютинирует: где Аг, где Ат?