- •Методические указания
- •Для обучающегося
- •К практическому занятию для аудиторной работы
- •Тема: Методы определения экскреторных ферментов (амилазы, щф)
- •Практическое занятие для клинических интернов
- •2. Тема: Методы определения экскреторных ферментов (амилазы, щф)
- •3. Значение темы (актуальность изучаемой проблемы).
- •4. Цель практического занятия:
- •На основе теоретических знаний и практических умений обучающийся должен знать и уметь:
- •4. План проведения занятия:
- •4.1. Самостоятельная работа по теме:
- •4.2. Исходный контроль уровня знаний.
- •4.2.1. Вопросы для самоподготовки.
- •4.2.2 . Методические указания по проведению преаналитического этапа
- •Основные понятия и положения темы (наглядные формы - таблицы, схемы, алгоритмы и т.Д.)
4.2.2 . Методические указания по проведению преаналитического этапа
а-АМИЛАЗА ОБЩАЯ
Материал для исследования. Свежая негемолизированная сыворотка или плазма крови. Свежая капиллярная или венозная кровь, гепарини-зированная кровь (для экспресс-анализа на тест-полосках на анализа-торе РеЛо1гоп).
Время взятия. При плановых анализах— с 7 до 9 ч утра, при экстрен
ных — в любое время дня.
Подготовка пациента. Кровь берут у обследуемого натощак. Пациент находится в покое, в положении лежа или сидя. Взятие крови производят до выполнения холангиографии или холангиопанкреатографии, облучений, операций. Исключить прием алкоголя и физические нагрузки.
Методика взятия. Кровь берут в химически чистую центрифужную пробирку или коммерческую пробирку одноразового пользования с вакуумом для получения сыворотки или плазмы.
Для получения плазмы используют антикоагулянт гепарин. Другие антикоагулянты не пригодны. В лабораторию доставляют 1 мл крови или 0,5 мл сыворотки или плазмы. На 1 определение в зависимости от метода требуется 0,01—0,1 мл сыворотки или плазмы, для определения на анализаторе КеЛо1гоп — 0,032 мл крови, сыворотки или плазмы. Определение амилазы в сыворотке крови входит в программу экстренных исследований для срочных анализов, рекомендуемое время с момента взятия пробы до выдачи ответа — 30 мин
Условия доставки и хранения. Свежую капиллярную или венозную кровь исследуют в течение 2—3 мин. Кровь можно хранить после центрифугирования без отделения сыворотки. Амилаза стабильна в сыворотке и плазме в течение 1 недели
при комнатной температуре или при 2—8°С, при -20°С — в течение 1
года
Примечания. С возрастом активность амилазы в сыворотке увеличивается. У женщин активность на 18% выше, чем у мужчин. У беременных женщин выше, чем у небеременных.
Прием алкоголя, алкоголизм,курение, хирургические операции, холангиография и холангиопанкреатография, облучение вызывают повышение активности амилазы.
У темнокожих активность амилазы выше, чем у белых людей. Установлена наследственно высокая активность. В плазме активность выше, чем в сыворотке. Гемолиз, липемия, попадание слюны и пота на различных этапах пробоподготовки и анализа завышают результаты. Оксалаты, цитраты, ЭДТУК и ее соли, фторид натрия занижают результаты.
Из лекарств завышение дают пероральные контрацептивы, кортикостероиды, сульфаниламиды, тиазидовые диуретики, тетрациклин, метилдопа, индометацин, каптоприл, алкалоиды опия, панкреозимин, хлориды.
Снижение результатов вызывают анаболические стероиды, вливания глюкозы.
Материал для исследования. Свежая суточная или порционная моча,
утренняя или случайная порция (8-часовая, 2-часовая порции).
Время взятия. Мочу собирают за сутки и доставляют порцию 10 мл из суточного количества (или утреннюю или случайную порцию) как можно скорее в лабораторию.
Методика взятия. См. "Правила сбора мочи". Точно измерить объем мочи мерным цилиндром, в бланке направления указать объем и время, за которое собрана моча.
Условия доставки и хранения. Фермент менее стабилен при кислом значении рН. Для хранения мочи следует довести рН до 7,0. Амилаза сохраняет свою активность в моче при хранении в плотно закрытом сосуде в течение 2 дней при комнатной температуре, 10 дней — при температуре 2—8°С, 3 недель — при -20°С
Примечания. См. а-Амилаза общая, Сыворотка, плазма крови.
а-АМИЛАЗА ПАНКРЕАТИЧЕСКАЯ (р-АМИЛАЗА)
Примечания. См. а-Амилаза общая. При использовании электрофоретических методов следует избегать длительного хранения биожидкостей вследствие изменения соотношения изоферментов и, соответственно, электрофоретической картины
Аналитическое занижение р-амилазы дают ацетоаминофен в токсических концентрациях,
завышение — фуросемид, аскорбиновая кислота и метилпреднизолон.
