- •Гоу впо «Красноярский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
- •2. Значение темы (актуальность изучаемой проблемы)
- •4. План проведения занятия:
- •5. Основные понятия и положения темы:
- •1. Центрифуга медицинская настольная цлмн-р10-01 - «Элекон»
- •2. Центрифуга медицинская настольная цлмн-р10/2700 - «Элекон»
- •3. Центрифуга лабораторная настольная Liston c 2204 Classic
- •4. Лабораторная медицинская центрифуга lmc-3000 (BioSan, Латвия)
- •5. Лабораторная настольная центрифуга lmc-4000r с охлаждением (BioSan, Латвия).
- •6. Мультицентрифуга см-6м (elmi, Латвия)
- •7. Лабораторная настольная центрифуга eba 20 (Hettich, Германия)
- •8. Лабораторная настольная центрифуга eba 21 (Hettich, Германия)*
- •1. Персональная мини-центрифуга Microspin 12 (BioSan, Латвия)
- •2. Центрифуга-вортекс см-70м (elmi, Латвия)
- •4. Микроцентрифуга micro 120 (Hettich, Германия)
- •5. Микроцентрифуги micro 200 и micro 200r (Hettich, Германия)
- •5. Микроцентрифуги micro 220 и micro 220r (Hettich, Германия)
- •1. Лабораторные настольные центрифуги Liston c 2202 и Liston c 2203 (Листон, рф)
- •2. Мультицентрифуга см-6мt (elmi, Латвия)
- •3. Настольная центрифуга rotofix 32 а (Hettich, Германия)
- •4. Настольные центрифуги universal 320 и universal 320 r (Hettich, Германия)
- •1. Настольные центрифуги rotina 38 и rotina 38r (Hettich, Германия)
- •2. Настольные центрифуги rotina 420 и rotina 420r (Hettich, Германия)
- •3. Настольные центрифуги rotanta 460 и rotanta 460r (Hettich, Германия)
- •1. Напольные центрифуги rotana 460rc и rotana 460rf (Hettich, Германия)
- •2. Напольные центрифуги rotixa 50s и rotixa 50rs (Hettich, Германия)
- •3. Напольная центрифуга rota silenta 630 rs (Hettich, Германия)
- •1. Вортекс V-3 (elmi, Латвия) Рис. 1.
- •2. Персональный вортекс V-1 (BioSan, Латвия) Рис. 2.
- •3. Мультивортекс V-32 (BioSan, Латвия) Рис. 3.
- •1. Комбиспин fvl-240m (BioSan, Латвия) Рис. 1.
- •2. Мультиспин msc-3000 (BioSan, Латвия) Рис. 2.
- •6. Вопросы для самоподготовки обучающихся
- •7. Список литературы по теме занятия:
1. Вортекс V-3 (elmi, Латвия) Рис. 1.
Используется для перемешивания растворов в пробирках от 0,5 до 50 мл. Амплитуда орбитальных колебательных движений 3мм. Скорость вращения от 100 до 2300 об/мин. Размеры: 130х60 мм, вес: 0,6 кг
2. Персональный вортекс V-1 (BioSan, Латвия) Рис. 2.
Для перемешивания растворов в пробирках от 0,5 до 50 мл. Диапазон регуляции скорости вращения - 250-3000 об/мин. Размеры: 90х150х80 мм , вес: 1,1 кг.
3. Мультивортекс V-32 (BioSan, Латвия) Рис. 3.
Предназначен для встряхивания, установленных на 32-местной платформе пробирок типа Эппендорф на 1,5 мл (16 гнезд), 0,5 мл (8гнезд), 0,2 мл (8 гнезд). Два режима работы: продолжительный и кратковременный. Диапазон регулирования оборотов 500-3000 об/мин. Размеры - 120х180х100 мм, вес - 1,5 кг
Миницентрифуги/вортексы
Устройства, состоят из двух модулей: микроцентрифуги и вортекса (встряхивателя). Разработаны для ПЦР, но широко используются в иммунохимических лабораториях.
1. Комбиспин fvl-240m (BioSan, Латвия) Рис. 1.
Скорость вращения микроцентрифуги 2400 об/мин. Два ротора: R-1,5 для 12 микропробирок на 1,5 мл и R-0,5/2,0 для 12 микропробирок на 0,5 или 2,0 мл. Вортекс имеет непрерывный и импульсный режимы работы. Размеры: 170х220х120 мм, вес 1,75 кг.
2. Мультиспин msc-3000 (BioSan, Латвия) Рис. 2.
Автоматизированный прибор, встроенный микропроцессор, ЖК-дисплей. Микроцентрифуга: скорость вращения 1000-3500 об/мин с шагом 100 об/мин; максимальное ускорение 1000 g; два сменных ротора. Вортекс: три уровня перемешивания (мягкий, средний, жесткий). Размеры: 180х220х120 мм, Вес: 2,5 кг.
Возможные ошибки центрифугирования
Неправильный выбор ротора, центробежного ускорения (g), продолжительности центрифугирования могут привести к раскалыванию стеклянных пробирок, неэффективному разделению, усилению гемолиза, а несоблюдение температурного режима - к снижению активности или концентрации термочувствительных аналитов.
Механические дозаторы
Точность дозирования биожидкостей и реагентов в современных методах клинического микроанализа является одним из важнейших факторов, определяющих качество лабораторных исследований. Для медицинских лабораторий поставляется широкий ассортимент дозаторов и наконечников к ним различных фирм-производителей (Thermo Electron, Ленпипет, Biohit, Eppendorf, Gilson, Hamilton и др.). В зависимости от вида, объема исследований, типа оборудования и условий работы для каждой лаборатории можно подобрать оптимальный набор дозаторов.
Основные характеристики дозаторов:
точность и воспроизводимость дозирования;
химическая стойкость деталей и узлов дозаторов, контактирующих с дозируемыми жидкостями;
возможность дозирования жидкостей с различными физико-механическими свойствами;
диапазон дозирования;
эргономические характеристики;
биологическая безопасность (возможность автоклавирования пипеток, наличие устройства для сбрасывания наконечников).
Классификация дозаторов
По способу забора и выдачи доз:
пипеточные (диспенсеры, дилюторы)
клапанные
перистальтические дозаторы
Пипеточные дозаторы нашли самое массовое применение в лабораторной практике. Это бесклапанные дозаторы, где забор и выдача пробы осуществляются через сменные наконечники, что обеспечивает высокую химическую чистоту операции дозирования.
К пипеточным дозаторам относятся диспенсеры (степперы) - для разового забора дозируемого раствора в наконечник (или шприц-наконечник) и последующего многократного пошагового дозирования (Рис. 2, 3), а также дилюторы для последовательного забора различных жидкостей разных объемов и выдачи всего суммарного объема жидкости, находящегося в наконечнике.
Клапанные дозаторы содержат в своей конструкции клапан. Это самые различные виды диспенсеров.
Перистальтические дозаторы. В качестве привода используется не мускульная сила исследователя, а электродвигатель, который через определенный механизм создает пульсирующий ток жидкости. Позволяет автоматизировать процесс в ситуациях, когда необходимо дозировать одинаковые объемы жидкости в очень больших количествах.
По способу установки дозы
дозаторы с фиксированным объемом дозы
дозаторы с регулируемыми переменными объемами дозы
При выполнении сотен стандартных манипуляций наиболее надежными помощниками сотрудников лаборатории являются дозаторы с фиксированными объемами дозирования, снабженные сбрасывателем наконечников.
В дозаторах с регулируемыми объемами доз установка дозы может осуществляться плавно или дискретно с определенным шагом. Первые - проще по конструкции, вторые - цифровые, являются более универсальными.
По количеству каналов дозирования:
одноканальные
многоканальные (4, 8, 12 каналов)
Многоканальные дозаторы (Рис. 5) ориентированы на специальные емкости для реагентов (ванночки) Основное назначение многоканальных дозаторов - добавление жидкости в микропланшеты или стрипы из восьми или двенадцати лунок.
По способу управления дозаторы можно разделить
с ручным приводом
автоматическим приводом
автоматическим приводом с микропроцессорным управлением (электронные дозаторы)
Последние являются новым электронным этапом в развитии технологии дозирования - встроенный микропроцессор, быстродействующий микродвигатель, жидкокристаллический дисплей, аккумуляторная батарея (Рис. 6). Электронные дозаторы имеют ряд дополнительных возможностей и преимуществ.
регулирование скорости забора и сброса жидкостей с различной вязкостью;
легкость в управлении и удобство в работе позволяют в течение рабочего дня выполнять значительное количество манипуляций с минимальной физической нагрузкой на руки;
автоматическая калибровка;
Существуют другие разновидности дозирующих устройств, удовлетворяющие требования отдельных лабораторных процедур. Так, при разведении образцов сывороток, концентрированных буферных растворов, реагентов и т. д. удобными в добавлении жидкости являются флакон-диспенсеры (Рис. 7, 8). Они представляют собой дозирующую насадку на специальные лабораторные флаконы, работающую по принципу ручного насоса.
Основные режимы пипетирования
Для автоматических пипеток существует два режима пипетирования (для электронных пипеток их может быть больше):
Прямое – осуществляется посредством нажатия поршня до первого упора, забора жидкости, слив жидкости посредством нажатия до второго упора.
Обратное – осуществляется посредством нажатия поршня до второго упора, забора жидкости и слив жидкости посредством нажатия до первого упора. Применяется для дозирования пенистых и вязких жидкостей.
Правила работы с пипетками
Пипетки не должны подвергаться излишним механическим или термическим воздействиям
Пипетки необходимо содержать в чистоте и обрабатывать два раза этиловым 70% спиртом после каждого факта работы этим инструментом.
В регламентированные сроки пипетка должна проходить поверку на точность забора жидкости.
Рекомендуется одевать наконечник посредством прижатия посадочного конуса к наконечнику с незначительным поворотом вокруг своей оси на 900.
Необходимо при работе держать пипетку строго вертикально. Особенно это правило необходимо соблюдать при дозировании малых объемов жидкостей.
При работе с пипетками переменного объема, рекомендуется работать в диапазоне значений приходящийся на середину минимального и максимального допустимого объема. Пример: пипетка от 50-200 мкл рекомендуется работать в диапазоне 100-150 мкл.
Возможные причины ошибок
При работе необходимо использовать только «родные» наконечники фирмы-производителя дозаторов или учитывать совместимость наконечников с пипетками различных фирм производителей. Погрешность дозирования при несоответствии наконечника посадочному конусу дозатора может достигать 10%. Если лаборатория имеет пипетки различных производителей, можно использовать универсальные наконечники (Oxygen, Omnitip).
Выбор правильного режима пипетирования (прямое, обратное).
Правильное положение рук при работе с пипеткой.
