- •Практическое занятие № 5
- •Динамика развития популяции микроорганизмов
- •Практическая часть
- •II этап бактериологического метода выделения чистой культуры микроорганизмов – возбудителей заболеваний человека
- •1.1 Методика изучения культуральных свойств изолированных колоний:
- •Микроскопия выделенных культур при окраске по Граму, для определения чистоты культуры
- •Запишите результаты исследований в таблицу 1:
- •III этап бактериологического метода выделения чистой культуры микроорганизмов – возбудителей заболеваний человека
- •Сводная таблица идентификации культур микроорганизмов
- •Определение чувствительности исследуемых культур к антимикробным препаратам
1.1 Методика изучения культуральных свойств изолированных колоний:
Исследование в проходящем свете (просматриваем колонии невооруженным глазом (макроскопически) со стороны дна чашки) –
1) Форма колонии: -круглая, -круглая с фестончатым краем, -круглая с валиком по краю, -ризоидная, -амебовидная, -нитевидная, -складчатая, -неправильная, -концентрическая, -сложная.
2) Величина колонии:-карликовая (до 1мм), -мелкая (1-2 мм), -средняя (2-4 мм), -крупная (5 мм).
3) Степень прозрачности: -прозрачная, -полупрозрачная, -непрозрачная.
Исследование в отраженном свете (со стороны крышки) –
1) Цвет: -бесцветная, -мутная, -молочная, -пигментированная (фарфоровая, кремовая, желтая, синяя и т.д.)
2) Поверхность: -матовая, -блестящая, -влажная, -сухая, -бородавчатая, -шагреневая, -складчатая.
3) Рельеф:- плоская, -выпуклая, -каплеобразная, -с вдавленным центром, -с приподнятым центром, -с валиком по периферии.
3. Исследование под малым увеличением (со стороны крышки) –
1)Характер контура края: -ровный, -неровный (фестончатый, бахромчатый, расплывчатый)
2) Структура: -однородная, -мелкозернистая, -крупнозернистая –волокнистая.
4. Исследование бактериальной петлей -
1) Консистенция: -пастообразная, -вязкая, -слизистая, -плотная, -кожистая, -сухая, -хрупкая, -в виде пленки, -прилипающаяся, тянущаяся за петлей, -крошащаяся.
Микроскопия выделенных культур при окраске по Граму, для определения чистоты культуры
№
Увеличение_______ Описание_______________
|
№2
Увеличение_______ Описание_______________
|
№3
Увеличение_______ Описание_______________
|
Запишите результаты исследований в таблицу 1:
Таблица 1
Изучаемые свойства |
Культура |
||
№1 |
№2 |
№3 |
|
Форма колонии |
|
|
|
Величина |
|
|
|
Степень прозрачности |
|
|
|
Цвет |
|
|
|
Поверхность |
|
|
|
Рельеф |
|
|
|
Контур края |
|
|
|
Структура консистенция |
|
|
|
Морфология |
|
|
|
Окраска по Граму |
|
|
|
III этап бактериологического метода выделения чистой культуры микроорганизмов – возбудителей заболеваний человека
Для выделения и накопления чистой культуры колонии снимаем петлей и засеваем штрихом на поверхность скошенного агара в пробирке. Штрихи наносим со дна пробирки, не касаясь конденсата. При этом отсеваем только те колонии, в которых бактерии по морфо-тинкториальным свойствам соответствуют бактериям, выявленным при микроскопии исследуемого материала. Появление колоний других бактерий свидетельствует о контаминации (загрязнении) посева посторонней микрофлорой. Пробирки с посевами подписываем, указав дату, и помещаем в термостат при 37°С на 18-24 часа.
Оценку физиологических и биохимических особенностей полученных накопительных культур проводим методом высева на дифференциально-диагностические среды.
Результат посева на среду Эндо:
№1______________________________________________________
№2______________________________________________________
№3______________________________________________________
Результат посева на солевой агар 6,5% NaCl:
№1______________________________________________________
№2______________________________________________________
№3______________________________________________________
Проведите учет биохимических свойств выделенных культур, результаты внесите в таблицу 2.
Таблица 2
Результаты биохимической идентификации культур
|
Глюкоза |
Мальтоза |
Лактоза |
L-рамноза |
D-сорбитол |
Ксилоза |
Индол |
Мочевина |
H2S |
Подвижность |
Пигмент |
Рост на агаре с 6,5% NaCl |
Каталаза |
Культура №1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Культура №2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Культура №3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Проведите тест на каталазу
В каплю Н2О2 внести петлю бактериальной массы. Оцените результат:
№1______________________________________________________
№2______________________________________________________
№3______________________________________________________
Таблица 3

1