Основные вопросы темы

1. Гемоглобин , его химическая структура и свойства .

2. Количественное содержание гемоглобина в крови .

3. Синтез гемоглобина.

4. Цветной показатель, его вычисление, клиническое значение.

5. Разновидности гемоглобина, их физиологическая роль, клиническое значение.

6. Соединения гемоглобина с различными газами. Спектральный анализ крови.

7. Миоглобин, его значения и свойства.

8. Кривая диссоциации оксигемоглобина, ее значение.

9. Эффект Вериго-Бора.

Профильные вопросы для педиатрического факультета

1. Виды гемоглобина у детей и их физиологические особенности.

2. Количество гемоглобина и цветной показатель в различные возрастные периоды.

Практические работы

Опыт I. Определение гемоглобина методом Сали.

Цель опыта: Научиться определять содержание гемо­глобина колориметрическим способом.

Гематиновый метод Сали основан на образовании устойчи­вого раствора коричневого цвета при взаимодействии гемогло­бина с НС1.

Гемометр Сали представляет собой штатив, задняя стенка которого сделана из матового стекла. В штатив вставлены 3 пробирки одинакового диаметра. Две крайние пробирки за­паяны и содержат стандартный раствор солянокислого гематина; средняя-градуирована. Она предназначена для прове­дения исследования. Стандартный раствор солянокислого гематина по цвету соответствует 167 г/л гемоглобина.

Этот метод чрезвычайно прост и быстро выполним, но не­достаточно точен. При суммировании различных погрешностей этого метода ошибка при определении гемоглобина ± 30% (Кушаковский М. С. Клинические формы повреждения гемо­глобина — Л.; 1968). Поэтому в настоящее время в клинике этот метод должен быть заменен более точным.

Порядок проведения работы: в среднюю пробирку наливают 0,1 Н р-р НСl до нижней метки. Пипеткой берут 20 мм³ крови из пальца до метки, обтирают ее кончик ватой и выдувают кровь на дно пробирки так, чтобы верхний слой кислоты оставался не­окрашенным. Не вынимая пипетку, споласкивают ее кисло­той. После этого содержимое пробирки перемешивают и ставят в штатив на 5—10 мин. Это время необходимо для полного превращения Нb в солянокислый гематин. Затем к содер­жимому пробирки добавляют по каплям дистил. воду до тех пор, пока цвет полученного р-ра не будет совершенно одина­ков с цветом стандарта (добавляя воду, раствор перемешива­ют стеклянной палочкой).

Цифра на уровне верхней границы полученного р-ра, пока­зывает абсолютное содержание Hb в испытуемой крови, вы­раженное в г%. Значение следует перевести в г/л, т. е. ум­ножить на 10.

Опыт № 2. Измерение количества Hb эритрогемометром.

Цель опыта: Ознакомиться с определением гемоглобина эритрогемометром.

Определение количества Hb основано на фотоэлектрическом измерении степени поглощения света р-ром Hb. Определение ведется в зеленой части спектра.

Порядок проведения работы: пипеткой налить 5 мм³ 0,1% р-ра уксус­ной кислоты в чистую сухую пробирку и сюда же ввести 40, мкл исследуемой крови, взятой пипеткой для Hb. Содержимое пробирки перемешать без встряхивания. Затем содержимое пробирки налить в кювету с отметкой «Г». Вращая ручку диска эритрогемометра, добиться возвращения стрелки миллиампер­метра на «0» и на шкале «Hb» посмотреть содержание Hb в г%.

Опыт № 3. Вычисление цветного показателя.

Цель опыта: научиться способам расчета цветного по­казателя.

Цветной показатель позволяет оценить степень насыщения эритроцитов гемоглобином. В 1 мкл крови — 167-10 ^-6 г Hb, следовательно Hb в одном эритроците равно г или 33 пг

Величину 33 пг, составляющую норму содержания Hb в 1 эрит­роците, принимают за единицу и обозначают как цв. пок.

Практически цв. пок. вычисляют по следующей формуле:

где Hbх — найденный Hb в г%.

Существует и другая формула расчета цв. пок,

, где

Hbх — найденный Hb в г%,

Hb норм. — условно нормальное содержание Hb (16,67) в г%,

эр. х — найденное количество эритроцитов,

норм. эр. — условно нормальное кол-во эритроцитов (5 млн.)

При патологических состояниях цв. п. может быть больше 1 (гиперхромия) или ниже 1 (гипохромия).