
- •1. Область применения
- •2. Список сокращений
- •3. Общие положения
- •4. Показания к проведению бактериологической диагностики
- •5. Материально-техническое обеспечение метода
- •6. Лабораторная диагностика брюшного тифа и паратифов
- •7. Бактериологическое исследование
- •8. Бактериологическое исследование крови
- •9. Бактериологическое исследование испражнений
- •10. Бактериологическое исследование мочи
- •11. Бактериологическое исследование желчи
- •12. Бактериологическое исследование материала из розеол
- •13. Бактериологическое исследование костного мозга
- •14. Питательные среды и реактивы
- •15. Методы изучения ферментативных свойств
- •16. Биологические свойства возбудителей
- •16.1. Культурально-морфологические свойства
- •16.2. Ферментативные свойства
- •16.3. Антигенная структура и серологическая идентификация
- •17. Чувствительность к антибактериальным препаратам
- •18. Ускоренные методы выделения и идентификации возбудителей
10. Бактериологическое исследование мочи
Посев мочи производят для диагностики с первых дней заболевания и вплоть до выписки больного, а также с целью выявления бактерионосительства. Так как при тифе и паратифах выделение возбудителя с мочой происходит периодически и кратковременно, исследования мочи необходимо проводить повторно с промежутками 5-7 дней.
Следует строго придерживаться общих правил сбора мочи, изложенных в МУ 4.2.2039-05. Вне зависимости от способа получения мочи она должна быть доставлена в лабораторию в течение 2 ч. В крайнем случае допускается хранение мочи в течение ночи в холодильнике.
Следует помнить, что в зависимости от химического состава мочи бактерии в ней могут при хранении как отмирать, так и размножаться.
Увеличение срока сохранения материала может крайне затруднить интерпретацию результата.
Производят прямой посев мочи (или осадка после центрифугирования) без предварительного обогащения согласно Приказу МЗ СССР N 535 на плотные дифференциально-диагностические среды, рекомендуемые для сальмонелл, в том числе возбудителей брюшного тифа и паратифов. Параллельно нативная моча засевается в среды обогащения двойной концентрации в соотношении 1:1 или осадок мочи - в среды обычной концентрации. Посевы помещают в термостат при 37 град. С на 18-24 ч, а затем со среды обогащения производят высев на плотные дифференциально-диагностические среды. Колонии, выросшие на плотных средах, идентифицируют по культурально-ферментативным и серологическим свойствам.
11. Бактериологическое исследование желчи
(дуоденального содержимого)
Желчь собирают в три стерильные пробирки или стерильные одноразовые контейнеры раздельно по порциям A, B, C согласно МУ 4.2.2039-05 и доставляют в лабораторию.
Проводят исследование каждой порции (A, B, C) отдельно или готовят смесь из трех порций. Пробы засевают:
- на плотные дифференциально-диагностические среды (ВСА, Эндо, ЭМС или др.) в количестве 0,5 мл;
- в пробирку (флакон) с питательным бульоном в соотношении 1:10. Нет необходимости засевать желчь на среды обогащения, т.к. желчь сама является хорошей питательной средой для возбудителей брюшного тифа и паратифов.
Засеянные среды вместе с остатками желчи инкубируют при 37 град. С.
Через 18-24 ч просматривают посевы на плотных питательных средах (результаты роста на ВСА учитывают через 24 и 48 ч) и делают пересев подозрительных колоний на полиуглеводную среду.
Из питательного бульона производят высевы на плотные дифференциально-диагностические среды.
Из оставшейся желчи в случае отрицательного результата прямого посева делают повторные высевы на плотные дифференциально-диагностические среды через 18-24 ч и на 3, 5, 7 и 10 сутки.
Проводят идентификацию выросших микроорганизмов по культурально-морфологическим, ферментативным и серологическим свойствам.
12. Бактериологическое исследование материала из розеол
Бактериологическое исследование ("соскоб" с розеол) проводят при наличии хорошо выраженных розеол. Материал собирают асептически. Для этого участок кожи над розеолами обрабатывают 70%-м этиловым спиртом, затем протирают ватным тампоном, смоченным стерильным 0,9%-м раствором хлористого натрия, и осушают стерильным тампоном.
Материал для исследования (тканевую жидкость) получают путем скарификации кожи над розеолой с помощью скальпеля. На поврежденную кожу наносят 1-2 капли желчного бульона или изотонического раствора хлорида натрия, смешивают с выступившей тканевой жидкостью и собирают пастеровской пипеткой или аналогичным одноразовым стерильным устройством в пробирку с одной из жидких сред обогащения (желчный бульон, среда Рапопорт и др.). В лаборатории посев выдерживают при 37 град. С 18-24 ч с последующим высевом на плотные дифференциально-диагностические среды (Эндо, ЭМС, ВСА).
Дальнейшее исследование проводят, как при бактериологическом исследовании другого биологического материала.