II . Жирорастворимые витамины
1
. Качественная реакция на витамин А
ретинол (витамин А)
Реактивы: H2SO4 конц., ледяная CH3COOH, насыщенная FeSO4, раствор рыбьего жира в хлороформе в соотношении 1:5 или 0,05 % -й масляный раствор витамина А в хлороформе.
Х о д р а б о т ы.
1. К 3 каплям рыбьего жира в хлороформе добавляют 1 каплю H2SO4 конц. Появляется красно-фиолетовое окрашивание, переходящее в красно-бурое.
2. К 1–2 каплям рыбьего жира в хлороформе или 0,05 %-го раствора витамина А в хлороформе приливают 5–10 капель ледяной уксусной кислоты, насыщенной FeSO4, и 1–2 капли H2SO4 конц. Появляется голубое окрашивание, постепенно переходящее в розово-красное. Каротины дают при этой реакции зеленоватое окрашивание.
2 . Качественная реакция на викасол
викасол
Викасол является искусственно синтезированным аналогом витамина К1 и обладает биологической активностью последнего.
Реактивы: викасол – 0,05 %-й раствор, цистеин – 0,025 %-й раствор, NaOH – 10 %-й раствор.
Х о д р а б о т ы. В пробирку помещают 5 капель раствора викасола, добавляют 5 капель раствора цистеина и 1 каплю 10 %-го раствора NaOH. Появляется лимонно-желтое окрашивание.
III . Количественное определение витаминов
1
. Количественное определение витамина
Р в чае
рутин (витамин Р)
Рутин окисляется перманганатом калия, причем 1 мл 0,1 н раствора KMnO4 окисляет 6,4 мкг рутина.
Реактивы: KMnO4 – 0,05 н раствор, индикатор – индигокармин, чай (по указанию преподавателя).
Х о д р а б о т ы. Берут навеску чая (100 мг), переносят в стеклянный стаканчик и приливают 50 мл горячей дистиллированной воды. Проводят экстракцию в течение 5 мин. Затем 10 мл экстракта чая пипеткой переносят в коническую колбу, добавляют 10 мл дистиллированной воды и 5 капель индигокармина (появляется синее окрашивание). Содержимое колбы титруют 0,05 н раствором KMnO4 до появления устойчивой желтой окраски.
Определяют процентное содержание рутина по формуле:
,
где х – содержание витамина Р в препарате, г %; 3,2 – стандартный коэффициент пересчета; А – количество мл 0,05 н раствора KMnO4, пошедшего на титрование; V1 – объем, в котором растворена навеска чая (50 мл); V2 – объем экстракта, отобранный для анализа (10 мл); 100 – множитель для расчета процентного содержания; g – навеска, мг; 1000 – множитель для перевода микрограммов в миллиграммы.
Результат расчета переводят в мг %. Норма содержания витамина Р в чае составляет 30–50 мг %.
2 . Количественное определение витамина С
Реактивы: 2 % раствор HСl; 0,001 н раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола; исследуемый материал (лук, яблоко, картофель и т.д.).
Х о д р а б о т ы. Берут 1 г натертого на терке продукта и растирают в фарфоровой ступке с абразивом (кварцевым песком) до однородной массы. Затем добавляют 9 мл 2 % раствора НCl и перемешивают полученную смесь. Эту смесь отфильтровывают через бумажный фильтр. Пипеткой берут в колбочку 3 мл фильтрата и оттитровывают 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до слабого розового окрашивания, неисчезающего в течение 30 секунд.
Расчет. Известно, что N1V1=N2V2.
,
где x – количество мл 2,6-ДХФИФа, пошедшее на титрование пробы.
Тогда содержание витамина С в пробе:
m(c) = N2Мэ(c) = (0,001x/3)88 (г/л);
Мэ(с) = М/2 = 176/2 = 88 (г/моль).
В 10 мл экстракта будет содержаться: ((0,088x/3)(10/1000)) г витамина С.
В результате находим количество аскорбиновой кислоты в миллиграммах на 100 граммов продукта:
г/100
г продукта)=
(мг/100
г продукта).
Обычное содержание витамина С в 100 г различных продуктов:
– в капусте: 25–600 мг,
– в шиповнике: 500–1500 мг,
– в картофеле: 1–5 мг аскорбиновой кислоты (см. также табл. 9).
Таблица 9