Х о д р а б о т ы К 20 каплям нефильтрованной мочи в пробирке добавляют 10 %-й раствор гидроксида натрия до сильно щелочной реакции для осаждения фосфатов кальция и нагревают раствор до кипения. В присутствии кровяных пигментов осадок фосфатов окрашивается в красноватый цвет. В нормальной моче осадок белого цвета.

Указания к составлению отчёта Полученные результаты надо записать в виде таблицы:

Номер опыта	Название опыта	Реактивы	На чём основано определение? Предполагаемый результат, уравнение реакции	Наблюдения	Выводы

Ферменты, коферменты и витамины

Ферменты (от лат. fermentum – закваска), или энзимы, – биологические катализаторы белковой природы.

Ферменты обладают всеми свойствами белков, а также рядом специфических свойств, к которым относятся следующие.

1. Термолабильность. С одной стороны, скорость ферментативных реакций увеличивается с повышением температуры, с другой, при слишком высоких значениях температуры белковая часть фермента денатурирует, что приводит к резкому снижению или исчезновению каталитической функции.

2. Зависимость активности от pH среды. Для каждого фермента существует оптимум pH, при котором он наиболее активен. Большинство ферментов имеет максимальную активность в зоне pH вблизи от нейтральной точки. В сильно кислой или сильно щелочной среде хорошо работают лишь некоторые ферменты, например, пепсин (активирует гидролиз белка) имеет pH_опт = 1,5–2,5, аргиназа (ускоряет гидролиз аргинина) имеет pH_опт = 9,5–9,9.

3. Специфичность. По образному выражению Э. Фишера «Фермент подходит к субстрату как ключ к замку».

4. Влияние на каталитическую активность ферментов активаторов и ингибиторов. К числу агентов, повышающих активность ферментов, относятся ионы Mg²⁺, Mn²⁺, Zn²⁺, K⁺, Co²⁺, Cl^-, тормозят действие ферментов, как правило, ионы тяжелых металлов, а также ряд органических метаболитов и др.

Лабораторная работа № 7 «изучение общих свойств ферментов»

1. Термолабильность ферментов

Исследуемый материал: слюна, разведенная в 5 раз.

Реактивы: крахмал 1 %-й раствор, NaOH 10 %-й раствор, CuSO₄ 0,1 %-й раствор, йод 0,1 %-й раствор в 0,2 %-м растворе KI.

Х о д р а б о т ы. 1 мл слюны разводят в мерной пробирке в 5 раз. В пробирку отливают 2 мл разведенной слюны, кипятят 5–8 мин, после чего охлаждают. В 3 пробирки наливают по 10 капель 1 %-го крахмала. В первую добавляют 10 капель слюны, разведенной в 5 раз, во вторую – 10 капель воды (в качестве контроля), в третью – 10 капель кипяченой слюны. Все пробирки помещают в термостат или водяную баню при температуре 38 С на 10 мин. После этого с содержимым всех трех пробирок проделывают качественные реакции на крахмал и продукты расщепления.

Реакция на крахмал: к 5 каплям исследуемого раствора приливают 1 каплю раствора йода в йодистом калии. В присутствии крахмала появляется синее окрашивание.

Реакция Троммера (на продукты расщепления крахмала): к 5 каплям исследуемого раствора прибавляют 5 капель 10 %-го раствора NaOH и 5 капель 1 %-го раствора CuSO₄. Нагревают при 38 С в течение 15 мин. В присутствии глюкозы и мальтозы выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди. Напишите уравнение реакции.

Объясните полученные результаты. Как влияет температура на активность ферментов слюны?