Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МЕТОДЫ ЭНЗИМОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
257.02 Кб
Скачать

Определение этанола во вдыхаемом воздухе

Ход определения. Для определения этанола в выды­хаемом воздухе последний медленно барботируют через раствор, содержащий 2 мл 0,1 М глицин-NaOH буфер, рН 10, в котором растворены 1 мг алкогольдегидрогена­зы и 2 мг НАД [9]. Объем барботируемого воздуха равен 1 л (можно брать 2 или 3 л). Затем в этот раствор вносят 0,05 мл йоднитротетразолиевого фиолетового концент­рацией 0,25 мг/мл. Реакцию останавливают через 10 мин добавлением 1,0 мл 0,2 М соляной кислоты. Контрольной служит пробирка, содержащая аналогичные реагенты, через которую воздух не барботировали. Поглощение ра­створов регистрируют при 510 нм на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре.

Метод расчета. Расчет концентрации этанола в выде­ляемом воздухе проводят по формуле:

[ЭТАНОЛ] = -Дко„тр)-6,57^ мкг/ д>

где -Оопыт и Яконтр — поглощение растворов в опытной и контрольной пробах при 510 нм, усл. ед; V — общий объем барботируемого через индикаторный раствор выдыхаемого воздуха, л; 6,57 — коэффициент пересчета 1 мкг этанола на 1 л выдыхаемого воздуха.

При наличии этанола в выдыхаемом воздухе раствор окрашивается в красный цвет, окраска которого при фик­сации соляной кислотой может сохраняться в течение 4- 6 недель при сохранении в темноте при +4°С.

Выводы.