
- •Тема 2.2: «Возбудители раневых анаэробных инфекций. Клостридии столбняка и клостридии газовой анаэробной инфекции». План
- •Клостридии столбняка
- •Ферментативные свойства.
- •Механизм заражения, патогенез, клиника столбняка, иммунитет.
- •Алгоритм проведения биопробы (реакция нейтрализации на мышах) при диагностике столбняка. Цель постановки данной реакции для лабораторного диагноза столбняка.
- •Клостридии газовой гангрены
- •Культуральные свойства.
- •Алгоритм проведения биопробы (реакция нейтрализации на мышах) при диагностике газовой гангрены. Цель постановки данной реакции для определения вида возбудителя.
Культуральные свойства.
Возбудитель газовой анаэробной инфекции – облигатный анаэроб, растет при температуре 370С и рН среды 7,2 –7,4.
Среда Вильсон-Блера (столбиком) – черные колонии с почернением среды и газ (пузырьки или разрывы среды).
Среда Китта-Тароцци – равномерное помутнение и обильное газообразование.
Молоко по Тукаеву – характерное свертывание молока в виде сгустков.
Высокие столбики сахарного агара – колонии в глубине столбика имеют вид дисков и чечевицы (S-формы) или комочков ваты (R-форма).
Среда Цейсслера (кровяной сахарный агар) – серо-зеленые колонии с зоной гемолиза.
Ферментативные свойства. Cl. perfingens ферментирует лактозу, глюкозу, мальтозу, сахарозу до кислоты и газа, не ферментирует маннит, образует, не образует индол и образует сероводород, створаживает молоко, желатин разжижают.
Токсины и ферменты патогенности.
Cl. рerfingens выделяют сложный токсический комлекс, состоящий из нескольких токсинов (a,b,e,t) подразделяется на 6 сероваров (A, B, C, D,E, F), из которых А- серовар является основным возбудителем газовой гангрены, а серовар D нередко вызывает пищевые токсикоинфекции.
Cl. рerfingens продуцирует лецитиназу, гиалуронидазу, желатиназу, коллагеназу и другие ферменты патогенности.
Механизм заражения, патогенез, клинические формы газовой анаэробной инфекции, иммунитет. Профилактика.
Источники инфекции. В окружающую среду клостридии газовой гангрены попадают из кишечника животных, чаще травоядных (при плохих санитарно – гигиенических условиях их можно обнаружить на коже человека).
Пути передачи и входные ворота. При повреждении тканей, особенно при обширных рваных ранах, и попадании в рану комков земли, обрывков одежды, осколков снарядов может развиться заболевание. Газовая гангрена может возникнуть после операции, инъекций лекарств, внебольничных абортов.
Патогенез. Попавшие в рану споры или вегетативные формы клеток размножаются и выделяют экзотоксин. В процессе размножения клостридии некротизируют здоровую ткань. Особенно интенсивно процесс развивается в мышечной ткани, так как там находится большое количество гликогена, который является хорошей средой для развития анаэробов. Наиболее часто инфекция возникает при глубоких ранах, когда образуются «слепые карманы», которые плохо снабжаются кислородом и создаются благоприятные условия для развития клостридий. Выделяющиеся экзотоксины вызывают явления интоксикации.
Иммунитет. У человека имеется естественный иммунитет, который возникает в результате наличия в кишечнике клостридий. После перенесенного заболевания остается непрочный иммунитет. Более стойкий иммунитет создается при иммунизации анатоксином.
Профилактика осуществляется хирургической обработкой раны (иссечение, разрезы).
Специфическая профилактика:
- поливалентная противогангренозная антитоксическая сыворотка;
- пентаанатоксин;
- секстаанатоксин.
Методы микробиологической диагностики.
Материал для исследования: кусочки пораженных тканей, раневое отделяемое, кровь, инородные тела в ране, перевязочный и шовный материал.
Методы лабораторной диагностики:
1) Бактериологический – основной.
2) Микроскопический.
3) Биопроба.
4) Серологический.
Схема выделения и идентификации газовой анаэробной инфекции.
I этап
1. Из материала делают мазок, окрашивают, микроскопируют и делают предварительный ответ.
2. Материал засевают на среду Китта – Тароцци (среда накопления для анаэробов) и инкубируют при температуре 370 С 8 – 24 часа.
II этап
1. При наличии признаков роста делают пересев из среды Китта – Тароцци на среду Цейсслера с целью получения изолированных колоний и инкубируют при температуре 370 С 24 часа в анаэробных условиях.
III этап
1. Отбирают типичную для выделяемого вида микроорганизмов изолированную колонию, обводя её стеклографом со стороны дна чашки.
2. Из части ее делают мазок, окрашивают и микроскопируют (должны быть однородные клетки).
3. Оставшуюся часть этой колонии пересевают на среду Китта – Тароцци (для выделения и накопления чистой культуры) и инкубируют при температуре 370 С 24 часа.
IVэтап
1. Проверяют однородность чистой культуры, т.е. делают мазок со среды Китта-Тароцци, окрашивают по Граму и микроскопируют.
2. Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса в анаэробных условиях.
3. Биопроба и реакция нейтрализации токсина противогангренозными антитоксическими сыворотками (на белых мышах, внутрикожно).