Тема 2.2: «Возбудители раневых анаэробных инфекций. Клостридии столбняка и клостридии газовой анаэробной инфекции». План

1. Клостридии столбняка. Морфология и биохимические свойства. Культивирование.

2. Токсинообразование.

3. Механизм заражения. Патогенез и клиника столбняка.

4. Иммунитет. Серопрофилактика и серотерапия. Активная иммунизация.

5. Клостридии газовой анаэробной инфекции. Полимикробный характер инфекции.

6. Морфология, биологические свойства возбудителей.

7. Токсины и ферменты патогенности.

8. Механизм заражения. Патогенез и клинические формы газовой гангрены.

9. Иммунитет. Профилактика.

Клостридии столбняка

Таксономия. Семейство Bacillaceae, род Clostridium объединяет до100 видов

одним из которых является патогенный вид Cl.tetani.

Открыл клостридии столбняка А. Николайнер (1884), а в чистой культуре получил С. Китазато (1889).

Морфология. Клостридии столбняка представляют крупные палочки с круглыми спорами, располагающиеся на конце что придает им вид барабанных палочек. Капсул не образуют, имеют подвижные жгутики – перитрихи. Располагаются в мазке беспорядочно, грамположительны.

Культуральные свойства. Возбудитель столбняка – облигатный анаэроб, растет при температуре 37⁰С и рН среды 6,8 –7,4.

Среда Цейсслера – колонии прозрачные или сероватые, с компактным центром, шероховатые, с нитевидными отростками и зоной гемолиза. Высокие столбики сахарного агара – нежные колонии в виде комочков ваты (R-формы) или в виде зерен чечевицы (S-формы).

Столбики ВСА (среда Вильсон - Блера) – вызывают почернение среды.

Среда Китта - Тароцци – образуют муть, газ и своеобразный запах.

Ферментативные свойства.

Cl. tetani ферментирует, не ферментирует глюкозу до кислоты и газа, не ферментирует лактозу, маннит, мальтозу, сахарозу, не образует индол и сероводород, створаживает молоко, желатин разжижают. Cl. tetani образует фирилизин.

Токсинообразование. Cl. tetani вырабатывает сильный экзотоксин. Клостридии столбняка содержат соматический О - и Р – антиген, по которому выделяют 10 сероваров, продуцирующий идентичный по антигенным свойствам тетаноспазмин (нейротоксин) и тетанолизин (тетаногемолизин). Тетаноспазмин поражает двигательные центры спинного мозга и возникают характерные для столбняка тонические судорожные сокращения поперечно – полосатой мускулатуры. Тетанолизин лизирует эритроциты, проявляет кардиотоксическое и летальное действие.

Cl.tetani вызывает у человека столбняк – это тяжелая раневая инфекция, характеризующаяся поражением нервной системы, приступами тонических и клонических судорог.

Механизм заражения, патогенез, клиника столбняка, иммунитет.

Источники инфекции. Возбудители инфекции широко распространены в природе. Животные являются носителями микроорганизмов, поэтому

Cl. Tetani обнаруживают в почве, куда они попадают из кишечника животных и человека.

Пути передачи и входные ворота. Входными воротами является кожа и слизистые оболочки. Столбняк является раневой инфекцией с глубокой травматизацией тканей, в которые заносится земля, инородные тела.

Патогенез. Проникнув в глубину ткани, споры на месте внедрения начинают прорастать в вегетативные формы. Размножаясь, столбнячная палочка выделяет экзотоксин. Столбнячный токсин избирательно действует на клетки центральной нервной системы и обусловливает спазм двигательных мышц. У человека наблюдается нисходящий столбняк.

Клиника столбняка. Проявление столбняка у людей настолько типично, что диагноз заболевания ставится без особого труда на основании клинической симптоматики. Наиболее ранними признаками являются судороги жевательных мышц, затем начинается спазм лицевой и затылочной мускулатуры. Появляется «сардоническая улыбка». Затем сокращаются мышцы живота и нижних конечностей. Смерть наступает от асфиксии вследствие спазма дыхательной мускулатуры.

Иммунитет. Искусственный антитоксический иммунитет развивается после введения анатоксина.

Методы микробиологической диагностики.

Материал для исследования: содержимое раны, инородные тела (в ране), хирургический перевязочный и шовный материал, кровь, почва, секционный материал.

Методы лабораторной диагностики:

1. Бактериологический – основной

2. Микроскопический

3. Биологический

4. Серологический

5. Кожно-аллергический.

Специфическая терапия:

- противостолбнячная антитоксическая сыворотка;

- противостолбнячный иммуноглобулин человеческий;

- антибиотики с учетом антибиотикограммы.

Специфическая профилактика:

- столбнячный анатоксин;

- дифтерийно-столбнячный анатоксин;

- АКДС-вакцина;

- секстаанатоксин.

Экстренная активная иммунизация:

у привитых – 0,5мл столбнячного анатоксина;

у непривитых – 1мл столбнячного анатоксина + 250 МЕ человеческого иммуноглобулина + 3000 МЕ противостолбнячной сыворотки.

Схема выделения и идентификации клостридий столбняка.

I этап

1. Из материала делают мазок, окрашивают, микроскопируют и делают предварительный ответ.

2. Материал засевают на среду Китта – Тароцци (среда накопления для анаэробов) и инкубируют при температуре 37⁰ С 8 – 24 часа.

II этап

1. При наличии признаков роста делают пересев из среды Китта – Тароцци на среду Цейсслера с целью получения изолированных колоний и инкубируют при температуре 37⁰ С 24 часа в анаэробных условиях.

III этап

1. Отбирают типичную для выделяемого вида микроорганизмов изолированную колонию, обводя её стеклографом со стороны дна чашки.

2. Из ¼ части колонии делают мазок, окрашивают и микроскопируют (должны быть однородные клетки).

3. Оставшуюся часть этой колонии пересевают на среду Китта – Тароцци (для выделения и накопления чистой культуры) и инкубируют при температуре 37⁰ С 24 часа.

IVэтап

1. Проверяют однородность чистой культуры, т.е. делают мазок со среды Китта-Тароцци, окрашивают по Граму, микроскопируют.

2. Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса → в анаэробных условиях.

3. Биопроба и реакция нейтрализации столбнячного токсина антитоксической противостолбнячной сывороткой.