- •1 Предмед микробиоогии,основные отрасли микробиологии, задачи медицинской микробиологии. История развития микробиологии, основные этапы. Выдающиеся ученые-микробиологии.
- •3 Бактерии, общая характеристика,основные формы. Строение бактериальной клетки,характеристика и функции основынх и клеточных структур.
- •4 Защитные формы бактерии.Их характеристика. Методы изучения.
- •5 Подвижность мокроорганизмов. Виды бактерии по расположению жгутиков. Методы их изучения.
- •6 Общая характеристика спирохет. Строение и форма клетки, характер движения. Основные группы спирохет, патогенных для человека.
- •7 Общая характеристик риккетсий: классификация, величина, строение, полиморфизи.
- •8 Ультраструктура и биологическое особенности вирусов.Элементарные тельца и внутриклеточные включения
- •9 Микроскопический метод исследования,его значение для лд. Виды микроскопии.
- •10 Простые и сложные методы окраски. Практическое значение. Основные этапы приготовления окрашенных микропрепаратов.Цели и методы фиксации.
- •11 Химические свойства микробной клетки, его начение для жизнедеятельности клетки. Свойства бактерий в зависимости от химического состава клетки.
- •12 Питание микроогранизмов. Типы питания. Аутотрофы и гетеротрофы. Механизм поступления питательных веществ в микробную клетку.
- •13 Дыхание микроогранизмов. Типы дыхания. Методы культивирования анаэробов.
- •16 Этапы приготовления питательных сред, правила хранения, контроль качества готовых питательных сред. Стерилизация простых и сложных пит. Сред.
- •17 Принципы и методы культивирования микроорганизмов . Методы культуральных свойств микроорганизмов. Характеристика роста бактерий на жидких и плотных питательных средах
- •18 Понятие о чистой культуре, методы выделения чистой культуры и ее идентификация. Поняте о колонии, штамме, клоне. Значение бактериологического метода исследования.
- •19 Микрофлора почвы и воздуха. Санитарно-показательные мокроорганизмы. Общее микробное число воздуха. Почва и воздух как факторы передачи инфекционных заболеваний
- •20 Нормальная микрофлора организма человекаа. Понятие о дисбактериозе.
- •21 Влияние физических факторов окружающей среды на микроорганизмы. Использование метода лиофильного высушивания в микробиологической практике.
- •22 Стерилизация, виды стерилизации. Методы стерилизации, применяющиеся в бактериологической лаборатории, аппаратура для стерилизации, тесты для проверки температурного режима.
- •23 Влияние химических факторов на микроорганизмы. Дезинфекция, ее виды. Основные группы дезинфицирующих веществ. Понятие об асептике и антисептике.
- •24 Влияние биологических факторов микроорганизмы. Работа л. Пастера и и.И. Мечникова по изучению микробного антагонизма.
- •25 Морфология, химический состав, биологические свойства фагов. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. Вирулентные и умеренные фаги. Профаг. Явление лизогении.
- •26 Методы выделения, обнаружения и титрования фага. Практическое применение фагов.
- •27 Антибиотики, определение. История открытия. Классификация антибиотиков по источникам и методам получения. Спектр действия антибиотиков. Механизм действия антибиотиков. Антибиотикорезистентность.
- •28 Определение понятие «Инфекционный процесс», «инфекционное заболевание». Характерные признаки и периоды инфекционного заболевания. Формы проявления инфекции. Виды генерализованной инфекции.
- •29 Роль микроорганизмов в развитии инфекции. Свойства патогенных микробов. Факторы вирулентности. Входные ворота.
- •30 Токсины микробов, их виды, сравнительная характеристика. Получение токсинов. Единицы силы токсина.
- •33)Неспецифические факторы иммунитета
- •Диагностикум стандартный препарат, используемый в качестве антигена при серологических исследованиях.
- •38) Ориентировочная реакция агглютинации (ра)
- •40) Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга, рпга)
- •48.Эшерихиозы.Методы лабораторной диагностики. Основные этапы бактериологического метода исследования, его особенности. Реакция микро- и макро агглютинации.Диагностическое значение.
- •51.Шигеллы
18 Понятие о чистой культуре, методы выделения чистой культуры и ее идентификация. Поняте о колонии, штамме, клоне. Значение бактериологического метода исследования.
Методы выделения чистых культур микроорганизмов
Чистой культурой называют скопление микробов одного вида на плотной или в жидкой питательной среде.
Существует ряд методов выделения чистой культуры в зависимости от свойств изучаемого материала и цели исследования. Обычно чистые культуры получают из изолированных колоний - обособленных скоплений микробов на плотной среде. Считают, что чаще всего колония развивается из одной микробной клетки, т. е. является чистой культурой этого микроорганизма.
Этапы выделения чистой культуры:
1-й день - получение изолированных колоний. Каплю исследуемого материала петлей, пипеткой или стеклянной палочной наносят на поверхность агара в чашке Петри. Шпателем втирают материал в поверхность среды; не прожигая и не перевертывая шпателя, производят посев на 2-й, а затем на 3-й чашке. При таком посеве на 1-ю чашку приходится много материала и соответственно много микробов, на 2-ю меньше и на 3-ю еще меньше.
Можно получить изолированные колонии при посеве петлей. Для этого исследуемый материал эмульгируют в бульоне или изотоническом растворе натрия хлорида.
2-й день - изучают рост микробов на чашках. В 1-й чашке обычно бывает сплошной рост - выделить изолированную колонию не удается. На поверхности агара во 2-й и 3-й чашке вырастают изолированные колонии. Их изучают невооруженным глазом, с помощью лупы, при малом увеличении микроскопа и иногда в стереоскопическом микроскопе (см. главу 31). Нужную колонию отмечают со стороны дна чашки и пересевают на скошенный агар. Посевы ставят в термостат.
Внимание! Пересевать можно только изолированные колонии.
3-й день - изучают характер роста на скошенном агаре. Делают мазок, окрашивают его и, убедившись в том, что культура чистая, приступают к ее изучению. На этом выделение чистой культуры заканчивается. Выделенная из определенного источника и изученная культура, называется штаммом.
При выделении чистой культуры из крови (гемокультуры) ее предварительно "подращивают" в жидкой среде: 10-15 мл стерильно взятой крови засевают в 100-150 мл жидкой среды. Так поступают потому, что в крови обычно мало микробов. Соотношение засеваемой крови и питательной среды 1:10 не случайно - так достигается разведение крови (неразведенная кровь губительно действует на микроорганизмы). Колбы с посевом ставят в термостат. Через сутки (иногда через большее время в зависимости от выделяемой культуры) из содержимого колб делают высевы на чашки для получения изолированных колоний. При необходимости повторяют высевы с интервалами 2-3 дня.
При выделении чистой культуры из мочи, промывных вод желудка и других жидкостей их предварительно центрифугируют в асептических условиях и засевают осадок. Дальнейшее выделение чистой культуры производят обычным способом.
Для выделения чистой культуры широко применяют элективные среды.
В ряде методов для получения чистых культур используют биологические особенности выделяемого микроба. Например, при выделении спорообразующих бактерий посевы прогревают при 80° С 10 мин, убивая этим вегетативные формы; при выделении возбудителя туберкулеза, устойчивого к кислотам и щелочам, с помощью этих веществ посевной материал освобождают от сопутствующей флоры; для выделения пневмококка и палочки чумы исследуемый материал вводят белым мышам - в их организме, высокочувствительном к данным возбудителям, эти микробы размножаются быстрее других.
В научно-исследовательской работе, особенно при генетических исследованиях, необходимо получать культуры заведомо из одной клетки. Такая культура называется клон. Для ее получения чаще всего пользуются микроманипулятором - прибором, снабженным инструментами (иглами, пипетками) микроскопических размеров. С помощью держателя под контролем микроскопа их вводят в препарат "висячая капля", извлекают нужную клетку (одну) и переносят ее в питательную среду.
Чистая культура микроорганизмов-культура, содержащая микроорганизмы одного вида
Клон-генетические однородная популяция микроорганизмов полученная из одной микробной клетки при прямой ее изоляции
Колония-обособленное скопление микроорганизмов на плотной среде
Штамм чистая культура микроорганизмов, веделенная изопределенного источника в определенное время.
Бактериологический метод-выявление чистой культуры из исследуемого материала и изучение его св-в:морфология,тинкториальных, культуральных, ферментативных, антигенных с целью ее идентификации (опред. Вида)