Окраска препарата по граму

(Видоизменение окраски Грама по А.И.Синеву)

Цель: научиться красить препарат по Граму.

Оснащение: препарат, бумаги по Синеву, р-р Люголя,

96% спирт, фуксин Пфейффера, пинцет,

лоток с мостиком, вода, песочные часы.

Алгоритм манипуляций:

1. На препарат положить бумажку по Синеву и нанести несколько капель воды. Окрасить 1-2 мин. снять бумагу.

2. Не промывая водой, налить р-р Люголя до почернения (1 мин), затем краситель слить.

3. Не промывая водой, опустить препарат в стаканчиках со спиртом на 1-2 мин.

4. Промыть препарат водой

5. Докрасить фуксином Пфейффера 3 мин. промыть водой, высушить.

6. Микроскопировать с помощью имерсионной системы.гр + окрашиваются в фиолетовый цвет , гр. – в красный

Возможные ошибки:

1. Нарушение последовательности окраски

2. Интенсивная окраска из-за передержки красителя

3.Правильность обработки спиртом

Окраска препарата простым методом

Цель: изучить метод окраски препарата

простым методом

Оснащение: предметное стекло, культура микробов,

краски, вода, спиртовка, бактериальная

петля

Техника выполнения: I. Нанести культуру микробов на

поверхность предметного стекла.

II. Высушить мазок при комнатной t

III. Зафиксировать в пламени горелки,

проведением предметного стекла мазком вверх через

пламя спиртовки 3 раза (5-6)

IV. Нанести краску на мазок, держать водный фуксин 1-2 мин, или метиленовый синий ( 3-5мин)

V. Промыть струей воды, до тех пор пока вода не станет бесцветной .

VI. Высушить мазок на воздухе .

VII. Микроскопия мазка.

Возможные ошибки:

1. Неточно выдержано время окраски мазка

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТА ИЗ КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ, ВЫРАЩЕННЫХ НА ЖИДКОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ

Цель: изучить методику приготовления препарата

Оснащение: штатив, предметные стекла, физ.раствор,

бактериальная петля, спиртовка, суточная

культура микробов, выращенная на жидкой

питательной среде.

Техника выполнения :

1. Взять чистое обезжиренное стекло.

2. Нанести культуру микроба с жидкой питательной среды прожженной бактериальной петлей на центр предметного стекла, распределить равномерно по поверхности стекла в форме 2-х копеечной монеты.

3. Высушить мазок на воздухе.

4. Фиксировать в пламени спиртовки 6 сек.

5. Далее по схеме окраски.

Возможные ошибки:

1. Неправильно проведена стерилизация бактериальной петли.

2. Неправильно сделан мазок.

ИЗУЧЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ БАКТЕРИЙ МЕТОДАМИ «ВИСЯЧЕЙ КАПЛИ» И «РАЗДАВЛЕННОЙ КАПЛИ»

ЦЕЛЬ: изучение методики определения подвижности

бактерий

Оснащение : предметные стекла, стекла с луночкой,

покровные стекла, вазилин, суточная культура

микробов.

Техника выполнения:

а) Приготовление висячей капли:

1. Нанести на края луночки небольшой слой вазелина.

2. Нанести каплю исследуемого материала на покровное стекло.

3. Накрыть покровное стекло предметным стеклом с лункой.

4. Перевернуть стекло – покровным стеклом вверх.

5. Положить это стекло на столик для микроскопии.

б)Приготовление раздавленной капли:

1. На предметное стекло нанести каплю культуры микроба нагретой до 30-35⁰ или внести культуру микроба в теплый физ.раствор смешать.

2. Покрыть ее покровным стеклом, опуская стекло медленно не оставляя пузырьков воздуха.

3. Положить готовый препарат на предметный столик для микроскопии.

Возможные ошибки:

1. Неправильно приготовлена «висячая капля»

2. Неправильно проведена микроскопия.