5.6. Процедура биотестирования

Заранее подготовленные чашки Петри заполняются увлажненным кварцевым песком или иным

инертным субстратом на 90% их объема. Песок выравнивают и слегка уплотняют до полного

удаления пустот.

На песок помещают 10 - 30 семян растений, заглубляют на их толщину так, чтобы поверхность

семян была на одном уровне с поверхностью субстрата. Повторность опыта трехкратная для каждого

варианта обработки (контроль, наноматериал, традиционный аналог).

Сначала проводят посев контрольных семян, затем опытных с минимальными интервалами по

времени. Перерывы в работе не допускаются.

Между песком и стенкой чашки вставляют этикетку с наименованием эксперимента.

Подготовленные таким образом чашки Петри помещают в термостат на проращивание.

Условия проращивания:

- температура постоянная +20 +/- 2 °C;

- отсутствие освещенности;

- влажность воздуха постоянная - 80 - 90%;

- экспозиция 7 (14) дней.

Необходимая влажность воздуха создается за счет испарения воды с поддона, с чашек Петри и

непосредственно побегами. При необходимости проводят дополнительное опрыскивание

дистиллированной водой при помощи пульверизатора.

По истечении времени экспозиции чашки Петри достают из термостата, проводят необходимые

наблюдения, исследования и замеры параметров проростков.

5.7. Оценка и интерпретация результатов биотестирования

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

После соответствующей экспозиции чашки извлекают из термостата, расставляют согласно

вариантам обработки и проводят визуально выбраковку. Выбраковываются образцы, отличающиеся

от массива образцов в варианте. Если "нетипичных" чашек две и более на вариант - вариант

бракуется полностью.

Далее проводятся наблюдения и замеры, а данные замеров записывают в соответствующие

таблицы:

1. Количество взошедших, нормально развитых побегов. Взошедшим считается побег длиной 5

мм и более, у которого первый настоящий лист занимает не менее половины колеоптиля.

Нормальные побеги не должны иметь видимых морфологических изменений.

2. Измеряют длину корней, исключая из ряда данных пять наименьших значений, включая и

непроросшие семена.

3. Взвешивают отдельно корни растений.

Результаты измерений для каждого показателя в каждом варианте обработки выстраиваются в

виде вариационного ряда и проводится оценка достоверности различия групп с использованием t-

критерия Стьюдента. Различие признается достоверным при уровне значимости P < 0,05.

Затем рассчитывается средняя длина и масса корешков растений для каждой пробы.

Если, по сравнению с контрольными, семена в исследуемых образцах не проросли или же

длина корней в процентах от контрольного значения менее 70%, то образец наноматериала считается

токсичным.

При длине корней в опыте свыше 120% от контроля предполагается, что исследуемый образец

обладает стимулирующими свойствами.