5.3. Характеристика тест-систем

В качестве индикаторов токсичности наноматериалов используются проростки семян

следующих высших растений: пшеницы, ржи, ячменя, овса, кукурузы, редиса красного круглого, белой

горчицы, лука, фасоли обыкновенной.

Семена тест-культур должны принадлежать к одному виду и сорту, соответствовать 1 классу,

быть одного года урожая, не обработанными протравителями и удостоверенными соответствующими

документами.

5.4. Условия тестирования

Биотестирование проводится в лабораторных условиях в соответствии с ГОСТ 15150.

Помещение не должно содержать токсичных паров и газов.

Температура окружающего воздуха в лаборатории от +18 до 25 °C. Относительная влажность

воздуха 80 +/- 5%. Атмосферное давление 84 - 106 кПа (630 - 800 мм рт. ст.). Температура для

биотестирования (20 +/- 2) °C.

Освещение помещения естественное или искусственное, не ограничивается особыми

требованиями.

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

5.5. Подготовка к проведению тестов

Для проведения биотестирования необходимо предварительно подготовить посуду,

пробоотборники, места хранения отобранных проб, а также рабочие места для обработки

доставленных в лабораторию проб наноматериалов и исследования их на токсичность. Все

процедуры предварительной подготовки должны исключать попадание токсичных, органических и

каких-либо других веществ из окружающих предметов или среды в исследуемые образцы.

5.5.1. Подготовка посуды для биотестирования

Термостаты перед проведением исследований моют горячей водой с моющими средствами и

дезинфицируют 1% раствором марганцевокислого калия.

Чашки Петри моют и ополаскивают чистой водой. При необходимости их стерилизуют в

сушильном шкафу при температуре 130 °C в течение одного часа или кипятят в воде 40 минут.

Вся грязная посуда, использованная при отборе проб, в процессе подготовки проб и проведения

биотестирования должна подвергаться стерилизации кипячением в течение одного часа. Посуду для

отбора и подготовки проб желательно подвергать автоклавированию при 121 °C и давлении 1,05

кг/кв. см в течение 15 минут.

5.5.2. Подготовка субстрата для проращивания семян высших растений

В качестве субстрата используют кварцевый песок или иной инертный субстрат. Кварцевый

песок промывают, просеивают на ситах для получения фракции 0,5 - 2,0 мм, высушивают и

прокаливают в сушильном шкафу при температуре 130 °C в течение одного часа.

Непосредственно перед проведением работы песок увлажняют до требуемой влагоемкости:

- на 60% от полной влагоемкости при 7-ми суточной экспозиции;

- до полной влагоемкости при 14-ти суточной экспозиции.

Влагоемкость песка определяется заранее по ГОСТ 12038-84. Если используются разные

субстраты, то для каждого из них заранее определяется влагоемкость и, в соответствии с ней,

проводят увлажнение субстрата.

Этикетки нарезаются из плотной бумаги и подписываются простым карандашом или шариковой

ручкой. На них указывается наименование эксперимента.

5.5.3. Приготовление исследуемых проб наноматериалов

Внесение исследуемого образца в инертный субстрат (кварцевый песок) осуществляется в

результате диспергирования предварительно подготовленной навески в таком объеме

дистиллированной воды, который бы соответствовал 60% и 100% влагоемкости субстрата из расчета

на 1 кг.

Рассчитанные навески нерастворимых в воде наноматериалов диспергируют в минимальном

количестве дистиллированной воды, обрабатывают ультразвуком 15 мин. при 10 КГц для

повышения дисперсности пробы, добавляют такой объем воды, который бы соответствовал 60% и

100% влагоемкости из расчета на 1 кг субстрата и оставляют на сутки при интенсивном

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

перемешивании на магнитной мешалке. Полученную взвесь используют в биотестировании на

токсичность.

Нанесение исследуемого образца на поверхность семян проводят путем легкого встряхивания

семян в бюксе с нужным количеством образца в течение 30 секунд. Для вещества с низкой

прилипающей способностью добавляют 1 куб. см дистиллированной воды.

5.5.4. Подготовка семян

Предназначенные для проращивания семена предварительно прогревают при температуре 30 -

40 °C в течение 5 - 7 суток в термостате.