20. Методы микробиологической диагностики туляремии. Характеристика перечисленных методов.

Серологический метод: РА с туляремийным корпускулярным диагностикумом. Сыворотку разводят в ИХН от 1:25 до 1:400. В каждую пробирку с 0,5 мл разведенной сыворотки добавляют 0,5 мл диагностикума. Пробирки в термостат на 2ч. Предварительно учитывают результат через 2 ч, окончательно – после пребывания при комнатной температуре через 18-20 ч . Положит – обнаружение агглютининов

+РНГА с сывороткой больного и туляремийным эритроцитарным диагностикумом.

+ИФА

Аллергическая проба: внутрикожный тулярин вводят 0,1 мл внутрь кожи ладонной части предплечья. Результат учитывают через 24-48 ч. Наличие инфильтрата и гиперемии диаметром более 1 см рассматривается как положительная реакция.

Биологический: материал – кровь, пунктат из бубона, соскоб из язвы, налет из зева, мокрота. Материал вводят 3-5 мышам или 2 морским свинкам подкожно, накожно, внутрибрюшинно и через рот. Если животные на протяжении 7-15 дней не погибают, их забивают и вскрывают. При туляремии обнаруживают соответствующие патологоанатомические изменения. Кровь, костный мозг, участки лимфатических узлов сеют на среды: желточную, глюкозоцистиновый агар с кровью и антибиотиками. Выделенную ЧК идентифицируют по морфологическим, антигенным и биологическим свойствам, определяют чувствительность к антибиотикам.

Вопрос №21. Реакция Асколи. Компоненты, постановка, учет результатов.

Исследуемым материалом могут служить: трупный материал животных,кожа и изделия из нее, шерсть.

Исследуемый материал измельчают, заливают 10-20 кратным объемом ИХН и кипятят в течение 10-45 минут и выдерживают 16-20 ч при температуре 6-14. Затем жидкость фильтруют и полученный экстракт в узкой пробирке осторожно наслаивают на преципитирующую сибиреязвенную сыворотку, которую получают из крови животных, гипериммунизированных вакциной или убитой культурой возбудителя.

Параллельно ставят контроли вытяжки и преципитирующей сыворотки, с заведомо положительной и отрицательной пробой, с нормальной лошадиной сывороткой.

На границе соприкосновения 2 жидкостей в течение 1-5 минут появляется кольцо белого цвета (преципитат) , что расценивают как положительную реакцию. При появлении преципитата позже 10 мин реакцию считают неспецифической.

Вопрос №22. Характеристика возбудителя чумы

Морфология. Возбудитель - Yersinia pestis относится к роду иерсиниа. Представляет собой неподвижную, закругленную на конце овоидную палочку. Возбудитель чумы не образует спор, имеет капсулу, грамотрицателен, легко окрашивается анилиновыми красителями (более интенсивно на концах - биполярное окрашивание). Жгутики отсутствуют.

Культуральные свойства: факультативный анаэроб. Хорошо растет на обычных жидких и питательных средах (МПА, МПБ) при температуре 25-30 °С. Для стимуляции роста микроба чумы целесообразно прибавлять в питательную среду сульфит натрия, гемолизированную кровь.

На агаре образуют R- колонии. Сначала появляются колонии в виде битого стекла, а затем появляются колонии, которые имеют вид кружевных платочков.

На жидких средах растут в виде пленки, от которой спускаются нити. На дне образуется хлопьевидный осадок.

Б/х свойства:

• восстанавливают нитриты в нитраты,

• ферментируют с образованием пленки глюкозу, мальтозу, галактозу, арабинозу и маннит,

• продуцируют дегидразы и уреазы.

• Желатин не разжижают,

• индол и сероводород не образуют.

Антигенные свойства:

О-антиген (эндотоксин)

F1-антиген чумы - капсульный антиген.

V/W (Vi)-антиген чумы 

Вопрос №23. Антраксин.

Препарат для выявления специфической сенсибилизации организма к сибиреязвенным АГ путем постановки внутрикожной аллергической пробы. Представляет собой гидролизат вегетативных форм сибиреязвенных бацилл. Действующее начало препарата – белково -полисахаридно-нуклеиновый комплекс, который извлекается из бацилл при гидролизе.

Антраксин фасуют в ампулы по 1 мл. Реакцию ставят на внутренней поверхности предплечья внутрикожно в дозе 0,1 мл. Результат учитывается через 24-48 ч. У людей, вакцинированных или инфицированных сибиреязвенной бациллой, в месте введения антраксина возникает гиперемия и инфильтрат.

Вопрос №24. Сибиреязвенный иммуноглобулин.

Это иммунобиологический сывороточный препарат, предназначенный для экстренной профилактики и лечения сибиреязвенной инфекции у человека.

Существует человеческий и лошадиный Сибиреязвенный иммуноглобулин.

1. Человеческий Сибиреязвенный иммуноглобулин – медицинский препарат, содержащий специфические АТ к возбудителю сибирской язвы, получают из сыворотки крови доноров, которые иммунизированы сибиреязвенной вакциной.

2. Лошадиный Сибиреязвенный иммуноглобулин – мед. Препарат , содержащий специфические АТ к возбудителю сибирской язвы, выделенные из сыворотки крови лошадей, которых подвергли гипериммунизации. Недостаток – гетерогенность, данные белки явл. Чужеродными . Поэтому необходимо проверять индивидуальную чувствительность организма по методу Безредке.

Вопрос №25. Характеристика возбудителей сибирской язвы.

Морфология: представляет собой крупную грамположительную палочку с обрубленными концами. В мазке из ЧК располагаются в виде длинных цепочек («бамбуковая трость»). Неподвижны. Образуют споры и капсулу. Споры овальной формы. При окраске метиленовым синим Леффлера- клетки выглядят синими, а капсулы малиново-красные.

Культуральные св-ва:

хорошо растёт на обычных питательных средах.

• Температурный оптимум 35-37 °С;

• оптимум рН 7,0.

В жидких средах растёт в виде ватных хлопьев, не вызывая помутнения среды. При посеве уколом в желатину даёт характерный рост в виде «перевёрнутой ёлочки» .

На твёрдых средах сибирская язва образует шероховатые, неровные, серовато-белые, волокнистые R-колонии. При малом увеличении колонии напоминают «голову Медузы» или «львиную гриву». Характерный вид колониям придают переплетающиеся цепочки бактерий сибирской язвы.

Б/х св-ва:

• Сибирская язва образует кислоту без газа на средах с глюкозой, фруктозой, мальтозой и декстрином.

• Гидролизует крахмал;

• образует ацетон и лецитиназу

• выделяют желатиназу

Антигенные св-ва:

• О- антиген

• Капсульный АГ

• Сибиреязвенный экзотоксин

Вопрос№26. Бруцеллин.

Препарат для выявления специфической сенсибилизации организма к бруцеллам путем постановки внутрикожной пробы по Бюрне. Препарат представляет собой фильтрат 3 недельной убитой нагреванием бульонной культуры бруцелл. Действующее начало препарата – специфический белок – аллерген.

При положительной реакции на месте введения появляется болезненная отечность красноватого или бледно-розового цвета. Реакцию оценивают на следующий день. Положительная реакция наблюдается у больных бруцеллезом, при бессимптомной инфекции, у вакцинированных людей.

Вопрос №27. Характеристика возбудителя сифилиса.

Морфология: Бледна трепонема – спиралевидная палочка. Плохо окрашивается по Граму и Романовскому-Гимзе. Выявляются при импрегнации серебром и при темнопольной микроскопии. Имеют периплазматические фибриллы. Перемещение происходит вращательными, поступательными и изгибательными движениями. Имеют Капсулоподобный слой- «чехол». Спор не образует.

Культуральные св-ва:

• Облигатные анаэробы,

• рН 7,2-7,6

• Т= 37

• Растут на питательном Бульоне с кусочками печени КРС. Образуется Придонный беловато- серый рыхлый мазок.

• Питательный агар Хоттингера из сердечной мышцы КРС. Образуются Мелкие сероватые колонии. Длительность культивирования 10-14 суток

Б/х св-ва:

• восстанавливает нитрат серебра в металлическое серебро;

• ферментация белка с выделением индола, сероводорода

• Образует вещество подобное гиалуроновой кислоте

Антигенные св-ва:

• Специфический белковый АГ

• Неспецифический липойдный АГ ( идентичен кардиолипину)

Вопрос№28. Характеристика возбудителя возвратного тифа.

Боррелии представляют собой тонкие спирохеты с 3-10 крупными завитками. Двигательный аппарат состоит из 15-20 фибрилл. Они хорошо воспринимают анилиновые красители, по Романовскому- Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет.

Могут культивироваться на сложных питательных средах , содержащих сыворотку, асцит, тканевые экстракты, при 28-35 ⁰С в атмосфере 5-10 % СО2, а так же в куриных эмбрионах при заражении в желточный мешок.

Вопрос №29. Характеристика возбудителя лептоспироза.

Лептоспиры- бактерии, имеющие извитую форму. Характеризуются наличием многочисленных мелких завитков, концы лептоспир загнуты в виде крючков. Не образуют спор и капсул; подвижны - - совершают поступательное, вращательное, сгибательное движения.

Лептоспиры анилиновыми красителями красятся плохо, по Романовскому-Гимзе окрашиваются в розовый цвет, грамотрицательны. Оптимальный способ изучения их морфологии темнопольная микроскопия.

Кульральные и б/х св-ва:

• Аэробы.

• Источником углерода и энергии служат липиды.

• Каталазо- и оксидазоположительны.

• Культивируются на питательных средах, содержащих сыворотку или сывороточный альбумин, при 28-30⁰С. Растут медленно

Антигеннве св-ва:

• Белковый АГ

• ЛПС